五香止痛散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 | 五香止痛散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 |
| 發(fā)布時間:2020-05-31 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):754 |
探討五香止痛散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 方法采用薄層色譜法對該方中的厚樸、木香與丁香進(jìn)行鑒別；采用雙波長鋸齒掃描法測定方中厚樸酚的含量。 結(jié)果薄層色譜鑒別可檢出樣品中對應(yīng)薄層斑點，用薄層掃描法可測定出厚樸酚的含量。 結(jié)論用該方法作定性鑒別簡便、快速、專屬性強(qiáng)，可有效控制制劑的質(zhì)量。 【關(guān)鍵詞】 五香止痛散 厚樸 木香 丁香 薄層色譜 五香止痛散由厚樸、木香、丁香等中藥組成。具有理氣止痛的作用，臨床上用于治療小兒腹脹、腹痛等療效顯著。為了控制該制劑質(zhì)量，采用薄層色譜法對厚樸、木香、丁香進(jìn)行鑒別，采用雙波長鋸齒掃描法測定方中厚樸酚的含量，為五香止痛散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供定性定量的檢測方法。 1 儀器和試藥 1.1 儀器 tg328b型電光分析天平， cs-930型薄層掃描儀（日本島津），微量進(jìn)樣器。 1.2 試藥和供試品薄層層析用硅膠g（青島海洋化工廠），所用試劑均為分析純。對照品：厚樸酚、和厚樸酚（批號分別是110729-200309， 730-8702），木香對照藥材（批號120921-200405），丁香酚（批號0725-200008），購于中國藥品生物制品檢定所。五香止痛散由河北保定中醫(yī)院提供（批號040812-1，041011-1，041102-1），陰性對照按處方及制備工藝分別不加厚樸、木香、丁香制成。 2 方法與結(jié)果 2.1 鑒別 2.1.1 厚樸的薄層鑒別取本品10 g，加醋酸乙酯30 ml，加熱回流30 min，放冷，濾過，濾液用2%氫氧化鈉溶液提取3次，20 ml/次。合并堿液，加鹽酸調(diào)節(jié)ph值至1～2，用三氯甲烷提取3次，20 ml/次。合并三氯甲烷液，水洗 ，三氯甲烷液用無水硫酸鈉脫水后，80℃水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 ml使溶解，取上清液作為供試品溶液。另取厚樸酚、和厚樸酚對照品，加甲醇制成每毫升各含1mg的混合溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法［1］實驗,吸取上述供試品溶液20 μl，對照品溶液5 μl，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠gf254薄層板上，以苯一醋酸乙酯（6∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。結(jié)果見圖1。 2.1.2 木香的薄層鑒別［1］取本品10 g，加乙醚40 ml，浸漬4 h，時時振搖，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5 g，加乙醚10 ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法［1］實驗，吸取上述供試品溶液5～10 μl，對照藥材溶液4 μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以環(huán)己烷—丙酮（10∶3）為展開劑。展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一相同的藍(lán)紫色斑點。結(jié)果見圖2。 2.1.3 丁香的薄層鑒別取本品6 g，加乙醚40 ml，冷浸1 h，濾過，揮去乙醚，殘渣 加乙醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取丁香酚對照品，加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法［1］實驗，吸取上述兩種溶液各1～2 μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以苯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。結(jié)果見圖3。 2.2 厚樸酚的含量測定 2.2.1 供試液的制備精密稱取本品10 g，加醋酸乙酯30 ml，加熱回流30 min，放冷，濾過，濾液用2%氫氧化鈉溶液提取3次，20 ml/次，合并堿液，加鹽酸調(diào)節(jié)ph值至1～2，用三氯甲烷提取3次，20 ml/次，合并三氯甲烷液，水洗 ，三氯甲烷液用無水硫酸鈉脫水后，80℃水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 ml溶解定容，取上清液作為供試品溶液。 2.2.2 厚樸酚對照品溶液的制備稱取厚樸酚對照品用甲醇溶解制成對照品溶液0.5 mg/ml備用。 2.2.3 掃描條件［2］雙波長反射法鋸齒掃描，參比波長λr=260 nm，測定波長λs=290 nm，sx=3。 2.2.4 線性關(guān)系將厚樸酚對照液1，2，3，4，5，6 μl點于cmc-na做粘合劑的硅膠gf254預(yù)制板上，按定性實驗中層析條件展開，進(jìn)行掃描測定,峰面積和點樣量線性方程為y=2 987.23+798.64x,r=0.999 4,線性范圍為0.3～3.6 μg。 2.2.5 穩(wěn)定性和精密度實驗對同一薄層板上同一斑點依法每隔30 min掃描1次，共測定4 h，計算rsd=2.77，說明本實驗條件下4 h內(nèi)測定樣品穩(wěn)定。對同一薄層板上同一斑點連續(xù)掃描7次，測得峰面積值，計算rsd=2.35%.說明儀器精密度良好。 2.2.6 樣品含量測定精密吸取樣品溶液10 μl，及厚樸酚對照液2，4 μl，交叉點于同一cmc-na硅膠g薄層板上依法展開掃描測定。分別測定3批樣品。測定結(jié)果見表1。表1 樣品的厚樸酚含量測定結(jié)果（略） 2.2.7 加樣回收率測定取已知含量的樣品7份，精密測定，精密填加不同量的厚樸酚對照品適量，按含量測定項操作，計算回收率，結(jié)果平均回收率為96.37%，rsd=1.66%(n=5)。 3 討論 除上述3項鑒別外，還參照《中國藥典》2000年版ⅰ部等資料對制劑中陳皮進(jìn)行了薄層色譜鑒別，采用橙皮苷對照藥材對照，結(jié)果由于分離效果不十分理想，斑點不清晰突出，不能說明問題，故未列入正文。 五香止痛散是由厚樸、丁香、木香等16味中藥組成的復(fù)方制劑，成分較為復(fù)雜，這給提取分離及薄層測定均帶來一定困難。為了能有效地從產(chǎn)品中分離出厚樸有效成分厚樸酚進(jìn)行薄層測定，我們根據(jù)厚樸酚的性質(zhì)對提取溶劑進(jìn)行反復(fù)研究、實驗，最后選用乙酸乙酯作為提取溶劑。經(jīng)硅膠gf254薄層層析后，獲得滿意的結(jié)果。薄層掃描測定的回收率和重現(xiàn)性也良好。
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