大黃素對家兔實(shí)驗(yàn)性皮膚創(chuàng)傷的促愈合作用及其機(jī)制 | 大黃素對家兔實(shí)驗(yàn)性皮膚創(chuàng)傷的促愈合作用及其機(jī)制 |
| 發(fā)布時間:2010-11-06 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):4750 |
唐 甜，楊 靜 （武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，湖北武漢�。矗常埃埃罚保� 摘要：目的 探討大黃素治療皮膚創(chuàng)傷的可能性及其作用機(jī)制。方法 采用家兔皮膚切除傷創(chuàng)傷模型，同時滴加綠膿桿菌或金黃色葡萄球菌。大黃素（１００～２００μｇ·ｇ－１）敷于創(chuàng)面，每天１次，連續(xù)７ｄ或１４ｄ。觀察創(chuàng)面面積、創(chuàng)面細(xì)菌數(shù)量和病理組織學(xué)改變。生化測定創(chuàng)面組織蛋白和羥脯氨酸（ＯＨＰ）含量；免疫組化ＳＰ法檢測轉(zhuǎn)化生長因子（ＴＧＦ-β１）含量；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)測定ＴＧＦ-β１ｍＲＮＡ表達(dá)；Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡分析Ｓｍａｄ２，３，４和７表達(dá)。結(jié)果 大黃素（１００～２００μｇ·ｇ－１）隨藥物劑量面表面細(xì)菌數(shù)；創(chuàng)面組織蛋白和羥脯氨酸的含量也隨著劑量的增加而增加。病理結(jié)果顯示，大黃素２００μｇ·ｇ－１明顯促進(jìn)創(chuàng)面炎性滲出物吸收、肉芽組織形成和表皮增生。隨大黃素濃度的增加，與基質(zhì)對照組相比，ＴＧＦ-β１基因和蛋白的表達(dá)逐漸增高，均有顯著差異；對Ｓｍａｄ４蛋白表達(dá)無影響，大黃素１５０和２００μｇ·ｇ－１使Ｓｍａｄ７蛋白表達(dá)降低；大黃素２００μｇ·ｇ－１使Ｓｍａｄ３和Ｓｍａｄ２表達(dá)增加，其他劑量則無影響。與ｒｈＥＧＦ組相比，大黃素１００和（或）１５０μｇ·ｇ－１組使Ｓｍａｄ２和Ｓｍａｄ３表達(dá)明顯下降。結(jié)論 大黃素促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性皮膚創(chuàng)面的修復(fù)，其機(jī)制可能與ＴＧＦβ１和Ｓｍａｄｓ信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)。 關(guān)鍵詞：大黃素；創(chuàng)傷愈合；轉(zhuǎn)化生長因子β；蛋白，Ｓｍａ 外科創(chuàng)傷、燒傷，以及癤、疔、瘡疽、褥瘡等疾病是臨床常見病。創(chuàng)面感染是皮膚創(chuàng)傷愈合延遲的主要原因之一，有效控制創(chuàng)面感染和促進(jìn)創(chuàng)面愈合是皮膚創(chuàng)傷治療的重要環(huán)節(jié)。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為大黃外用“清血熱、破瘀血、消腫痛和祛瘀生新”，是治療皮膚創(chuàng)傷的傳統(tǒng)藥物。大黃素（ｅｍｏｄｉｎ），１，３，８三羥基６甲基蒽醌，是中藥大黃的主要有效單體，具有抑菌、抗炎、抑制血小板聚集和改善微循環(huán)等［１］藥理作用。但大黃素對皮膚創(chuàng)傷的影響國內(nèi)外尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用家兔皮膚切除傷模型，研究大黃素對實(shí)驗(yàn)性皮膚創(chuàng)傷的促愈合作用及可能機(jī)制。 １ 材料與方法 １．１ 動物與菌株 新西蘭白兔，體重２．２ ～２．５ｋｇ，♂♀各半，由武漢大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。許可證號ＳＣＸＲ（鄂）２００３０００４。致病性金黃色葡萄球菌與綠膿桿菌由武漢大學(xué)中南醫(yī)院臨床分離并保種。 １．２ 試劑與儀器 大黃素，純度≥９８％，批號０３０４０１，由遼寧生物醫(yī)藥科技有限公司提供。１００，１５０和２００μｇ·ｇ－１的大黃素軟膏由本室配制。軟膏基質(zhì)，成分為凡士林，由馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司提供。創(chuàng)灼膏，成分為爐甘石、白及、石膏、冰片、甘石膏（由蒼術(shù)、木瓜、防己、黃柏、延胡索、郁金、虎杖、地榆、爐甘石制成）粉，由北京九發(fā)藥業(yè)有限公司提供，批準(zhǔn)文號國藥準(zhǔn)字Ｚ１１０２０２８７。重組人表皮生長因子（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｒｈＥＧＦ）衍生物，２×１０６Ｕ·Ｌ－１，由深圳華生元基因有限公司提供，批準(zhǔn)文號國藥準(zhǔn)字Ｓ２００１００３８。即用型鼠抗兔轉(zhuǎn)化生長因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）單克隆抗體、ＳＰ通用型免疫組織化學(xué)試劑盒、３，３二氨基聯(lián)苯胺（ＤＡＢ）顯色試劑盒及多聚賴氨酸購于北京中山生物技術(shù)有限公司。Ｔｒｉｚｏｌ試劑盒購自上海華舜生物工程有限公司；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒為ＭＢＩ產(chǎn)品；ＰＣＲ相關(guān)試劑為大連寶生物工程的ＴａＫａＲａ產(chǎn)品；Ｓｍａｄ蛋白抗體購自ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＵＳＡ）；ＥＣＬ反應(yīng)試劑盒購于Ａｍｅｒｓｈａｍ公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。 １．３ 家兔皮膚創(chuàng)傷模型［２］ ①單純創(chuàng)傷模型：家兔背部創(chuàng)傷后，創(chuàng)面不滴加細(xì)菌的動物模型；②細(xì)菌感染模型：家兔背部創(chuàng)傷后，創(chuàng)面滴加金葡球菌或綠膿桿菌的創(chuàng)面感染細(xì)菌動物模型。 模型①：取健康家兔，背部用１０％硫化鈉脫毛，以硫噴妥鈉３０ｍｇ·ｋｇ－１耳緣靜脈注射麻醉，以碘酒消毒皮膚后用面積２．４５ｃｍ２鋼質(zhì)打孔器在家兔背部脊柱兩側(cè)各２ｃｍ處，自上而下切割６個圓形創(chuàng)面，孔間距離２．５ｃｍ，深至皮下，止血后備用；模型②：切割致傷后即刻在創(chuàng)面滴加金葡球菌或綠膿桿菌０．１ｍＬ，滴加１次，濃度分別為１×１０１１Ｌ－１和５×１０１０Ｌ－１。２４ｈ后動物傷口出現(xiàn)紅、腫及膿性分泌物，從創(chuàng)面組織分離出金黃色葡萄球菌或綠膿桿菌，表明感染創(chuàng)面制備成功。 １．４ 實(shí)驗(yàn)分組與處理 將１８只家兔隨機(jī)分成３大組：單純創(chuàng)傷組，創(chuàng)傷后不滴加細(xì)菌；金葡球菌組，創(chuàng)傷后滴加金葡球菌；綠膿桿菌組，創(chuàng)傷后滴加綠膿桿菌。每大組均分為６小組，每小組１只家兔，每只家兔６個創(chuàng)面�？瞻讓φ战M，不涂藥；軟膏基質(zhì)組，涂軟膏基質(zhì)１．