顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素（上禾生物）的提取純化及抗氧化活性研究

二氫楊梅素具有多種生理活性,來(lái)源廣泛,在顯齒蛇葡萄中具有很高的含量,目前對(duì)其的研究主要為藥理方面,為了真正實(shí)現(xiàn)物盡其用,進(jìn)一步系統(tǒng)研究其提取純化和應(yīng)用性質(zhì)等是非常必要的.目前對(duì)二氫楊梅素純化的研究集中在色譜法,此法在生產(chǎn)上投資大,制備規(guī)模小,不利于工業(yè)化.因此本研究以顯齒蛇葡萄幼嫩芽頭干葉為原料致力于易于工業(yè)化生產(chǎn)二氫楊梅素的結(jié)晶條件研究.并對(duì)其抗氧化機(jī)理,應(yīng)用條件,穩(wěn)定性及分子修飾進(jìn)行了系統(tǒng)的研究.

1. 首先鑒定了顯齒蛇葡萄芽頭干葉中二氫楊梅素staherb化學(xué)結(jié)構(gòu),其化學(xué)命名為3,5,7,3,4,5六羥基二氫黃酮醇.在此基礎(chǔ)上,建立了高效液相色譜法測(cè)定二氫楊梅素的操作條件.色譜柱為Symmetry 300~(TM) C_(18) 3.5×150mm;流動(dòng)相:乙腈:水:乙酸=1:9:0.1,pH 值為3.5;柱溫:25℃;流速:1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):288nm;進(jìn)樣量:10μL.樣品濃度在10μg/mL～100μg/mL 范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性相關(guān)性.

2. 本研究所采用的原料顯齒蛇葡萄幼嫩芽頭干葉中二氫楊梅素含量高達(dá)20.27%;總黃酮含量為30.22%.蛋白質(zhì)含量為8.69%;可溶性糖為9.10%;總灰分6.52%.含有氨基酸種類達(dá)17 種以上.采用水熱提取法分離制備顯齒蛇葡萄幼嫩芽頭干葉中的二氫楊梅素,料水比為1:20,100℃下提取30min 為較好的制備條件,提取率可達(dá)22.00±0.99%;純度為51.60±1.21%.

3. 二氫楊梅素在水中的溶解度隨溫度變化非常大, 100 ℃溶解度為1.5900g/100g 水,25℃下溶解度為0.0691g/100g 水.二氫楊梅素在乙醇,甲醇,正丙醇,異丙醇,乙二醇,丙二醇,丙酮,乙酸乙酯,乙酸以及正己烷等常用有機(jī)溶劑中的溶解度較高;在乙醇溶液中的溶解度隨溫度變化較小,隨濃度變化較大.

4. 采用水重結(jié)晶法以15:1000 的料水比進(jìn)行等溶質(zhì)濃度重結(jié)晶,5 次重結(jié)晶后產(chǎn)率為10.83±0.36%;濃度梯度重結(jié)晶法較等溶質(zhì)濃度重結(jié)晶法產(chǎn)率提高5%以上,產(chǎn)品純度均可達(dá)到95%以上.產(chǎn)品外觀為黃白色細(xì)針狀晶體,無(wú)味.有機(jī)溶劑重結(jié)晶法,選擇60%濃度乙醇為適合的二氫楊梅素結(jié)晶體系,經(jīng)過(guò)5 次重結(jié)晶后,產(chǎn)品的純度可達(dá)98%,晶體為黃色,棒狀,長(zhǎng)度可達(dá)3mm,結(jié)晶產(chǎn)率為30.01±1.26%,較水重結(jié)晶法高2 倍左右.水重結(jié)晶法和60%乙醇溫度梯度重結(jié)晶法得到的二氫楊梅素結(jié)晶產(chǎn)品晶形不同,均具有較高的結(jié)晶度.

5. 固態(tài)二氫楊梅素staherb具有良好的熱穩(wěn)定性,加熱到245℃才發(fā)生分解.但在水相中隨時(shí)間和溫度的增加會(huì)變得不穩(wěn)定.pH 值是影響二氫楊梅素穩(wěn)定性的重要因素.堿性條件下(pH8.0),二氫楊梅素結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,達(dá)到pH=9.0 后二氫楊梅素分子結(jié)構(gòu)徹底被破壞.酸性和中性條件(pH7.0)下,二氫楊梅素則表現(xiàn)出良收起��

關(guān)鍵詞：二氫楊梅素 顯齒蛇葡萄 結(jié)晶 穩(wěn)定性 抗氧化 量子化學(xué)計(jì)算

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二氫楊梅素  5-98%

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