杜仲及杜仲提取物藥理作用研究進展 | 杜仲及杜仲提取物藥理作用研究進展 |
| 發(fā)布時間:2020-03-07 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):1487 |
杜仲及杜仲提取物藥理作用研究進展 1.中樞鎮(zhèn)靜作用。 取18-22g小白鼠，雌雄不拘，隨機分成3組，順次放入與藥理生理多用儀相連的測試盒內(nèi)，記錄鼠活動次數(shù)。給藥前先測試5分鐘的活動次數(shù)，然后分別以杜仲皮、葉煎劑及生理鹽水灌胃，于1、2、3h測試5分鐘內(nèi)活動次數(shù)，并與給藥前比較：杜仲皮煎劑15g／kg、杜仲葉煎20g／kg灌胃后，在3個不同測試時間內(nèi)，小白鼠活動次數(shù)均顯著減少(P＜0.01)；生理鹽水0.1ml／kg灌胃，小白鼠活動次數(shù)無明顯減少(P＞0.05)，見表3。
杜仲提取物綠原酸--上禾生物 073184213302 杜仲原料基地里的專業(yè)杜仲提取物生產(chǎn)企業(yè)--上禾生物 www.csnutilities.com
2.對免疫功能的影響：。 2.1.對細胞免疫功能的影響：。 2.1.1.對DNCB(2，4-二硝基氯苯)所致小鼠遲發(fā)型超敏反應的影響：昆明種小鼠，體重18-22g，分成六組，每組25只，藥物組灌胃杜仲液(10ml／kg／d)共10次，對照組分別灌胃去離子水和間日皮下注射環(huán)磷酰胺(30mg／kg／d)共3次。空白和藥物組在給藥第3天，環(huán)磷酰胺組在給藥后第2天皮下注射7%DNCB丙酮溶液(0.02ml／只)致敏，間隔2天同劑量再致敏1次，于第一次致敏后第10天，用1%DNCB丙酮液0.02ml，涂布左耳攻擊，右耳作對照，24小時后處死動物，煎取兩耳稱重，以兩耳重量之差值進行統(tǒng)計處理。兩次結(jié)果一致。表明灌胃杜仲皮、葉、枝、再生皮均能抑制DNCB所致小鼠的遲發(fā)型超敏反應。
2.1.2.對小鼠外周血液中T細胞百分比的影響：動物分組，每組10只，藥物組分別按10ml／kg體重灌胃藥物，對照組給以同體積去離子水，連續(xù)8次，于末次給藥后lh鼠尾取血涂片，孵育、染色、鏡檢，每只動物血片標本均查100個淋巴細胞，計算T和B淋巴細胞的百分比。結(jié)果杜仲對正常小鼠T淋巴細胞百分比均未見有影響。用同樣方法，除空白組外，其余各組小鼠在給藥的同時均皮下注射氫化可的松40mg／kg，測定藥物并用氫化可的松對外周血中T細胞百分比的影響。由于氫化可的松抑制細胞免疫，使T細胞百分比與空白組比較明顯降低(P＜0.001)，但服用黃芪和杜仲各組的T細胞百分比與正常組比較均無明顯差別(P＞0.05)，而與氫化可的松組比較側(cè)均有非常顯著的差異(P＜0.001)，表明杜仲同黃芪一樣，能對抗氫化可的松免疫抑制作用，具有調(diào)節(jié)細胞免疫平衡的功能。動物分組，每組10只，除空白組外，各組動物均分別在前腋下移植民S180細胞懸液(l：3)0.2ml，4天后開始灌胃藥液(20ml／kg.d)，連續(xù)8天，空白和帶瘤對照組灌胃同體積去離子水，于末次給藥后lh，取血同前法制作血片，鏡檢。荷瘤動物的細胞免疫水平比正常動物低下，兩者T細胞百分比有顯著差別(P＜0.05)，而服用杜仲各組的荷瘤動物的T細胞百分比明顯回升，與正常動物組比較無顯著差異(P＞0.05)，與未服藥的荷瘤動物組比較則有顯著差別(P＜0.05)，重復一次實驗，結(jié)果一致，表明杜仲葉、皮、枝、再生皮均有增強荷瘤小鼠細胞免疫功能的作用。但藥物各組的腫瘤重量與帶瘤對照組比較未見明顯差別(P＞0.05)。
