999国内精品视频免费_国产真人作爱免费视頻_口口亚洲国产综合Av_99Re国产精品视频

黃芪和杜仲對(duì)家兔實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血的保護(hù)作用

呂錦芳, 戴麗, 寧康健

(安徽技術(shù)師范學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系, 安徽鳳陽(yáng)233100)

摘要: 利用靜脈注射垂體后葉素建立家兔急性心肌缺血模型, 以心電圖Ⅱ?qū)��?lián)的T波波幅、S2T段波幅、P2R間期、心率為指標(biāo), 研究了不同劑量黃芪、杜仲對(duì)家兔急性心肌缺血的保護(hù)作用。結(jié)果表明, 在抑制心電圖ΣT和ΣS2T增幅方面, 黃芪的作用明顯優(yōu)于杜仲, 高、低劑量的黃芪作用存在極顯著差異(P < 0101) , 而高、低劑量的杜仲作用差異不顯著( P > 0105) 。高劑量黃芪的ΣT增幅與丹參(陽(yáng)性對(duì)照) 比較接近( P > 0105) 。低劑量的黃芪抑制心率變緩的作用要大于高劑量的黃芪和丹參( P < 0101) , 不同劑量的杜仲抑制心率變緩的作用較弱, 并存在明顯的心律不齊。表明黃芪對(duì)家兔急性心肌缺血具有較強(qiáng)的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞: 黃芪; 杜仲; 家兔; 急性心肌缺血; 保護(hù)作用

中圖分類號(hào): R93117　　　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A　　　文章編號(hào): 1000 2030 (2005) 02 0080 05

Protective effects of Astraga lus membranacers and Eucomm ia u lmoides

on exper imental acute myocardial ischem ia in rabbit

LB J in2fang, DA ILi, N ING Kang2jian

(Department ofAnimal Science, Anhui Technical Teachers College, Fengyang 233100, China)

Abstract: Model of acute myocardial ischemia (AM I) was built by using p ituitrin in rabbits. The p rotective effect of different dosage of A. m em branacers and E. ulm oides were observed on the AM I rabbits according to the index of wave T amp litude, seg2 ment S2T amp litude, intermit time of P2R and heart rate from lead Ⅱ electrocardiogram ( ECG). Salvia m iltiorrhiza was severved as a positive control in this experiment. The results showed that in inhibiting the ΣT and ΣS2T raising range of ECG, different dosages of A. m em branacers were superior to E. ulm oides ( P < 0101) , and there were signifinant differences between the two2 dose of A. m em branacers ( P < 0101). However, no differences existed between the high and low dose of E. ulm oides ( P >0105). The similar results were observed in the ΣT raising range of high dose of A. m em branacers and S. m iltiorrhiza ( P >0105). Inhibitive effect of low dose of A. m em branacers was stronger than the high doses of A. m em branacers and S. m iltiorrhiza( P < 0101) while the effects of different doses of E1ulm oides were weaker than others in inhibting slowing heart rate and there wasobvious arrhythmia in animals treated with different doses of E1ulm oides. Conclusion: A. m em branacers had a strong p rotectiveeffect on the experimental induced AM I of rabbits.

Key words: Astragalus m em branacers; Eucomm ia ulm oides; rabbits; acute myocardial ischemia; p rotective effect

中藥被廣泛地應(yīng)用于心血管疾病的臨床治療與預(yù)防, 收到良好的效果。自20世紀(jì)70年代至今, 有關(guān)抗心肌缺血的研究一直是現(xiàn)代中藥藥理研究的熱點(diǎn)之一。但研究所涉及的中藥以復(fù)方和中藥單體較多, 單味中藥研究較少[ 1, 2 ] 。在單味中藥方面, 梁明等[ 3 ]給心肌缺血的大鼠靜脈注射黃芪凍干粉, 明顯對(duì)抗了S2T段及T波的變化, 心肌缺血得到了顯著的改善。尹俊等[ 4 ]研究了益母草注射液對(duì)心肌缺血的大鼠血液流變學(xué)及血栓形成的影響。目前關(guān)于其他單味中藥抗急性心肌缺血作用的研究尚未見報(bào)道。急性心肌缺血在心電圖(ECG) 上的主要表現(xiàn)是S2T段抬高、T波高聳、心率變緩和心律失常等,在Ⅱ?qū)��?lián)表現(xiàn)最為明顯[ 5 ] 。凡能對(duì)抗腦垂體后葉素收縮血管作用的中藥, 均可使缺血性心電圖得到改善而具有抗心肌缺血的作用[ 6 ] 。中藥藥理學(xué)研究表明, 丹參對(duì)改善心血管功能活動(dòng)具有很高的應(yīng)用價(jià)值, 并且已普遍用于心血管臨床; 黃芪和杜仲對(duì)人心血管活動(dòng)亦有一定的作用, 但作用有別。本研究采用電生理學(xué)的方法, 以丹參( Salvia m iltiorrhiza) 作為陽(yáng)性對(duì)照, 研究了不同劑量的黃芪(Astragalusm em branacers) 和杜仲( Eucomm ia ulm oides Oliv. ) 皮對(duì)家兔實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血的保護(hù)作用。

