測(cè)定積雪草總苷元中的羥基積雪草酸 | 測(cè)定積雪草總苷元中的羥基積雪草酸 |
| 發(fā)布時(shí)間:2021-01-03 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):991 |
| 測(cè)定積雪草總苷元中的羥基積雪草酸 采用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)積雪草中的活性物質(zhì)進(jìn)行分離檢測(cè)研究，但羥基積雪草酸和terminolic acid 在一般的HPLC條件下，無論以恒比例洗脫或梯度洗脫均顯示單一的色譜峰，無法得到理想的分離度。采用β-環(huán)糊精(β-CD)為流動(dòng)相添加劑對(duì)它們進(jìn)行了分離，并對(duì)分離后的物質(zhì)進(jìn)行了簡(jiǎn)單的確證。考察了不同濃度的β-環(huán)糊精和不同流動(dòng)相pH對(duì)其分離度的影響，建立了積雪草樣品中羥基積雪草酸含最的測(cè)定方法。 供試品溶液的制備 精密稱取50%積雪草總苷元適量，置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，配制成50%積雪草總苷元甲醇溶液5.58 g/L 備用。進(jìn)樣前用0.45 um微孔濾膜過濾。 羥基積雪草酸和terminolic acid的收集 將50%積雪草總苷元溶液重復(fù)進(jìn)樣，在HPLC檢測(cè)器的出口處分段收集羥基積雪草酸和terminolic acid各約40 mL。將收集到的洗脫液蒸干后，利用β-環(huán)糊精在甲醇中溶解度小而羥基積雪草酸和terminolic acid在甲醇中溶解度大的差異，去除β-環(huán)糊精,進(jìn)樣，進(jìn)行LC-MSD檢測(cè)，對(duì)收集的兩種物質(zhì)進(jìn)行簡(jiǎn)單的確證。 羥基積雪草酸的定量分析 精密稱取羥基積雪草酸對(duì)照品10.0 mg，用甲醇配制成10.0g/L的溶液，然后用甲醇進(jìn)行倍比稀釋，配成質(zhì)量濃度依次為5.0，2.0，1.0，0.5和0.1g/L的羥基積雪草酸對(duì)照品甲醇溶液。以峰面積(y)對(duì)質(zhì)量濃度(x, g/L)進(jìn)行線性回歸,羥基積雪草酸的回歸方程為y = 116.54x一10. 058，r2=0.9989。結(jié)果表明,樣品量在0.1-5.0 g/L范圍內(nèi)濃度與峰面積呈線性關(guān)系。 精密配制羥基積雪草酸對(duì)照品0.5,1.0,2.0g/L3種濃度的甲醇溶液，每種濃度重復(fù)進(jìn)樣3次，連續(xù)測(cè)定5 d,其峰面積的日間精密度和日內(nèi)精密度(以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差( RSD)值計(jì))均小于2. 0%。 精密量取供試品溶液,按照前面的色譜條件,重復(fù)進(jìn)樣3次,按回歸方程計(jì)算供試品的含量,結(jié)果表明:50%積雪草總苷元中羥基積雪草酸的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18. 1%。 參考文獻(xiàn) [1]潘見，開桂青，袁傳勛，周蓓蓓，金日生，袁 媛，β一環(huán)糊精流動(dòng)相添加劑法分離測(cè)定積雪草 總苷元中的羥基積雪草酸，色 譜 Chinese Journal of Chromatography，2007.05，第317頁
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