2.對體液免疫功能的影響：。 2.1.對小鼠血清溶血素形成的影響小鼠依窩別、性別、體重均分于各組，連續(xù)給杜仲水煎劑10ml／kg／d灌胃8天后，眼眶取血測定HC50，結(jié)果空白組、藥物組的HC50分別為179.91，162.24，兩組間無顯著差別(P＞0.05)，環(huán)磷酰胺組于致敏當天一次肌肉注射(20mg／kg體重)的HC50為96.43，非常顯著的抑制正常小鼠血清溶血素的形成。以環(huán)磷酰胺20mg／kg體重于致敏的前一天、同天和間隔l天共3次頸部皮下注射造成小鼠溶血素形成低下。上述小鼠給予杜仲水煎劑10ml／(kg.d)10天，取血測定HC50。結(jié)果空白組、環(huán)磷酰胺對照組和藥物組的HC50分別為242.83、34.04和29.460表明杜仲對環(huán)磷酰胺所致血清溶血素形成低下小鼠無明顯影響(P＞0.05)。 2.2.2.對天花粉所致小鼠速發(fā)型超敏反應的影響以天花粉0.1mg／每鼠和0.2mg／每鼠間日頸部皮下注射致敏共2次。于致敏前一天開始給小鼠灌胃杜仲水煎劑10ml/kg，每天1次，連續(xù)5天后改為間日給藥1次，共給藥10次。另以天花粉50mg／每鼠(溶于5%氫氧化鋁液內(nèi))一次腹腔注射致敏，并同時按上法給藥，共給藥9次。實驗于致敏后第15天每鼠靜脈注射天花粉0.3mg攻擊，記錄動物死亡數(shù)。結(jié)果杜仲對天花粉可致小鼠速發(fā)型超敏反應均未見明顯影響(P＞0.05)。 2.2.3.對蛋清所致豚鼠過敏性休克的影響：按鄧文龍方法，給藥方法同上述天花粉實驗不加致敏后第15天進行攻擊。結(jié)果杜仲對蛋清所致豚鼠過敏性休克無保護作用(P＞0.05)。 2.3.對非特異性免疫功能的影響：。 2.3.1.對小鼠血中炭末廊清率的影響小白鼠100只，體重25-28g，雌雄并用。均分為藥物組和對照組。藥物組按6g／kg，每天口服杜仲水煎劑1次，連續(xù)6天。對照組分別口服同容積常水和黨參一黃芪煎劑(各3g／kg)。于末次給藥后24小時，各組小鼠分別由尾靜脈注射印度墨汁0.2ml，注射后2分鐘和20分鐘分別從眶靜脈取血25ul，吸洗至0.1%Na2CO2，2ml溶液中，搖勻，用72型分光光度計測定650mm的光密度，按公式計算吞噬指數(shù)K，K=(logC1-logC2)/(T2-T1)，式中C1為2分鐘(T1)血樣的光密度，C2為20分鐘(T2)血樣的光密度。K值與小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能成正比�？梢姸胖倨ぁ⑷~、枝、再生皮及黨參-黃芪組的吞噬指數(shù)增大，與常水組比較相差顯著，P＜0.05或0.001，表明它們能激活單核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬活血，提高小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能。 2.3.2.對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響：小白鼠129只，分兩批進行試驗。藥物組按12g／kg，每天口服杜仲水煎劑1次，連續(xù)6天，對照組分別口服同容積生理鹽水和黨參-黃芪煎劑(各6g／kg)，各組于給藥6天后分別腹腔注射鮮牛肉湯1ml／只，24小時后再腹腔注射2%雞紅細胞生理鹽水懸浮液0.5ml，40分鐘后處死動物，取腹腔炎性滲出物涂片，瑞氏染色，鏡檢，計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)(兩批實驗結(jié)果一致，合并計算)。杜仲皮、葉、枝、再生皮的吞噬百分率和吞噬指數(shù)顯著增大，表明杜仲具有增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用。小鼠168只，分兩批實驗，方法同前，只是從第3天給藥起，除空白組外，各組小鼠每天分別再肌肉注射氫化可的松20mg／kg，連續(xù)給藥3天。兩批實驗結(jié)果一致，并計算見表9�？