1　材料與方法

1.1　主要儀器與藥品

1.1.1　儀器　計(jì)算機(jī)(聯(lián)想開天2800, CPU: PⅣ 118 G、256M) 、BL 410 New Century生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)(成都泰盟電子科技有限公司) 、TDL80 2B 臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠) 、RE52 98旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司) 、SHB Ⅲ循環(huán)式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司) 、FA1004電子天平(上海天平儀器廠) 等。

1.1.2　藥品　垂體后葉素注射液(6 U·mL - 1 , 批號(hào)031001, 上海禾豐制藥有限公司) 、戊巴比妥鈉(批號(hào)F20021216, 中國(guó)醫(yī)藥上�；瘜W(xué)試劑公司) 、丹香冠心注射液(曾用名: 復(fù)方丹參注射液,015 g·mL - 1 , 批號(hào)030913, 上海第一生化藥業(yè)有限公司) 、黃芪注射液(2 g·mL - 1 , 批號(hào)030523, 上海禾豐制藥有限公司) 。杜仲皮, 購(gòu)自安徽省鳳陽(yáng)縣中醫(yī)藥公司, 經(jīng)安徽技術(shù)師范學(xué)院中藥試驗(yàn)室鑒定為正品。杜仲醇沉液, 自制。

1.2　杜仲水煎醇沉液的制備

杜仲皮100 g, 切成塊, 置炒制容器內(nèi), 用中火炒至斷絲; 用清水泡30 min, 然后加熱至沸騰, 文火維持1 h; 過(guò)濾, 取濾液; 藥渣復(fù)煎兩次, 分別為40和20 min。合并3次濾液濃縮至100 mL (即1 mL含生藥1 g) , 3 800 r·min- 1離心10 min; 取上清液加入無(wú)水乙醇, 使含醇量達(dá)60% (體積分?jǐn)?shù)) ,4～8 ℃靜置24 h沉淀; 過(guò)濾, 離心、定容至原來(lái)的體積(1 mL含生藥1 g) , 高壓蒸汽消毒備用。

1.3　動(dòng)物分組

健康青紫藍(lán)家兔36只, 體重(2100 ±0125) kg, 隨機(jī)均分為6組, 雌雄各半。分別為模型組(垂體后葉素2 U·kg- 1 ) 、丹參陽(yáng)性對(duì)照組(丹香冠心注射液015 g·kg- 1 , 加注射用水等容稀釋) 、低劑量黃芪組(黃芪2 g·kg- 1 ) 、高劑量黃芪組(黃芪3 g·kg- 1 ) 、低劑量杜仲組(杜仲215 g·kg- 1 ) 和高劑量杜仲組(杜仲5 g·kg- 1 ) 。

1.4　實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1　生物信號(hào)的采集與處理　將心電導(dǎo)聯(lián)線的紅黑端、黃端、綠端和白端分別與計(jì)算機(jī)主機(jī)上的ch1, ch2, ch3, ch4四通道口連接。心電導(dǎo)聯(lián)的記錄電極以全導(dǎo)聯(lián)方式與兔連接(四肢內(nèi)側(cè)近心端和胸部, 分別通過(guò)銀針插入皮膚) 。通過(guò)試驗(yàn)項(xiàng)目菜單進(jìn)入“全導(dǎo)聯(lián)心電”試驗(yàn)?zāi)�塊, 采集并記錄心電。結(jié)束時(shí)保存記錄文件用于分析。控制參數(shù): 增益G (2000) 、時(shí)間常數(shù)T (DC) 、濾波F (10 kHz) , 選擇50 Hz抑制, 掃描速度為100100 ms·div- 1 ( div為每單元格掃描時(shí)間) 。

