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作者：劉月鳳，陳建文，龔朋飛，袁慧

【關(guān)鍵詞】 杜仲；,,亞慢性毒性

　　摘要：目的研究不同劑量的杜仲提取物水溶液對小鼠亞慢性毒性作用，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法給實驗小鼠灌服不同劑量的杜仲提取物水溶液。在實驗中、末期停藥后24 h，分別取血測定血液學(xué)、血液生化和主要臟器指標(biāo)，并作病理切片。結(jié)果灌胃中、低劑量（2.06 g/kg，0.69 g/kg）的杜仲提取物水溶液，能夠提高小鼠血紅蛋白含量和紅細(xì)胞數(shù)（P＜0.01），對白細(xì)胞分類計數(shù)無影響，同時能夠提高小鼠體重、總蛋白及白蛋白含量（P＜0.01），對脾臟、肝臟、心臟、肺臟、腎、性器官指數(shù)及血清酶活性無影響（P＞0.05）。結(jié)論杜仲提取物對受試動物未見有明顯毒性作用。

　　關(guān)鍵詞：杜仲；亞慢性毒性

　我國對杜仲（Eucommia ulmoides）的利用歷史悠久，近幾年我國學(xué)者在杜仲的生物學(xué)、化學(xué)成分、生理生化等方面做了許多研究，已知杜仲的化學(xué)成分主要有：（1）木脂素類；（2）環(huán)烯醚萜類；（3）酚類化合物等，唐建軍［1］、李家實等［2］認(rèn)為，杜仲中有效成分對動物血壓有雙向調(diào)節(jié)功能。唐建軍等［1］報道：杜仲含有豐富的VE和 β-胡蘿卜素，有延緩衰老、增強(qiáng)機(jī)體免疫體力作用。為了更好地開發(fā)利用杜仲，我們探索了張家界產(chǎn)杜仲提取物（以下簡稱杜仲提取物）對動物亞慢性毒性作用，并為臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

　　1 材料

　　1.1 藥品與動物杜仲提取物：主要成分：80%氯原酸，由張家界恒興生物科技公司提供。昆明種小鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，8周齡，購于湖南中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，批號：990218。

　　1.2 儀器ES-C300A電子天平，湘儀天平儀器廠。MD-100自動生化分析儀器儀。美國 Leyte Drive Torranle化學(xué)儀器公司生產(chǎn)。

　　2 方法與結(jié)果

　　2.1 小鼠最大耐受量采用最大給藥量［3］法，在預(yù)試基礎(chǔ)上，取小鼠100只，雌雄各半，體重（20±2）g，隨機(jī)分成5組，分次灌服不同劑量杜仲提取物水溶液0.5 ml/次，觀察7 d內(nèi)動物死亡數(shù)，同時觀察動物一般狀況及活動情況。結(jié)果見表1。動物在7 d內(nèi)均無異常反應(yīng)，考慮到杜仲的濃度以及小鼠的灌胃容積都已達(dá)到最大，因此，杜仲提取物的小鼠灌胃最大給藥量應(yīng)大于18.52 g/kg。按小鼠的平均體重為20 g，成人平均體重60 kg，成人每日用量6~9 g［4］計算，小鼠的最大耐受倍數(shù)=18.52×60/9=124（倍），故認(rèn)為本藥具有較大的安全性。

　　2.2 杜仲提取物對小鼠的亞慢性毒性實驗［5，6］取健康小鼠80只，體重為（20±2） g，雌雄各半，分籠顆粒飼料喂養(yǎng)，將小鼠隨機(jī)分為3個劑量組6.17，2.06，0.69 g/kg和1個對照組（生理鹽水）。各組分別以0.5 ml/次容量灌胃：1次/ d，連續(xù)8周，每周停藥2 d，期間每周稱重，并根據(jù)體重調(diào)整藥量。同時觀察動物的一般體征。實驗中、末期停藥后24 h，測定血液學(xué)指標(biāo) Hb，RBC，WBC和白細(xì)胞分類計數(shù)（DC）及血液生化指標(biāo)（TP，ALB，AST，ALT，BUN，ALP和GLu），兩次采血后分兩批處死動物，對（心、肝、脾、肺、腎、性腺）主要臟器計算臟器重量系數(shù)，并做病理切片檢查。

　　表1 小鼠灌胃給藥最大耐受量（MTD）的測定(略)

　　2.2.1 杜仲提取物對小鼠體重的影響結(jié)果由表2可看出，各組小鼠在第4，8周時，中、低劑量組（2.06，0.69 g/kg）與對照組差異極顯著（P＜0.01），出現(xiàn)明顯的增重。第8周時，高劑量組與對照組差異不顯著（P＞0.05）。

　　2.2.2 小鼠血液學(xué)指標(biāo)的變化結(jié)果見表3。由表3可知，實驗第4，8周時，濃度為2.06，0.69 g/kg杜仲的提取物能夠顯著提高小鼠的Hb含量及RBC（P＜0.01）。在6.17 g/kg的濃度水平下，第4周杜仲提取物顯著提高小鼠的 Hb含量及RBC（P＜0.05），第8周與對照組比較無顯著差異（P＞0.05）；實驗組N，L，E，M計數(shù)與對照組比較均差異不顯著（P＞0.05）。