０ｇ；細(xì)菌感染組陽性對照均涂創(chuàng)灼膏１．０ｇ，單純創(chuàng)傷陽性對照噴涂ｒｈＥＧＦ０．１ｍＬ（２００Ｕ）；大黃素組，涂１００，１５０和２００μｇ·ｇ－１大黃素軟膏各１．０ｇ。創(chuàng)傷加滴加細(xì)菌處理的當(dāng)天為ｄ０，次日（ｄ１）給藥，每天換藥１次。細(xì)菌感染組連續(xù)給藥１４ｄ，單純創(chuàng)傷組連續(xù)給藥７ｄ。切口創(chuàng)面首先以無菌凡士林油紗布覆蓋，再覆蓋消毒紗布，膠布固定。每只家兔６個圓形切割創(chuàng)面分別為空白對照組、軟膏基質(zhì)組、陽性藥對照組及大黃素軟膏３個劑量組。 １．５ 創(chuàng)面愈合的測定 采用透明膜描記法計(jì)算創(chuàng)面愈合百分率［３］。創(chuàng)面愈合百分率＝〔（同組ｄ０創(chuàng)面面積－同組ｄｎ時創(chuàng)面面積）／同組ｄ０創(chuàng)面面積〕×１００％（ｎ為用藥后測量時間）。細(xì)菌感染組于ｄ３，ｄ６，ｄ９，ｄ１２和ｄ１４；單純創(chuàng)傷組于ｄ３，ｄ５和ｄ７比較用藥后傷口愈合率的變化。 １．６ 痂下組織細(xì)菌數(shù)測定［４］ 于ｄ１，ｄ６和ｄ９分別取細(xì)菌感染組痂下組織，進(jìn)行菌落數(shù)測定。每克組織的細(xì)菌數(shù)（ｃｆｕ·ｇ－１）＝（菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×１／０．０１）／組織重量（ｇ）。 １．７ 創(chuàng)面肉芽組織蛋白與羥脯氨酸含量測定 取傷后ｄ７單純創(chuàng)傷組創(chuàng)面肉芽組織。氯胺Ｔ氧化法測定羥脯氨酸含量［５］，Ｌｏｗｒｙ等［６］法測定肉芽組織蛋白含量。 １．８ 病理組織學(xué)觀察 于傷后ｄ１５處死細(xì)菌感染組，取背部切口創(chuàng)面組織，１０％甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋切片，ＨＥ染色，光鏡下觀察創(chuàng)面組織病理學(xué)變化。 １．９ ＲＴＰＣＲ半定量分析ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的表達(dá) １．９．１ 引物設(shè)計(jì)與合成 ＴＧＦβ１和β肌動蛋白（βａｃｔｉｎ）引物設(shè)計(jì)參照文獻(xiàn)［７］，由上海生物工程公司合成。ＴＧＦβ１ 引物：Ｐ１為５′ＣＡＡＧＣＡＧＡＧＴＡＣＡＣＡＣＡＧＣＡ３′；Ｐ２為５′ＧＡＴＧＣＴＧＧＧＣＣＣＴＣＴＣＣＡＧＣ３′，長度４４２ｂｐ；β肌動蛋白：Ｐ１為５′ＡＧＧＡＡＧＧＡＧＧＧＣＴＧＧＡＡＣＡ３′，Ｐ２ 為５′ＣＣＣ ＡＴＣ ＴＡＣ ＧＡＧ ＧＧＣＴＡＣＧＣ３′，長度２６２ｂｐ。 １．９．２�。遥元玻校茫曳治觯裕牵篇拨拢保恚遥危帘磉_(dá) 采用Ｔｒｉｚｏｌ試劑盒提取單純創(chuàng)傷組創(chuàng)面組織總ＲＮＡ（具體參照Ｔｒｉｚｏｌ說明書），逆轉(zhuǎn)錄合成ｃＤＮＡ（參照ＲｅｖｅｒｔＡｉｄＴＭ ＦｉｒｓｔＳｔｒａｎｄｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅｓｉｓＫｉｔ說明書），ＰＣＲ反應(yīng)體系為５０μＬ，擴(kuò)增條件：９４℃預(yù)變性５ｍｉｎ，７２℃時加入Ｔａｑ酶（２Ｕ），然后９４℃，３０ｓ，６１℃，１ｍｉｎ，７２℃，４５ｓ，３５次循環(huán)后，７２℃延伸１０ｍｉｎ，終止反應(yīng)。ＲＴＰＣＲ產(chǎn)物經(jīng)１．８％瓊脂糖凝膠電泳分離并與ＤＮＡ相對分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（１００ｂｐＤＮＡｌａｄｄｅｒ，Ｇｉｂｃｏ）比較鑒定。