1.4.2　急性心肌缺血模型的建立　給家兔耳緣靜脈注射3   戊巴比妥鈉(1 mL·kg- 1 ) 使其麻醉, 背位保定。記錄正常心電圖5 min后經(jīng)耳緣靜脈注射垂體后葉素2 U·kg- 1 (在10 s內(nèi)勻速注射) , 觀察Ⅱ?qū)��?lián)心電圖變化, 若T波高聳, S2T段抬高超過(guò)011 mV, 心律不齊, 則急性心肌缺血造模成功[ 7 ] 。

1.4.3　藥物試驗(yàn)　除模型組外, 將各組試驗(yàn)兔麻醉后固定, 記錄正常心電圖5 min; 由耳緣靜脈緩緩注射各處理藥物; 給藥5 min后由耳緣靜脈注射垂體后葉素2 U·kg- 1 (速度同上, 每只家兔僅限于一次處理) , 注射完畢記錄心電圖15 min。

1.5　觀測(cè)指標(biāo)

缺血前后心率(次·min- 1 , 由信息欄中顯示) 、T波波幅(mV, 采用區(qū)間測(cè)量法) 、S2T段波幅(mV, 是以兩個(gè)相鄰且平齊的T2P段為基線, 測(cè)量這兩個(gè)相鄰T2P段之間的S2T段值) 、P2R間期( s,采用區(qū)間測(cè)量法) 、ΣT增幅(缺血后不同時(shí)段T波抬高的總和) 、ΣS2T增幅(缺血后不同時(shí)段S2T段抬高的總和) 。S2T段保護(hù)率= 〔(模型組- 正常) - (處理組- 正常) 〕÷ (模型組- 正常) ×100%; T波保護(hù)率= 〔(模型組- 正常) - (處理組- 正常) 〕÷ (模型組- 正常) ×100%。所有觀察指標(biāo)的數(shù)據(jù)均來(lái)源于心電圖記錄文件的II導(dǎo)聯(lián)。

1.6　數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理

數(shù)據(jù)用x ±SD表示, 應(yīng)用SAS軟件F檢驗(yàn)分析各組間的差異顯著性。

2　結(jié)果與分析

2.1　黃芪和杜仲對(duì)家兔心電圖T波的影響

由圖1 A可知, 各組T波均在015 min時(shí)達(dá)到峰值, 隨后持續(xù)下降, 10 min后各處理的T波高度進(jìn)入較穩(wěn)定階段。缺血后015 min和10 min, T波增幅(抬高) 由高到低的順序是: 模型組、低劑量杜仲組、高劑量杜仲組、低劑量黃芪組、高劑量黃芪組和丹參組。缺血后015 min, 各處理組T波抬高均極顯著低于模型組( P < 0101) ; 低劑量黃芪組的T波抬高明

顯高于丹參組( P < 0105) , 而高劑量黃芪組的差異并不顯著( P > 0105) ; 不同劑量杜仲組都極顯著高于丹參組( P < 0101) , 杜仲的作用沒(méi)有呈現(xiàn)劑量效應(yīng)( P > 0105) 。缺血后10 min, 各處理T波抬高的幅度都有較大程度的恢復(fù)。除高劑量杜仲T波抬高的幅度低于模

型組( P < 0105) 外, 其他處理效果與缺血015 min時(shí)間相同。不同劑量的黃芪和杜仲與丹參的差異基本保持, 但黃芪和杜仲分別呈現(xiàn)劑量效應(yīng)( P < 0101) 。結(jié)果顯示, 高劑量黃芪組抑制T波異常抬高的作用最佳(圖1 A) 。

2.2　黃芪和杜仲對(duì)家兔心電圖S2T段的影響

模型組、丹參組、高劑量和低劑量黃芪組的S2T段高度均于缺血后015 min時(shí)達(dá)到峰值; 而高、低劑量杜仲組的峰值則在缺血后1 min出現(xiàn)。S2T段增幅由高到低的順序是: 模型組、低劑量杜仲、高劑量杜仲、低劑量黃芪組、高劑量黃芪組和丹參組。缺血后015 min, 與模型組比較, 高、低劑量黃芪組均差異極顯著( P < 0101) , 高、低劑量杜仲組均差異顯著( P < 0105) ; 不同劑量的黃芪和杜仲又都極顯著高于丹參組( P < 0101) 。杜仲的作用沒(méi)有劑量上的差異( P > 0105) , 黃芪則表現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)( P < 0101) 。缺血后10 min, 各處理S2T段高度都有一定程度的恢復(fù)。不同劑量的黃芪和杜仲組S2T段抬高都明顯低于模型組( P < 0101) , 高、低劑量的杜仲組均明顯高于丹參組( P < 0101) , 而不同劑量的黃芪與丹參組沒(méi)有差異( P > 0105) 。同時(shí), 杜仲出現(xiàn)劑量效應(yīng)( P < 0101) , 而黃芪的劑量效應(yīng)則消失( P >0105) 。高、低劑量黃芪不僅能有效抑制S2T段的異常抬高, 并且具有恢復(fù)均緩、穩(wěn)定的表現(xiàn), 低劑量杜仲組S2T段高度恢復(fù)的過(guò)程中出現(xiàn)了反復(fù)現(xiàn)象(圖1 B) 。

