HPLC法測定雙黃連膠囊中金銀花的綠原酸含量 | HPLC法測定雙黃連膠囊中金銀花的綠原酸含量 |
| 發(fā)布時間:2010-09-27 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):2815 |
黃曦(福州市藥品檢驗(yàn)所福州350001) 摘要:目的測定雙黃連膠囊中金銀花(以綠原酸計)含量。方法高效液相色譜法。色譜柱為C18 柱(250mm×4.6mm,5μm),流動相為甲醇-水-冰醋酸(25:75:1);流速1mL·min-1;檢測波長325nm;柱溫30℃。結(jié)果綠原酸在22.8μg·mL-1～114.0μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為101.4%,RSD為1.3%。結(jié)論該方法可用于雙黃連膠囊中綠原酸的含量測定。 關(guān)鍵詞:雙黃連膠囊;金銀花綠原酸;含量測定;高效液相色譜 本文采用HPLC法,對流動相進(jìn)行優(yōu)化,用外標(biāo)法測定綠原酸含量,操作簡便快速,結(jié)果可靠,穩(wěn)定,重現(xiàn)性良好,組份分離度佳。 1 儀器與試藥 Agilent-1100型高效液相色譜儀;VWD紫外檢測器,BP211D型電子分析天平,綠原酸對照品(中檢所);雙黃連膠囊(批號為040511,050301,050501,由竹林眾生制藥公司提供);甲醇為色譜純;水為超純水;冰乙酸(分析純)。 2 試驗(yàn)方法 2.1 檢測波長的確定取綠原酸對照品適量用25%的甲醇溶解成60μg· mL-1溶液,在200～500nm 波長范圍內(nèi)掃描,確定最大吸收波長為325nm。 2.2 色譜條件色譜柱:十八烷基鍵合硅膠柱(5μm;250mm×4.6mm),流動相:甲醇-水-冰醋酸(25:75:1);流速1mL·min-1;檢測波長325nm;進(jìn)樣量:10μL;理論塔板數(shù)不低于6000。(見圖1、2)。 2.3 陰性對照依上述色譜條件分別吸取樣品及溶劑、對照品10μL進(jìn)行測定。樣品與對照品色譜圖中在相同的保留時間有一個色譜峰而溶劑無此峰。
圖1 （綠原酸對照品色譜圖） 2.4 線性關(guān)系精密稱取綠原酸對照品4.5mg于100mL量瓶中,用25%甲醇溶解并稀釋至刻度。搖勻在上述色譜條件下,分別進(jìn)樣5～25μL。以綠原酸峰面積(A)對樣品含量(Amt)進(jìn)行回歸,得到回歸方程為:A=1926.6438×Amt+45.1272,r=0.9961。結(jié)果表明:綠原酸在22.8μg·mL-1～114.0μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。 2.5 精密度和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密稱取綠原酸對照品4.56mg,用25%甲醇溶解成45.6μg·mL-1溶液,取10μL重復(fù)進(jìn)樣5次,峰面積的RSD為0.2%。 2.6 加樣回收率測定精密稱取綠原酸對照品7.59mg用25%甲醇溶解成75.9μg·mL-1的綠原酸溶液,精密量取已知含量的雙黃連膠囊樣品3份各10mL于15mL容量瓶中,分別加入上述對照品溶液1.0mL,1.2mL,1.5mL,并用25%的甲醇稀釋到刻度,按樣品含量測定方法項下進(jìn)行測定,計算回收率。結(jié)果3批中濃度回收率分別為101.5%,101.4%,101.3%。每種濃度進(jìn)樣2次,RSD 為1.3%。 2.7 樣品含量測定精密量取本品濃液(濃度約為50μg·mL-1)10μL注入液相色譜儀,記錄色譜圖。另精密稱取干燥至恒重的綠原酸對照品,用25%的甲醇稀釋成46.5μg·mL-1的溶液,同法測定:3批號040511、050301、050501樣品含量(mg/粒)分別為18.40、16.68、17.86;RSD分別為1.92%、0.55%、1.76%。 3 討論 3.1 綠原酸在25%甲醇溶液中在325nm處有最大的吸收,且無其他干擾,故選擇325nm為檢測波長。選用甲醇-水-冰乙酸(25:75:1)為流動相,能使綠原酸得到良好分離。
3.2 本方法中綠原酸的峰面積與濃度在一定濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,回收率高,無雜質(zhì)干擾,可作為含量測定方法。 參考文獻(xiàn) [1]《雙黃連制劑含量分析方法綜述》2004.18(3)～194496. [2]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005,I部. 產(chǎn)品鏈接： 杜仲提取物 綠原酸 金銀花提取物 苦杏仁苷 枇杷葉提取物-熊果酸 大花紫薇提取物-科羅索酸 上禾生物 專注植提 精于高純 基于您對天然產(chǎn)物需求持續(xù)創(chuàng)新 |