梢娪捎跉浠傻乃傻囊种凭奘杉毎麑乖奶幚砗蛿z取，使氫化可的松組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)非常顯著減少、而杜仲皮、葉、枝和再生皮組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)比生理鹽水+氫化可的松組非常顯著增高。而且其值比空白生理鹽水組還大。表明杜仲能調(diào)整機體的免疫功能，對抗氫化可的松的免疫抑制作用。動物分組、每組10只，除空白組外，各組動物均分別右前腋下移植S180細胞懸液(l：3)0.2ml，并分別開始口服杜仲水煎劑(12ml／kg／d)，連續(xù)12次，對照組灌服同體積去離子水，于末次給藥后24小時按上法測定腹腔噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)。荷瘤小鼠腹腔巨噬細胞功能與正常動物組比較明顯降低，其吞噬百分率和吞噬指數(shù)顯著減少(P＜0.01)。但服用杜仲的荷瘤小鼠無論是吞噬百分率和吞噬指數(shù)與帶瘤對照組比較，均明顯升高(P＜0.001或0.01)，并使之恢復到正常水平，表明杜仲皮、葉、枝、再生皮有增強荷瘤小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用。
3.對垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)功能的影響：。 3.1.對大鼠蛋白性足腫脹的影響：大鼠60只，體重115-170g，按體重和性別均分為藥物組和對照組。藥物組按6g／kg／d，口服給予醇沉杜仲水煎液，連續(xù)給藥8天，對照組予生理鹽水。用容積法測量鼠足腫脹值；結(jié)果致炎3小時后，服用杜仲皮、葉、再生皮組的鼠足腫脹值減小，與對照組比較，相差顯著(P＜0.05)，但杜仲枝的作用則不明顯(P＜0.05)。 3.2.對大鼠外周血液中嗜酸性粒細胞的影響：大鼠96只，體重為50-80g，按體重和性別均勻分組。藥物組按6g／kg／d，分別口服給予杜仲皮、葉、枝、再生皮水煎劑，連續(xù)給藥6天，另用口服同體積生理鹽水，并于實驗前4小時肌注醋酸可的松50mg／kg作對照。用直接計數(shù)法測定大鼠外周血中嗜酸性粒細胞數(shù)，分別與各自給藥前測定2天的平均正常值比較，計算嗜酸性粒細胞降低百分率�？梢姸胖倨�、葉、枝、再生皮和醋酸可的松一樣能使大鼠外周血液中嗜酸性粒細胞減少。另用95只摘除腎上腺大鼠，同上服藥后，杜仲各組大鼠的外周血液中嗜酸性粒細胞未見減少，鼠生存期亦未見有延長。兩相比較說明杜仲的作用依賴于腎上腺的存在。 3.3.對小鼠外周血液中淋巴細胞的影響：小鼠170只。體重18-22g，均勻分組，分二批進行實驗，按10g／kg／d口服給予杜仲皮、葉、枝、再生皮水煎劑，連續(xù)給藥5天，另用口服生理鹽水和肌注氫化可的松(20mg/kg)組作對照，鼠尾部取血涂片，記錄每100個白細胞中的淋巴細胞數(shù)。兩批實驗結(jié)果一致，合并計算�？梢姸胖倨�、葉、枝、再生皮均可使小鼠血中淋巴細胞百分率降低，與生理鹽水組比較相差非常顯著(P＜0.001)，與氫化可的松組比較相差則不顯著(P＜0.05)，表明杜仲(皮、葉、枝和再生皮)和氫化可的松一樣均具有使小鼠血中淋巴細胞減少的作用。 3.4.對糖代謝的影響：。 3.4.1.對小鼠肝糖元的影響雄性小鼠122只，體重25-30g，均勻分組，分2批進行實驗，藥物組按10g／kg給予杜仲皮、葉、枝、再生皮水煎劑，連續(xù)給藥8次，另用口服常水和肌注氫化可的松40mg／kg(末兩天注射)組作對照。實驗各組小鼠停食14小時后，每鼠口服葡萄糖(10g/kg)，3小時后處死動物，取肝臟測定肝糖元。兩批實驗結(jié)果趨勢一致，合并計算，可見，杜仲皮、葉、枝、再生皮和氫化可的松一樣均使小鼠肝糖元含量增高，與常用組比較，相差非常顯著(P＜0.001)。表明杜仲有促進肝糖元堆積的作用。 3.4.2.