2.3　黃芪和杜仲對(duì)家兔心率的影響

各組的心率在處理后均逐漸變緩, 其中模型組心率均值下降73次·min- 1。缺血后10 min, 各處理心率變緩的幅度由高到低的順序是: 低劑量杜仲、模型組、高劑量杜仲、丹參組、高劑量黃芪組和低劑量黃芪組。除高劑量黃芪組與丹參組的作用差異不顯著外( P > 0105) , 其他各處理間心率變緩的幅度都存在明顯的差異( P < 0101) 。該結(jié)果顯示, 高、低劑量黃芪抗心率變緩的作用要大于丹參(圖2) 。另外模型組和杜仲組都出現(xiàn)陣發(fā)性心律失常, 說(shuō)明心肌缺血的程度已經(jīng)影響到竇房結(jié)的興奮性和自律性。

2.4　黃芪和杜仲對(duì)家兔心電圖P2R間期的影響

各處理P2R間期都有不同程度的變化。缺血后10 min, P2R間期延長(zhǎng)的幅度由高到低的順序是: 低劑量杜仲組、模型組、低劑量黃芪組、高劑量杜仲組、丹參組和高劑量黃芪組。低劑量杜仲組與模型組、高劑量杜仲組與丹參組的作用沒(méi)有明顯的差異( P > 0105) , 低劑量黃芪組P2R間期延長(zhǎng)大于丹參組( P < 0105) , 其他處理即明顯低于模型組( P < 0101) , 又都極顯著高于丹參組( P < 0101) (圖3) 。

2.5　黃芪和杜仲對(duì)心肌缺血的保護(hù)率

高、低劑量的黃芪和杜仲組ΣS2T增幅都明顯低于模型組( P < 0101) , 同時(shí)又都明顯高于丹參組(P < 0101) 。杜仲的作用不存在劑量上的差異( P > 0105) , 而黃芪存在劑量效應(yīng)( P < 0101) 。與模型組比較, 除低劑量杜仲組ΣT增幅沒(méi)有差異外, 高劑量杜仲組存在顯著差異( P < 0105) ; 不同劑量的黃芪組均存在極顯著差異( P < 0101) 。與丹參組比較, 高劑量黃芪組沒(méi)有差異( P >0105) , 低劑量黃芪和不同劑量的杜仲組都存在極顯著差異( P < 0101) (表1) 。對(duì)S2T段和T波的保護(hù)率, 不同劑量的黃芪組分別高于不同劑量的杜仲組, 高劑量黃芪的作用與丹參接近(表1) 。

3　討論

心電圖上ΣS2T增幅表示心肌的損傷程度[ 8 ] 。心肌損傷程度直接反映了冠狀動(dòng)脈血管的缺血程度。本試驗(yàn)結(jié)果表明, 3 g·kg- 1的黃芪改善心肌缺血作用最佳并呈現(xiàn)劑量效應(yīng), 這與梁明等[ 3 ]在大鼠模型的研究結(jié)果是一致的。關(guān)于黃芪抗心肌損傷的可能機(jī)制, Hanmond B等[ 9 ]認(rèn)為大量氧自由基的生成是心肌缺血造成損傷的主要機(jī)制之一。李靖等[ 10 ]研究證實(shí), 一定劑量范圍內(nèi)的黃芪皂苷具有明顯的抗自由基的損傷作用, 而且呈劑量的依賴性增加。關(guān)于改善心肌缺血, 有研究指出黃芪對(duì)缺血缺氧后鈣超載的抑制是保護(hù)受損心肌細(xì)胞的機(jī)制之一[ 11 ] 。由此可推知黃芪主要是通過(guò)降低心肌收縮力, 來(lái)減輕心肌對(duì)冠狀動(dòng)脈及其分支的壓迫, 延長(zhǎng)冠狀動(dòng)脈的灌注時(shí)間來(lái)改善心肌缺血的狀況。