　　2.2.3 杜仲提取物對小鼠血液生化指標(biāo)的影響結(jié)果見表4。由表4可知，第4，8周，中、低劑量組TP、ALB含量均極顯著的高于對照組（P＜0.01）。TP含量高劑量組第4周高于對照組（P＜0.05），第8周則無差異顯著性（P＞0.05）；ALB含量第4周與對照組比較差異不顯著（P＞0.05）；第8周低于對照組（P＜0.05）；G的含量第4周高劑量組和第8周各組高于對照組（P＜0.05）；BUN含量高劑量組與對照組相比差異顯著（P＜0.05），中、低劑量組與對照組無顯著差異（P＞0.05）。

　　表2 小鼠平均體重變化(略)

　　每組均與對照組比較，*表示5%的顯著水平，**表示1%的極顯著水平（下同）

　　表3 小鼠血液學(xué)指標(biāo)(略)

　　動物數(shù)上排為給藥后4周，下排為第8周停藥后2 d（下同）

　　表4 小鼠血液生化指標(biāo)(略)

　　2.2.4 杜仲提取物對小鼠主要臟器的影響由表5可知，各實驗組臟器指數(shù)與對照組比較無顯著性差異（P＞0.05）。

　　表5 小鼠主要器官指數(shù)(略)

　　2.2.5 杜仲提取物對小鼠病理組織形態(tài)學(xué)的觀察實驗中、末期分別對小鼠進(jìn)行剖檢，觀察各組織器官未見明顯的眼觀病理變化，對各組臟器進(jìn)行鏡檢，均未見有意義的病理組織學(xué)改變。

　　3 討論

　　通過MTD實驗觀察，小鼠精神狀態(tài)良好，無死亡發(fā)生，給藥后的第8天處死動物，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等均無異常發(fā)生，說明小鼠對杜仲提取物MTD應(yīng)大于18.52 g/kg，相當(dāng)于體重為60 kg的成人用量（6~9 g）的124倍。根椐有關(guān)資料［7］，中藥的安全性以小鼠能耐受人用量的100倍以上為安全，故認(rèn)為本品具有很大的安全性。對小鼠體重檢測表明：中、低劑量（2.06，0.69 g/kg）的杜仲提取物水溶液能極顯著提高小鼠的體重（P＜0.01），高濃度的杜仲提取物長時間飼喂小鼠無增重作用。王介慶等［8］用杜仲活性成分提取液對肉雞增重實驗中也有增重，本研究結(jié)果證實了這一點。血液學(xué)指標(biāo)檢測表明：中、低劑量杜仲提取物水溶液能極顯著提高小鼠的 Hb含量和RBC（P＜0.01）。高劑量（6.17 g/kg）的杜仲提取物水溶液在第4周時顯著提高小鼠的紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量（P＜0.05），第8周時則無此作用。杜仲提取物對小鼠WBC及WBC的分類計數(shù)無明顯影響。血液生化檢測結(jié)果表明：中、低劑量杜仲提取物水溶液能極顯著提高TP，ALB的含量，對血清酶AST，ALT的活性無明顯影響，這說明機(jī)體的新陳代謝加強(qiáng)，對養(yǎng)分的利用率升高，從而促進(jìn)了小鼠的生長。高劑量杜仲提取物水溶液在第4周時能提高TP，ALB含量，第8周時則無此作用，但卻提高了AST，ALT的活性，結(jié)合有關(guān)資料［9］，推測高劑量的杜仲提取物有可能影響了肝臟的功能，從而使機(jī)體的養(yǎng)分利用降低。BUN的含量在杜仲提取物濃度為2.06，0.69 g/kg時無顯著性差異，在高劑量作用下，明顯升高，推測高劑量時有可能使腎機(jī)能受到影響。實驗期對ALP及GLu的含量無明顯影響，說明6.17 g/kg劑量以下的杜仲提取物對ALP及GLu無影響。臟器指數(shù)檢測結(jié)果表明：本品對脾臟、肺臟、心臟、腎臟、性器官指數(shù)無明顯影響，說明杜仲提取物在6.17 g/kg劑量水平以下，不損害以上臟器。以上實驗結(jié)果可知，張家界產(chǎn)杜仲提取物對受試動物無明顯毒性作用。

　　參考文獻(xiàn)：

　�。�1］ 唐建軍，張祿源，何鳴筱，等.杜仲的研究與應(yīng)用進(jìn)展［J］.植物學(xué)通報，1998，（15）6：47.

　　［2］ 李家實，閻玉凝.杜仲皮與杜仲葉化學(xué)成分初步研究［J］.中藥通報，1986，11（8）：41.

　�。�3］ 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.中藥新藥研究指南（藥學(xué)、藥理學(xué)、毒性學(xué)分冊）［M］.1994：205.

　�。�4］ 國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：131.

　�。�5］ 陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：113.

　　［6］ 張 銑，劉毓谷.毒理學(xué)［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997：230.

　�。�7］ 秦伯益.新藥評價概論，第2版［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1998：154.

　�。�8］ 王介慶，王洪斌，朱鑒生.杜仲活性成分提取液在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用［J］.中國家禽，1999，21（6）：29.

　�。�9］ 陳 龍，高 偉，王怡豐等.CCL4誘發(fā)肝損傷過程中血液細(xì)胞免疫功能的變化［J］.環(huán)境與健康雜志，2001，18（2）：83.