對小鼠血糖的影響小鼠130只，體重25-27g，均勻分組。分二批進行實驗，藥物按10g／kg次，每日口服給藥2次，連續(xù)給藥9次。另用口服常水和肌肉注射氫化可的松30mg／kg(實驗前2小時注射)組作對照，實驗前24小時各組動物禁食，于末次給藥后2小時取血漿測定血糖，兩批實驗趨勢一致，合并計算。可見杜仲皮、葉、枝、再生皮和氫化可的松一樣均使小鼠血糖含量增高。與常水組比較相差非常顯著(P＜0.01或0.001)。表明杜仲皮、葉、枝、再生皮均有使血糖增高的作用。 3.5.對幼年小鼠胸腺的影響：仿AC-TH生物檢定法，將體重8-l1g斷乳的幼年小鼠，按窩別和體重，隨機分組。藥物分10g／(kg.d)和20g／(kg.d)兩個劑量進行實驗，皮下注射給藥，連續(xù)給藥5天。另用皮下注射同體積生理鹽水和ACTH0.5單位／只鼠(末3次每天注射1次)作對照，將鼠處死，稱重，取胸腺準確稱量(I0.5mg)，計算每100g體重的胸腺重量(mg)的平方根值�？梢娫趧┝繛�10g／kg時，杜仲皮和ACTH組的小鼠胸腺萎縮，與生理鹽水組比較相差顯著(P＜0.05)，而枝葉則不明顯(P＞0.05)；但當劑量增加為20g／kg，杜仲皮、葉、枝、再生皮，均使小鼠胸腺顯著萎縮(P＜0.01或0.001)，表明杜仲與ACTH同樣具有使小鼠胸腺萎縮的作用。但枝、葉劑量要大。 3.6.對大鼠腎上腺中維生素C含量的影響：體重60-90g的雄性大鼠37只，均勻分組，藥理組按10g／(kg·d)口服給藥，連續(xù)給藥8天。另用口服生理鹽水組作對照。動物斷頭處死，取腎上腺測定其中維生素C含量。實驗結(jié)果杜仲皮、葉、枝組大鼠腎上腺中維生素C含量與生理鹽水組比較，雖有降低，但無顯著差異(P＞0.05)。 3.7.對大鼠血漿皮質(zhì)醇的影響:大鼠69只，均勻分組。藥物組按10g／kg，每日口服給藥2次，連續(xù)給藥8天。另用口服常水和肌肉注射醋酸可的松(實驗前4小時肌注50mg／kg)和皮下注射ACTH組(實驗前3小時皮下注射2單位／100g)對照。于末次給藥后1小時將鼠斷頭處死，收集血液，離心取血漿測定皮質(zhì)醇含量。可見杜仲皮、葉、枝、再生皮和ACTH一樣，能使大鼠血漿皮質(zhì)醇含量增加，與常水組比較，差異非常顯著(P＜0.01或(0.001)。表明杜仲使皮質(zhì)醇分泌增加，并釋放入血液中。
4.抗腫瘤作用：制備紅杜仲的水提醇沉液A及注射液B，按照篩選規(guī)程對此兩制劑進行體內(nèi)抗腫瘤試驗。制劑A對小鼠S180實體瘤的生長有明顯抑制，經(jīng)3次實驗重復有效，抑制率31-52%。對小鼠U14實體瘤的生長也有抑制作用。制劑B對民S180實體瘤的作用不穩(wěn)定，三次實驗僅一次抑制率為45%，制劑B為制劑A除去鞣質(zhì)后所得制劑，因此可推測制劑A的抗腫瘤作用可能為鞣質(zhì)或與明膠一起結(jié)合或沉淀的物質(zhì)所致。 5.抗炎作用：給大鼠灌胃或皮下注射紅杜仲注射液400g(原生藥)／kg后，能減輕蛋清所致的足腫脹。皮下注射給藥作用強于灌胃給藥。在前2小時的作用比25mg／kg的氫化考的松的作用強，以后作用相當，均能維持6小時以上。皮下注射200g(原生藥)／kg紅社仲注射液也能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增高，腹腔沖洗液的光密度為0.116±0.055，與對照組0.212±0.047相比顯著為低(P＜0.01)。 6.降壓作用：實驗動物兔(2.5-3.2kg)7只，狗(15kg)2只，雌雄兼用。動物麻醉后，按常規(guī)方法分離頸總動脈及氣管并插管，聯(lián)接于水銀檢壓計，用JL-3三道生理記錄儀記錄其血壓及呼吸。以100%生杜仲、炒杜仲和砂燙杜仲的水煎劑分別由頸靜脈給藥，劑量為1ml／kg。3種杜仲水煎劑對家兔和狗都有明顯的降壓作用，但生杜仲降壓作用較弱，炒杜仲炭和砂燙杜仲的作用幾乎完全相同，其降壓的絕對值數(shù)相當于生杜仲的兩倍。 