杜仲對(duì)心血管的作用因炮制、劑量、動(dòng)物以及杜仲不同部位、不同單體等而異。杜仲的乙醇提取物可使離體大鼠心臟心跳加快, 振幅增大[ 12 ] , 提示杜仲具有強(qiáng)心作用。但蔡永敏等[ 13 ]指出杜仲煎劑對(duì)離體、在體蛙心跳均有抑制作用; 杜仲的水煎液和醇提物能使麻醉的犬、貓、兔出現(xiàn)血壓下降。目前還未見有杜仲抗心肌缺血的報(bào)道。本試驗(yàn)結(jié)果表明, 高、低劑量的杜仲對(duì)T波的保護(hù)作用較弱, 而對(duì)抑制S2T段抬高有一定的作用, 特別是S2T段峰值落后其他組015 min出現(xiàn), 且在1 min內(nèi)較快下降。試驗(yàn)還觀察到心率變緩是共同現(xiàn)象, 因心率變緩心電圖的各波段都有一定的變化。心肌缺血模型的心電圖通常存在Q2T間期的延長(zhǎng)[ 5, 6 ] , 但在本試驗(yàn)中心電圖的P2R間期的變化比較突出, 因而做了專項(xiàng)分析。實(shí)驗(yàn)中心率變緩幅度最大的低劑量杜仲組, P2R間期變化最大, 而抑制心緩作用最強(qiáng)的低劑量黃

芪組P2R間期明顯長(zhǎng)于丹參, 可見不同劑量、不同藥物抑制心緩對(duì)P2R間期的影響是不同的。P2R間期的變化提示心肌缺血時(shí)心房以及房室傳導(dǎo)組織的興奮性、傳導(dǎo)性都有所降低。

參考文獻(xiàn):

[ 1 ] 　唐鐵軍. 抗心肌缺血中藥實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[ J ]. 深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2003, 13 (2) : 111～113.

[ 2 ] 　Lee YM, Hsiao G, Chen H R, et al. Magnolol reducesmyocardial ischemia / reperfusion injury via neurophil inhibition in rats [ J ]. Eur JPharmacol, 2001, 422 (1～3) : 159～167.

[ 3 ] 　梁明, 韓竹梅. 黃芪凍干粉對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌缺血大鼠心電圖的影響[ J ]. 中醫(yī)藥信息, 2000, 17 (1) : 54～55.

[ 4 ] 　尹俊, 王鴻利. 益母草對(duì)心肌缺血大鼠血液流變學(xué)及血栓形成的影響[ J ]. 血栓與止血學(xué), 2001 (1) : 13～15.

[ 5 ] 　楊芳炬. 機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)[M ]. 成都: 四川大學(xué)出版社, 2003. 117, 120.

[ 6 ] 　陳奇. 中藥藥理研究方法學(xué)[M ]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 1996. 494～495.

[ 7 ] 　張頁(yè), 楊學(xué)娟, 沈紹功. 冠心病心絞痛氣虛痰濁證動(dòng)物模型研究[ J ]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志, 2000, 6 (12) : 820.

[ 8 ] 　王磊, 彭仁秀, 楊靜, 等. 復(fù)方纈芎滴丸對(duì)犬急性心肌缺血的保護(hù)作用[ J ]. 中草藥, 2004, 35 (3) : 304～306.

[ 9 ] 　Hanmond B, HessM L. The oxygen free radical system: potential mediator of myocardial injury [ J ]. J Am Coll Cardial, 1986, 6:215～220.

[ 10 ] 李靖, 朱健華, 黃崇勤, 等. 黃芪皂苷對(duì)培養(yǎng)心肌細(xì)胞損傷的影響[ J ]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 1998, 8 (8) : 7～9.

[ 11 ] 顧娟紅, 沈惟堂, 李自普, 等. 黃芪對(duì)缺血大鼠心肌鈣及脂質(zhì)過(guò)氧化物的影響[ J ]. 上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 1997, 24 ( 4) : 270～272.

[ 12 ] 徐叔云, 卞如濂, 陳修. 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M ]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 1982. 686～690.

[ 13 ] 蔡永敏, 任玉讓, 王黎, 等. 中藥藥理與臨床應(yīng)用[M ]. 北京: 華夏出版社, 1999. 461.

責(zé)任編輯: 周廣禮