減味藿香正氣水藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究 | 減味藿香正氣水藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究 |
| 發(fā)布時(shí)間:2020-05-31 信息來(lái)源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):833 |
探討減味藿香正氣水作用于腸道的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
方法采用SPSS統(tǒng)計(jì)分析方法，以40個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積和對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體十二指腸的抑制率進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析。
結(jié)果得到40個(gè)色譜峰的相關(guān)系數(shù)和回歸方程。
結(jié)論確定色譜峰恐和置，所代表的化學(xué)成分為該藥對(duì)家兔離體兔腸抑制的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，其中色譜峰置，為厚樸酚。
【關(guān)鍵詞】 減味藿香正氣水；藥效物質(zhì)基礎(chǔ)；厚樸酚 pharmacodyamic material basis of jianwei huoxiang zhengqi liquid
li kang,song fenyun,li huandan,yuang jinsong,zhao lin key words:jianwei huoxiang zhengqi liquid; pharmacodyamic material basis; magnolol 減味藿香正氣水是在湖南省中醫(yī)研究院彭志輝［1］等人用正交設(shè)計(jì)法對(duì)藿香正氣水組方研究的基礎(chǔ)上減味得到，從原來(lái)的11味降低到5味，包括厚樸、陳皮、蒼術(shù)、半夏、廣藿香油。減味藿香正氣水對(duì)家兔離體十二指腸具有很強(qiáng)的抑制率［1］。本文以減味藿香正氣水40個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積為自變量，對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體十二指腸的抑制率為因變量，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析，探討其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。 1 儀器與材料 1.1 儀器肌肉張力換能器jz100型（高碑店市新航機(jī)電設(shè)備有限公司），電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠），電熱恒溫箱（北京長(zhǎng)源實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠），氧氣吸入器（江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備有限公司），氧氣瓶（深圳中宏工業(yè)氣體有限公司），agilent1100型高效液相色譜儀。 1.2 藥物減味藿香正氣水根據(jù)中國(guó)藥典2005版全方制備方法減味制備成1 g·ml-1的藥液。厚樸、陳皮、蒼術(shù)、半夏由深圳一致藥材公司提供，廣藿香油購(gòu)自江西吉水贛州香料油廠（批號(hào)20020302），氯乙酰膽堿購(gòu)自上�；瘜W(xué)試劑廠，tyrodes液自制。 1.3 試劑乙腈和甲醇為色譜純 (德國(guó)merk公司)；氯仿為分析純 (汕頭光華化學(xué)試劑廠)；水為超純水（>18兆歐），并經(jīng)0.45 μm水系濾膜過(guò)濾；厚樸酚和甲基橙皮苷購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。 1.4 動(dòng)物家兔購(gòu)自中山大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,合格證號(hào) scxk2003011。 2 方法與結(jié)果 2.1 10份減味藿香正氣水的制備 厚樸3～9 g，陳皮3～9 g，蒼術(shù)3～9 g，半夏3～9 g，廣藿香油30～90 μl (廣藿香藥典用量3～9 g，廣藿香油在藿香正氣水中體積用量為其他藥材質(zhì)量的0.01倍，經(jīng)計(jì)算為30～90 μl) ，進(jìn)行均勻設(shè)計(jì)，得到10個(gè)組方。厚樸、陳皮、蒼術(shù)用60%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇作溶劑，在室溫浸漬24 h后進(jìn)行滲濾，分別收集滲濾液各400 ml，在40 ℃減壓濃縮至小體積；生半夏用冷水浸泡，每8 h換水1次，泡至透心，并按照27∶320的質(zhì)量比加入干姜,加10倍質(zhì)量的蒸餾水煎煮2次，第1次3 h，第2次2 h，合并水煎液，常溫減壓濃縮至小體積；廣藿香油用乙醇適量溶解。以上所得到的醇提液、水煎液和廣藿香油乙醇液合并混勻，用60%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇適量調(diào)整，得到生藥材質(zhì)量濃度為1 g·ml-1的10個(gè)樣品，于4 ℃冰箱冷藏。 