用ＵＶＰ公司透射掃描儀進(jìn)行電泳條帶密度定量測定。以βａｃｔｉｎ擴(kuò)增產(chǎn)物為內(nèi)對照，計(jì)算ＴＧＦ-β１ ｍＲＮＡ表達(dá)的相對水平。 １．１０ 免疫組化ＳＰ法測定創(chuàng)面組織ＴＧＦ-β１ 含量［８］ 取單純創(chuàng)傷組傷后ｄ７創(chuàng)面組織，免疫組化ＳＰ法測定創(chuàng)面組織ＴＧＦ-β１含量。采用ＨＰＩＡＳ１０００高清晰度彩色病理圖文報(bào)告管理系統(tǒng)分析ＴＧＦ-β１表達(dá)量。每只動物的每種處理皮膚切３張切片，每張切片隨機(jī)選取５個高倍鏡視野（×４００），測定每個視野下陽性反應(yīng)的平均吸光度、陽性反應(yīng)面積和所有細(xì)胞總面積，計(jì)算陽性面積率。每只動物的每種處理皮膚切３張切片的共１５個視野的平均吸光度、陽性面積率的平均值作為該動物處理的測量值。 １．１１ Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡分析Ｓｍａｄ２，３，４及７蛋白表達(dá)水平［９］ 將傷后ｄ７的單純創(chuàng)傷組創(chuàng)面組織樣品調(diào)整到各上樣量蛋白至５０μｇ。８％十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（ＳＤＳＰＡＧＥ）分離蛋白質(zhì)。Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡法測定創(chuàng)面組織Ｓｍａｄ２，３，４和７蛋白水平。 １．１２ 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)均用ＳＰＳＳ１１．０統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。結(jié)果采用珋ｘ±ｓ表示，比較采用方差分析，組間差異采用兩兩比較的Ｄｕｎｎｅｔｔｔ檢驗(yàn)。 ２ 結(jié)果 ２．１ 大黃素對皮膚創(chuàng)面修復(fù)的影響 單純創(chuàng)傷模型組的單純創(chuàng)傷和基質(zhì)對照組在觀察期間（ｄ３～７），傷口隨時間增加愈合率在提高，兩組沒有差別，說明所造模型有一定的自然愈合能力，基質(zhì)沒有治療作用。大黃素組和ｒｈＥＧＦ陽性對照組，與基質(zhì)對照組相比，對傷口的治療作用隨時間的增加而增加。ｄ３時，３個劑量大黃素組和ｒｈＥＧＦ陽性對照組，與基質(zhì)對照組相比，對傷口的愈合無促進(jìn)作用。ｄ５時，大黃素２００μｇ·ｇ－１組與基質(zhì)對照組比，對傷口的愈合有明顯的促進(jìn)作用。ｄ７時，３個劑量大黃素組的創(chuàng)面愈合百分率明顯增加，與基質(zhì)對照組相比有顯著性差異。ｒｈＥＧＦ陽性對照組創(chuàng)面愈合百分率變化和大黃素（２００μｇ· ｇ－１）組相似（表１）。 金黃色葡萄球菌感染模型組，大黃素各組隨著時間與劑量的增加創(chuàng)面愈合百分率有增加的趨勢。除大黃素１００μｇ·ｇ－１（ｄ６）外，基質(zhì)對照組相比，均有顯著性差異。在ｄ９～１４，大黃素劑量２００μｇ·ｇ－１的創(chuàng)面愈合百分率明顯高與創(chuàng)灼膏陽性對照組。創(chuàng)灼膏陽性對照組傷口的變化和大黃素（２００μｇ·ｇ－１）組變化相似（表２）。綠膿桿菌感染模型組，大黃素治療組的傷口愈合情況與金黃色葡萄球菌感染模型組相似（表３）。 ２．２ 大黃素對單純創(chuàng)傷皮膚組織病理的影響 光鏡下可見空白對照組（圖１Ａ）的皮膚創(chuàng)面可見含大量炎癥細(xì)胞的壞死組織，其下組織中也有大量炎癥細(xì)胞，并可見血管充血；基質(zhì)對照組（圖１Ｂ）的創(chuàng)面也可見大量炎癥細(xì)胞的壞死組織，其下組織略水腫并有較多炎癥細(xì)胞；ｒｈＥＧＦ組（圖１Ｃ）可見含壞死組織的痂皮脫落，表皮開始向創(chuàng)面生長，其下組織中有一些新生血管；大黃素組（２００μｇ·ｇ－１）（圖１Ｄ）皮膚痂皮脫落，創(chuàng)面已由表皮覆蓋，其下組織中僅有少量炎癥細(xì)胞。 ２．３ 大黃素對感染創(chuàng)面痂下組織細(xì)菌數(shù)的影響
