厚樸提取物厚樸酚與和厚樸酚液相檢測條件分析 | 厚樸提取物厚樸酚與和厚樸酚液相檢測條件分析 |
| 發(fā)布時間:2020-10-01 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):1105 |
| 厚樸提取物厚樸酚與和厚樸酚液相檢測條件分析 色譜條件 色譜柱為Diamonsil® C18（2）（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇-水（70∶30）；檢測波長294 nm；柱溫30 ℃；體積流量1 mL/min；進樣量10 μL；在此色譜條件下，厚樸酚、和厚樸酚分離度均大于1.5，理論塔板數(shù)按厚樸酚峰計算不低于3 800。 對照品及供試品溶液的制備 對照品溶液的制備 精密稱取厚樸酚對照品2.01 mg、和厚樸酚對照品2.32 mg，分別置于25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制成含厚樸酚80.40 μg/mL與和厚樸酚92.80 μg/mL混合對照品溶液。 供試品溶液的制備 厚樸飲片粉碎，過40目篩，置于60 ℃的烘箱中烘干后裝入料筒，置入超臨界CO2萃取裝置進行提取，收集分離釜1和2的提取物并均勻混合，精密稱取提取物適量，置于25 mL量瓶中，加甲醇使之溶解并稀釋至刻度，超聲5 min，靜置，過0.45 μm的微孔濾膜，即得供試品溶液。 HPLC分析方法學(xué)考察 色譜條件的選擇 分別采用甲醇-水的不同配比（78∶22、70∶30、65∶35）進行篩選，在甲醇-水（70∶30）的流動相比例下目標峰不受其他雜質(zhì)峰的干擾，峰形對稱。用紫外分光光度計測定厚樸酚對照品的吸光度，確定檢測波長294 nm。在上述色譜條件下，和厚樸酚、厚樸酚分離良好，保留時間分別為8.4、11.2 min。色譜圖見圖1。 標準曲線的制備 分別精密吸取厚樸酚與和厚樸酚對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL置于5 mL量瓶中，甲醇定容至刻度，搖勻，制成不同質(zhì)量濃度梯度的系列對照品溶液，按“2.3.1”項下方法進樣10 μL測定峰面積，以峰面積為縱坐標（Y）、質(zhì)量濃度為橫坐標（X）繪制標準曲線，得回歸方程，厚樸酚的線性回歸方程分別為Y＝12 554.8 X＋30 696.6，r＝0.999 3；和厚樸酚為Y＝16 703.9 X＋70 459.8，r＝0.999 1；結(jié)果表明，厚樸酚與和厚樸酚進樣質(zhì)量濃度分別在8.04～80.4 μg/mL和9.28～92.8 μg/mL與峰面積呈良好的線性關(guān)系。 2.3.3 精密度試驗 分別取厚樸酚、和厚樸酚對照品溶液各10 μL，依法連續(xù)進樣6次，測定峰面積，結(jié)果厚樸酚與和厚樸酚峰面積的RSD分別為2.41%和1.86%，表明儀器精密度良好。 2.3.4 重復(fù)性試驗 取厚樸飲片按“2.2.2”項下方法平行配制6份，進樣測定樣品中厚樸酚與和厚樸酚的含量，結(jié)果表明厚樸酚與和厚樸酚質(zhì)量分數(shù)的RSD分別為2.62%、2.78%，說明所建立的分析方法重復(fù)性較好。 2.3.5 穩(wěn)定性試驗 精密吸取“2.3.4”項重復(fù)性試驗1號供試品溶液，分別于0、2、4、6、12、24 h時測定峰面積。結(jié)果厚樸酚、和厚樸酚峰面積的RSD分別為1.63%和2.13%，表明所配制的供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。 2.3.6 加樣回收率試驗 精密稱取6份已測定厚樸酚與和厚樸酚含量的厚樸粗提取物，置于5 mL量瓶中，每份精密加入取厚樸酚與和厚樸酚對照品溶液各1 mL，加甲醇至近刻度線，搖勻，超聲30 min，放冷后定容至刻度線，微孔濾膜濾過。按“2.3.1”項下色譜條件測定，分別計算加樣回收率，結(jié)果厚樸酚與和厚樸酚的平均加樣回收率分別為99.15%、99.07%，RSD分別為2.06%、3.10%。
上禾生物----厚樸原料基地里的厚樸提取物生產(chǎn)企業(yè)
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