2.2 對(duì)乙酰膽堿刺激的離體兔腸的抑制實(shí)驗(yàn)［2］ 選健康普通家兔,體重(2.5±0.7) kg,雌雄兼用,禁食12 h,自由飲水。將動(dòng)物擊昏后剖開腹腔，剪取10～15 cm腸管,迅速放入盛有tyrodes液的平皿中洗凈并浸浴,當(dāng)腸管活動(dòng)明顯時(shí),將其剪成約2 cm的腸段標(biāo)本,兩端對(duì)角穿線,放在盛有100 ml臺(tái)氏液的電熱恒溫箱中（37±0.5）℃水浴,上端連接張力換能器,下端系于l型鉤上,同時(shí)通入氧氣（1~2個(gè)氣泡/s）。標(biāo)本負(fù)荷1 g,平衡30 min待系統(tǒng)穩(wěn)定后,開始實(shí)驗(yàn)。描記5 min正常曲線后,向浴管中加入氯乙酰膽堿（22 mg·l-1）,使終質(zhì)量濃度達(dá)到10-6 g·ml-1，腸管立即收縮。待收縮達(dá)到峰值后，用臺(tái)式液洗滌3次，使腸管收縮恢復(fù)至基線水平，反復(fù)操作，使峰值穩(wěn)定在同一收縮高度作為對(duì)照值，然后給藥，觀察記錄曲線變化5 min,換腸平滑肌,重復(fù)實(shí)驗(yàn)。更換腸管及藥液時(shí)更新臺(tái)氏液。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。記錄給藥前的平均收縮振幅和給藥后的平均收縮振幅，求算給藥之后的平均抑制率（%）。 2.3 高效液相指紋圖譜共有色譜峰的確定［3］色譜條件：柱溫，25 ℃；流速，1.0 ml·min-1；色譜柱，zorbax c18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)； 內(nèi)標(biāo)，甲基橙皮苷；進(jìn)樣量，10 μl。 氯仿提取物的檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，梯度洗脫條件為水乙腈（0.01 min 78∶22；10 min 76∶24；35 min 65∶35；45 min 60∶40；65 min 50∶50；80 min 35∶65；85 min 78∶22）。 殘?jiān)崛∥锏臋z測(cè)波長(zhǎng)294 nm，梯度洗脫條件為水乙腈甲醇 （0.01min 98∶1∶1；5 min 94∶5∶1；15 min 89∶10∶1；25 min 87∶12∶1；40 min 87∶12∶1；55 min 74∶25∶1；60 min 98∶1∶1）。 按照液相色譜條件對(duì)10份處方樣品進(jìn)行測(cè)定，其中is為參照物色譜峰，見圖1。確定其中40個(gè)色譜峰為共有峰，得到與參照物色譜峰的相對(duì)峰面積。表1列出其中主要色譜相對(duì)峰面積值和10個(gè)樣品對(duì)離體兔腸的平均抑制率。 2.4 以40個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積為自變量(x)，對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體十二指腸的抑制率為因變量(y)，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析,相關(guān)分析結(jié)果見表2�；貧w方程為：y=-11.029+157.199 x3+2.764 x25 a.氯仿提取物圖譜； b.氯仿萃取后提取物圖譜 圖1 減味藿香正氣水（樣品5）hplc圖譜（略） fig.1 hplc chromatograms of jianwei huoxiang zhengqi liquid(no.5) 表1 10個(gè)樣品共有色譜峰的相對(duì)峰面積和平均抑制率（略） tab.1 relative peak areas and mean inhibition rates of common peaks in 10 samples 表2 40個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積與抑制率相關(guān)分析結(jié)果（相關(guān)系數(shù)）（略） tab.2 pearsons correlation coefficients between values from pharmacological experiment and 40 independent 3 結(jié)論 以40個(gè)減味藿香正氣水共有色譜峰為自變量，以對(duì)乙酰膽堿刺激的離體兔十二指腸的抑制率為因變量，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析，色譜峰x3和x25與藥理作用呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為正，并且x3相關(guān)系數(shù)顯著；從回歸方程可以得出，色譜峰x3和x25所代表的化學(xué)成分其量的增加能增強(qiáng)對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體兔腸的抑制作用強(qiáng)度。確定色譜峰x3和x25所代表的化學(xué)物質(zhì)為減味藿香正氣水對(duì)家兔離體兔十二指腸抑制的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的一部分。其中，色譜峰x25所代表的化學(xué)成分為厚樸酚，這與藥味最佳配比研究中以厚樸為主藥相符。
免 責(zé) 申 明：
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