細(xì)菌感染組中，空白對照組ｄ６的痂下組織細(xì)菌數(shù)較ｄ１略有升高，而ｄ９痂下組織細(xì)菌數(shù)較ｄ１降低，表明隨著損傷的恢復(fù)，痂下組織細(xì)菌會被逐漸清除。在實(shí)驗(yàn)觀察期間（ｄ６～９），隨著大黃素劑量的增加和時間的延長不斷減少痂下組織細(xì)菌數(shù)。創(chuàng)灼膏陽性對照組的作用與大黃素（１５０和２００μｇ·ｇ－１）組變化接近（表４和５）。 ２．４ 大黃素對單純創(chuàng)傷組皮膚肉芽組織羥脯氨酸及蛋白含量的影響 表６結(jié)果可以說明基質(zhì)對創(chuàng)面肉芽組織羥脯氨酸和蛋白含量沒有影響。大黃素隨劑量增加而增加單純創(chuàng)面肉芽組織羥脯氨酸和蛋白含量，與基質(zhì)對照組相比有明顯差別。ｒｈＥＧＦ陽性對照組對羥脯氨酸含量的影響與大黃素２００μｇ·ｇ－１相近；對蛋白含量的作用
好于大黃素１００μｇ·ｇ－１，但不及大黃素２００μｇ·ｇ－１組（表６）。 ２．５ 大黃素對單純創(chuàng)傷組皮膚創(chuàng)面ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表達(dá)的影響 大黃素治療７ｄ后，隨藥物濃度的增加，ＴＧＦ-β１ｍＲＮＡ的表達(dá)逐漸增高，與基質(zhì)對照組相比均有顯著差異，但只有大黃素２００μｇ·ｇ－１組與ｒｈＥＧＦ陽性對照組ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表達(dá)變化相似（表７，圖２）。 ２．６ 大黃素對單純創(chuàng)傷組皮膚創(chuàng)面ＴＧＦβ１ 含量 的影響ＴＧＦ-β１表達(dá)的陽性信號分布于胞漿內(nèi)呈棕黃色。大黃素組１００，１５０μｇ·ｇ－１創(chuàng)面組織成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞ＴＧＦβ１染色弱陽性，胞漿內(nèi)可見少量棕黃色顆粒，大黃素組２００μｇ·ｇ－１和ｒｈＥＧＦ陽性對照組ＴＧＦβ１染色強(qiáng)陽性，胞漿內(nèi)可見密集分布的棕黃色顆粒（圖３）。半定量分析結(jié)果表明，與基質(zhì)對照組比，大黃素組和ｒｈＥＧＦ組ＴＧＦβ１含量均明顯增加（表８）。 ２．７ 大黃素對單純創(chuàng)傷模型組創(chuàng)面Ｓｍａｄ蛋白表達(dá)的影響 Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡（圖４）檢測顯示，大黃素對Ｓｍａｄ４蛋白表達(dá)無影響。與基質(zhì)對照組比，大黃素１５０和２００μｇ·ｇ－１使Ｓｍａｄ７蛋白表達(dá)降低；大黃素２００ μｇ·ｇ－１使Ｓｍａｄ３和Ｓｍａｄ２表達(dá)增加，其他劑量則無影響。與基質(zhì)對照組比，ｒｈＥＧＦ陽性對照組，對Ｓｍａｄ４，Ｓｍａｄ７表達(dá)無影響；使Ｓｍａｄ２，３蛋白表
達(dá)增加，且與大黃素２００μｇ·ｇ－１組的作用相當(dāng)。與ｒｈＥＧＦ組相比，大黃素１００和（或）１５０μｇ·ｇ－１組使Ｓｍａｄ２，Ｓｍａｄ３表達(dá)明顯下降（表９） ３ 討論 外科創(chuàng)傷、燒傷，以及癤、疔、瘡疽、褥瘡等疾病是臨床上常見的皮膚病。目前，促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)與組織再生的藥物已成為世界性的熱門研究課題［１０］。
