HPLC 法測(cè)定健寶膠囊中淫羊藿苷含量 | HPLC 法測(cè)定健寶膠囊中淫羊藿苷含量 |
| 發(fā)布時(shí)間:2010-11-11 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):2466 |
李維鳳,牛曉峰,李 延 (西安交通大學(xué)藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室,西安 710061) 摘 要:目的 建立健寶膠囊中淫羊藿苷的含量測(cè)定方法。方法 采用高效液相色譜法,色譜柱為C18 (150 mm ×4. 6 mm) ,流動(dòng)相為乙腈20. 075 mol·L - 1磷酸溶液(25∶75) ,流速1. 0 mL·min - 1 ,檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm。結(jié)果 淫羊藿苷進(jìn)樣量在0. 06～0. 30μm 范圍內(nèi),線性關(guān)系良好( r = 0. 9991) ,方法回收率為98. 50 %( n = 5 ,RSD = 1. 20 %) 。 結(jié)論 本方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速,適合于該藥的質(zhì)量分析檢驗(yàn)。 關(guān)鍵詞:健寶膠囊;淫羊藿苷;高效液相色譜法 健寶膠囊由淫羊藿、菟絲子、巴戟天、熟地、韭菜子、仙茅、牛膝、甘草8 味中藥組成,具有補(bǔ)腎壯陽,強(qiáng)筋壯骨,活血通絡(luò),填精補(bǔ)髓之功效。用于陽痿早瀉,腰膝酸軟,神疲力乏,頭暈耳鳴等。淫羊藿為方中主藥,具有補(bǔ)腎陽,強(qiáng)筋骨,祛風(fēng)濕的功能。其所含淫羊藿苷為其主要活性成分,為了確保藥品的安全有效,我們采用高效液相色譜法對(duì)其所含淫羊藿苷進(jìn)行了定量測(cè)定。 1 儀器與試藥 所用儀器為shimadzu 10A 型高效液相色譜儀(日本島津公司) ,SPD210AVP 型紫外檢測(cè)器(日本島津公司) 。色譜柱為C18 色譜柱(150 mm ×4. 6mm) (大連物化所) 。淫羊藿苷對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。健寶膠囊由西安遠(yuǎn)志醫(yī)藥生物技術(shù)研究所提供, 批號(hào)為000821 , 000823 ,000827 。 2 實(shí)驗(yàn)方法和條件 2. 1 供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物0. 5 g ,精密稱定,加入70 %(體積分?jǐn)?shù)) 乙醇40 mL ,超聲處理30 min ,定容至50 mL 量瓶中,搖勻,即得。 2. 2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品7. 5 mg ,置50 mL 量瓶中,加70 %(體積分?jǐn)?shù)) 乙醇至刻度,搖勻;精密量取10 mL ,置50 mL 量瓶中,加70 %(體積分?jǐn)?shù)) 乙醇至刻度,搖勻,即得(每mL 含淫羊藿苷30μg) 。 2. 3 色譜條件 流動(dòng)相為乙腈20. 075 mol·L - 1磷酸溶液(25∶75) ,流速為1. 0 mL·min - 1 ,檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm ,柱溫為室溫。 3 方法學(xué)考查 3. 1 線性關(guān)系的考查 精密吸取對(duì)照品溶液2 、4 、6 、8 、10μL ,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定,以對(duì)照品含量( x) 和峰面積( y) 進(jìn)行線性回歸�；貧w方程為: y = 220420 x - 6526 , r =0. 9991 。結(jié)果表明: 淫羊藿苷進(jìn)樣量在0. 06 ～ 0. 25μg范圍內(nèi),濃度同峰面積積分值呈良好線性 關(guān)系。 3. 2 精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液(15. 5 mg·L - 1) ,連續(xù)注入液相色譜儀5 次,按上述色譜條件測(cè)定面積積分值。結(jié)果表明:精密度試驗(yàn)的RSD 為1. 55 %。 3. 3 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)樣品( 批號(hào):000821) ,制備供試品溶液5 份,按上述色譜條件,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積積分值。結(jié)果表明:重現(xiàn)性試驗(yàn)RSD 為1. 01 %。 3. 4 干擾性試驗(yàn) 本處方中含淫羊藿藥材,因而按供試品制備方法制備了缺淫羊藿藥材的陰性對(duì)照品溶液,按上述色譜條件,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積積分值,結(jié)果表明:陰性對(duì)照品溶液中無淫羊藿苷吸收峰,說明樣品中淫羊藿苷峰來自淫羊藿 藥材。 3. 5 回收率試驗(yàn) 取已知含量的樣品(批號(hào):000821) 0. 2 g , 精密稱定, 精密加入對(duì)照品溶液1 mL ,揮干,依前法制備供試品溶液,按上述色譜條件,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積積分值。結(jié)果表明: 加樣回收試驗(yàn)的平均回收率為98. 50 % ,RSD 為1. 20 %。 4 樣品測(cè)定 分別精密吸取供試品溶液10μL ,對(duì)照品溶液5μL ,按上述色譜條件,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積積分值,外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算樣品含量(見表1) 。
5 討 論 本實(shí)驗(yàn)供試品溶液制備中比較了兩種提取方法:回流提取和超聲提取,同時(shí)對(duì)不同時(shí)間的提取效果進(jìn)行比較。結(jié)果表明:樣品經(jīng)超聲處理20 min及回流提取1 h 后,淫羊藿苷即可提取完全,由于超聲處理較為方便、省時(shí),故樣品采用超聲處理20 min ,制備供試品溶液。 由于本制劑中藥味較多,曾采用甲醇超聲處理制備供試品溶液,但所含雜質(zhì)較多,分離度較差,后改用70 %(體積分?jǐn)?shù)) 乙醇制備供試品溶液,由于70 %(體積分?jǐn)?shù)) 乙醇提取出的脂溶性雜質(zhì)較少,故色譜圖中雜質(zhì)干擾較少,分離度好,而且也可將淫羊藿苷提取完全。 產(chǎn)品鏈接： 杜仲提取物 綠原酸 金銀花提取物 苦杏仁苷 枇杷葉提取物-熊果酸 大花紫薇提取物-科羅索酸 上禾生物 專注植提 精于高純 基于您對(duì)天然產(chǎn)物需求持續(xù)創(chuàng)新 |