7.對子宮的抑制作用：將150-220g的雌性大白鼠猛擊頭部致死后，立即取出子宮分叉處外的一段，洗去血液，懸掛于YSD-離體器官測定儀上、營養(yǎng)液為洛氏液，調(diào)節(jié)恒溫至31℃±0.2℃，通入空氣，在10ml營養(yǎng)液中加入100%杜仲水煎液0.5ml，保證給藥、記錄時間的一致性，記錄3種不同杜仲樣品對子宮的影響和對抗垂體后葉素的作用。結(jié)果見表20，可見3種杜仲均能顯著抑制大白鼠離體子宮的自發(fā)活動，降低其頻率。同時，還可見到其收縮強度降低。另外，3種杜仲均能對抗垂體后葉素對離體子宮的作用。另鹽炙杜仲對中孕小白鼠離體子宮自主收縮的抑制作用增強。 8.強壯作用：。 8.1.對動物活動能力的影響：取體重22±2g的小白鼠，雌雄不拘，隨機分成給藥組和對照組，按小白鼠游泳法進行抗疲勞試驗。實驗時，置小白鼠于水溫28℃±1℃、容積為64×34×40cm的游泳槽內(nèi)，測試鼠沉入水面下7秒所需時間。結(jié)果自飲組：7天組(n=22)和14天組(n=18)，自飲100%杜仲皮和150%杜仲葉煎劑，并與對照組比較，游泳時間差異無顯著意義(P＞0.05)。給藥組：21天組給予杜仲皮煎劑15g／kg，杜仲葉煎劑20g／kg灌胃，并與常水對照組相比，皮煎劑組差異有顯著意義(P＜0.05)，葉煎劑組差異無顯著性意義(P＞0.05)。 8.2.對動物抵抗能力的影響：。 8.2.1.小白鼠抗凍實驗:取體重22±2g的小白鼠，雌雄不拘，隨機分成給藥組和對照組，實驗前禁食10小時，分別給以杜仲皮、葉煎劑及葉沖劑，以常水對照，按性別將體重相近的小白鼠，每2只置于同一鐵籠中，放入-3℃的冰箱中，測試動物生存時間(X±SD)。結(jié)果：自飲30天：10%杜仲皮煎劑組小白鼠生存時間為242.0±74.0分鐘(n=14)；10%杜仲葉煎劑組為249.0±59.0分鐘(n=20)；常水對照組為175.0±58分鐘(n=17)。用藥組和對照組之間有顯著差異(P＜0.01)。自飲28天，20%杜仲葉沖劑組生存時間為261.0±41.0分鐘(n=7)，常水對照組為174.0±53分鐘(n=14)，兩組差異有顯著意義(P＜0.05)。 8.2.2.小白鼠耐缺氧實驗小白鼠分別給予杜仲皮煎劑和杜仲時沖劑，以生理鹽水或常水對照，受試鼠以只為單位，放入容量為250ml的廣口瓶內(nèi)，瓶口涂凡士林密封，測試動物在瓶內(nèi)的成活時間(X±SD)。結(jié)果：100%杜仲皮煎劑10g／kg灌胃組，小白鼠成活時間為46.0±12.0分鐘(n＝7)，生理鹽水0.1ml／kg組為32.0±12.0分鐘(n=9)，兩組差異有顯著意義(P＜0.05)；20%杜仲葉沖劑自飲28天組，小白鼠成活時間為34.0±6.0分鐘(n=7)，常水對照組為27.0±5.0分鐘(n＝11)，兩組差異有顯著意義(P＜0.05)。
9.對血漿cAMP和cGMP含量的影響：昆明種小鼠，按窩別、性別和體重，每2只為1對，均分對照組和實驗組，每給10對。按10ml／kg體重灌胃杜仲醇沉水煎液，對照組予等量去離子水，每天組藥1次，連續(xù)5天，于末次給藥后1h，斷頭取血，以每一對2只動物血樣合為1個樣本，用放射免疫法測定血漿中cAMP和cGMP含量、結(jié)果對照組cAMP含量為70.88±4.53(X±SE下同)，杜仲皮組cAMP含量為100.39±15.45(P＜0.05)；cGMP含量，對照組為54.50±16.42，杜仲皮組137·84±25.08(P＜0.05)，表明杜仲可同時使血漿中cAMP和cGMP含量升高，顯示杜仲對環(huán)核苷酸代謝有調(diào)節(jié)作用。同時實驗證明杜仲葉、枝、再生皮亦可引起血漿中cAMP和cGMP含量升高。杜仲及杜仲提取物藥理作用研究進展
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