蘆薈大黃素已被證明具有促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)的作用并已應(yīng)用于臨床［１１］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大黃素劑量依賴性促進(jìn)家兔全層皮膚切除傷創(chuàng)面的愈合百分率，降低感染創(chuàng)面細(xì)菌數(shù)，明顯促進(jìn)創(chuàng)面炎性滲出物吸收、肉芽組織形成和表皮增生，表明大黃素具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用。這也許是祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為大黃外用能“清血熱、破瘀血、消腫痛和祛瘀生新”的物質(zhì)基礎(chǔ)。創(chuàng)面中膠原和蛋白含量是創(chuàng)面愈合的指標(biāo)，皮膚缺損主要通過肉芽組織的生長來修復(fù)，需要細(xì)胞的增殖與蛋白質(zhì)的合成。肉芽組織生長愈快，蛋白和膠原的含量也就愈高，而羥脯氨酸含量能特異反映組織膠原蛋白含量，因此檢測蛋白質(zhì)、羥脯氨酸的含量可以反映創(chuàng)傷修復(fù)中肉芽組織的生長和創(chuàng)面愈合的狀況。本文結(jié)果大黃素給藥組創(chuàng)面蛋白和羥脯氨酸含量明顯高于基質(zhì)對照組，表明大黃素可明顯促進(jìn)創(chuàng)面組織膠原蛋白的合成、加速細(xì)胞外基質(zhì)的 重建。ＴＧＦ-β１是一種多功能的細(xì)胞因子，趨化成纖維細(xì)胞和炎癥細(xì)胞向傷口聚集，誘導(dǎo)肉芽組織生長和表皮形成，在促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)中起重要作用［１２］。ＴＧＦ-β１信號進(jìn)入細(xì)胞漿后使Ｓｍａｄ３和Ｓｍａｄ２磷酸化，與Ｓｍａｄ４形成多聚物，隨后，Ｓｍａｄ
ｓ復(fù)合物易位至細(xì)胞核，在核內(nèi)激活ＴＧＦβ１ 反應(yīng)性基因的轉(zhuǎn)錄。Ｓｍａｄ２，３為受體調(diào)節(jié)Ｓｍａｄ；Ｓｍａｄ７抑制受體調(diào)節(jié)Ｓｍａｄ的信號傳導(dǎo)；Ｓｍａｄ４是受體調(diào)節(jié)Ｓｍａｄ傳導(dǎo)信號的伴侶。Ｓｍａｄｓ蛋白介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ＴＧＦβ１ 信號傳遞，與ＴＧＦ-β１ 在組織修復(fù)中的作用密切相關(guān)［１３］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大黃素劑量依賴性增加 ＴＧＦ-β１ｍＲＮＡ表達(dá)和ＴＧＦβ１ 含量，同時使Ｓｍａｄ２和３蛋白表達(dá)增加，Ｓｍａｄ７蛋白表達(dá)降低，對Ｓｍａｄ４蛋白水平無明顯影響，提示大黃素可能通過增強(qiáng)創(chuàng)面合成與釋放ＴＧＦβ１能力，調(diào)節(jié)ＴＧＦβ１信號傳導(dǎo)通路中Ｓｍａｄｓ蛋白水平，調(diào)控ＴＧＦ-β１作用靶基因的特異性表達(dá)，上調(diào)創(chuàng)傷愈合過程中細(xì)胞因子水平，從而提高創(chuàng)面愈合速度和質(zhì)量。
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