羥基積雪草酸的提取 | 羥基積雪草酸的提取 |
| 發(fā)布時(shí)間:2021-01-03 信息來(lái)源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):1089 |
| 羥基積雪草酸是積雪草中有效活性成分，研究表明其具有抗氧化、抗抑郁、抗菌、調(diào)節(jié)免疫等多種藥理活性功能，尤其是對(duì)腫瘤細(xì)胞具有顯著的抑制作用。 提取【1】 1. 將積雪草粉碎,用60-70v%乙醇溶液川流提取,將提取液過(guò)濾,濾液回收溶劑，再加40-50C水溶解,過(guò)濾,將濾渣溶于50-60v%乙醇溶液,得到粗提液。 2. 將粗提液上XAD-9人孔樹(shù)脂柱,用pH值為2-4的酸液洗脫,合并流川液和酸洗液。 3. 調(diào)節(jié)合并液pH值至中性,過(guò)濾,將濾液再次EXAD-3大孔樹(shù)脂柱,用體積濃度為30-40%的乙醇洗脫,薄層層析跟蹤檢測(cè),收集含有積雪草酸成分的乙醇洗脫液;再刃體積濃，度為55-65%的乙醇洗脫，薄層，層析跟蹤檢測(cè),收集含羥基積雪草酸的乙醇洗脫液,將羥基積雪草酸洗脫液回收乙醇,干燥,得到羥基積雪草酸。 步驟1中，體積濃度為60-70%的乙醇可充分溶解積雪草中的二萜類(lèi)物質(zhì)，包括三萜炎皂節(jié)和三萜酸炎物質(zhì)。由于積雪草皂并的分子中往往結(jié)合有多數(shù)糖分子,羥基數(shù)日多,能表現(xiàn)出一定的親水性，但足親水性不強(qiáng),微溶于水中，而二萜酸類(lèi)極性較小，不能溶于水中。因此采用40-50℃溫水可幫助積雪草總皂節(jié)溶解,積雪卓三惦酸類(lèi)物質(zhì)不溶于熱水中，將濾液過(guò)濾,取濾渣溶于乙醇，達(dá)到去除積雪草總皂苷的日的。 XAD-9樹(shù)脂主耍吸附的是脂溶性成分，大分子極性強(qiáng)的物質(zhì)，這些物質(zhì)對(duì)樹(shù)脂的吸附性更強(qiáng)，大孔樹(shù)脂優(yōu)先吸附這些物質(zhì)而很快達(dá)到飽和。XAD-9是極性大孔樹(shù)脂，與三萜酸類(lèi)極性相差較大，無(wú)法有效吸附三萜酸類(lèi)化合物，XAD-9樹(shù)脂平均孔徑較大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于三萜酸類(lèi)化合物，也無(wú)法起到物理截留三萜酸類(lèi)化合物的作用，因此，三萜酸類(lèi)化合物會(huì)隨著流出液流出。pH值為2-4的酸液洗脫可進(jìn)一步將樹(shù)脂中吸附的少量三萜酸類(lèi)化合物洗脫下來(lái),避免三萜酸類(lèi)化合物的吸附損失。 步驟2中,粗提液上柱速度為3-5BV/h。酸液的洗脫速度為1-2BV/h。 步驟3中，XAD-3型號(hào)大孔樹(shù)脂為非極性樹(shù)脂，平均孔徑為0.44um，比表面積256m2/g。該樹(shù)脂對(duì)三萜酸類(lèi)化合物有很有的吸附性能，濾液的上柱速度為0.5-1BV/h,可將二帖酸炎化合物吸附完全。由于積雪草酸和羥基積雪草酸存在極性差異，采用體積濃度為30-40%的乙醇洗脫，可優(yōu)先洗脫積雪草酸。然后用體積濃度為55-65%的乙醇洗脫，可將剩下的羥基積雪草酸洗脫卜來(lái)。 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本方法針對(duì)目標(biāo)成分進(jìn)行吸附和解吸附，提取的羥基積雪草酸收率高達(dá)90%以上，純度高達(dá)95.0%以上。 具體實(shí)施 1. 將積雪草粉碎，用60v%乙醇溶液回流提取,60v%乙醇的用量為積雪草重量的5倍，在40°C下回流提取1次，每次0.5h，將提取液過(guò)濾,濾液回收溶劑，再加40°C水溶解，過(guò)濾，將濾渣溶于50v%乙醇溶液，得到粗提液。 2. 將粗提液上XAD-9大孔樹(shù)脂柱,粗提液上柱速度為3BV/h，用pH值為2的酸液洗脫，酸液的洗脫速度為1BV/h，合并流出液和酸洗液。 3. 調(diào)節(jié)合并液pH值至中性，過(guò)濾，將濾液再次上XAD-3大孔樹(shù)脂柱，濾液的上柱速度為為0.5BV/h，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，乙醇洗脫述度為2BV/h，薄層層析跟蹤檢測(cè)，收集含有積雪草酸成分的乙醇洗脫液。再用體積濃度為55%的乙醇洗脫，乙醇洗脫速度為2BV/h薄層層析跟蹤檢測(cè)，收集含羥基積雪草酸的乙醇洗脫液，將羥基積雪草酸洗脫液回收乙醇，干燥，得到羥基積雪草酸。 經(jīng)HLPC分析,羥基積雪草酸的回收率為90.08%以上,純度高達(dá)95.27%。
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