植物綠原酸的研究動態(tài) | 植物綠原酸的研究動態(tài) |
| 發(fā)布時間:2011-01-15 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):3265 |
沈奇 ，顧龔平 ，張衛(wèi)明 ，吳國榮 (1．南京師范大學(xué)生命科學(xué)院，江蘇南京210017；2．南京野生植物綜合利用研究院，江蘇南京210042) 摘要 闡述了近些年來國內(nèi)外關(guān)于植物綠原酸所做的研究工作。植物綠原酸的提取、純化、鑒定和藥理活性及其應(yīng)用開發(fā)所取得成果。揭示了綠原酸具有潛在的、廣闊的應(yīng)用前景。 關(guān)鍵詞 綠原酸；提�。患兓�；藥理作用 綠原酸(chlomgenic acid)，又名3一咖啡酰奎尼酸(3一caffeoylquinic acid)，是植物在有氧呼吸過程中經(jīng)磷酸戊糖途徑(HMS)的中間產(chǎn)物合成的一種苯丙素類物質(zhì)。自從20世紀(jì)50年代從蘋果中提出有生理作用的綠原酸 [1]以后，綠原酸就開始被人們所關(guān)注。據(jù)報道，綠原酸具有較強的生物學(xué)活性。它對消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)均有藥理作用；口服綠原酸可顯著刺激膽汁的分泌，具有利膽功效；此外，綠原酸還具有一定的降壓作用；它對急性咽喉炎癥及化膿性皮膚病有顯著療效；因此，在有的藥品制劑中已將其作為質(zhì)量控制的指標(biāo)之一 [2，3]。本文對近些年來植物綠原酸的提取、分離和生理活性的研究成果結(jié)合自己開展的工作予以介紹。 1 綠原酸的提取、純化和鑒定 自從20世紀(jì)50年代Hulmc從蘋果中提出綠原酸開始，及以后開展的綠原酸生理活性的研究后，人們就對植物綠原酸給予了高度的關(guān)注。因此怎樣開發(fā)新的植物資源以及新的技術(shù)來提高綠原酸提取物的效率是植物綠原酸研究的主要內(nèi)容之一。 1．1 提取 目前報道的提取方法主要是三種，即醇提、水提和超臨界萃取[4,5]。張玲等研究表明[6]綠原酸是一種酯，因此在堿性環(huán)境下，容易水解成咖啡酸和奎尼酸。所以綠原酸一般的提取條件是在酸性的環(huán)境下，并且溫度低于60℃。目前，對于醇提的研究，尉芹等[8]報告有四種影響因素，即濃度、反應(yīng)時間、物料比以及反應(yīng)溫度。提取的含量與濃度呈正比；在物料比上，1：16為最好。劉祥義與韋藤幼[7,8]分別用超聲波和微波的方法，使細胞破碎，更容易得到綠原酸。劉祥義的研究表明室溫下乙醇質(zhì)量分數(shù)30％ ，超聲強度2檔，作用時間15 min，料液比為1：16，提取次數(shù)2次，是提取綠原酸的最佳條件。韋藤幼[9]報告微波預(yù)處理提取法的提取時間比傳統(tǒng)的縮短6倍、提取率提高1％。 1．2 純化 上述的粗提液經(jīng)過濃縮后要進一步純化才能得到綠原酸的粗品。尉芹等[9]試驗了一些提取原酸純化的常用方法，包括石硫醇法、醇沉法、鉛沉法、異戊醇法、異丙醇一乙酸乙酯提取法以及柱層析法等。高春榮等[10]的研究表明，柱層析方法比較好。目前，采取的最多的是鉛沉法[11]和柱層析法。已有文獻表明柱層析法最常用的是大孔樹脂柱[12]和硅膠柱[13]。錢驊等[14]篩選了數(shù)十種大孔樹脂柱，得出NKA一9是最好的。而李進飛等[15]也用樹脂法純化杜仲的綠原酸，得出在pH3，流速不超過2．0 mL／min和用50％ 的乙醇洗脫的條件下，純化的綠原酸最高。高春榮等[10]用D101純化金銀花中的綠原酸，認為在pH1，質(zhì)量分數(shù)在0．25 g／mL，流速在3 mL／min，溶液處理用4倍于床體積的水洗脫效果最好�，F(xiàn)在彭密軍等[16]用制備性高效液相色譜法來純化分離綠原酸。最佳的操作條件為：流速梯度進行洗脫，流速先為28 mL／min，然后為45 mL／min，流動相為15％ 的有機酸B和0．1％的有機酸E(體積分數(shù))；測定波長為254 m；進樣體積為10 mL；進樣量為2 500 nag。測定其純度在98％以上。從而開辟了新的純化方法。由于綠原酸的穩(wěn)定性不好，容易受到日光和溫度的影響[17]，因此武雪芬等[18]利用B一環(huán)糊精可以包合綠原酸的原理創(chuàng)造出用B一環(huán)糊精沉淀的提取純化綠原酸的新方法。并且證明包合B一環(huán)糊精的綠原酸穩(wěn)定性顯著增加。 1．3 檢測 綠原酸的應(yīng)用價值得到廣泛關(guān)注，已成為藥品制劑中的質(zhì)量指標(biāo)。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及中草藥研究越來越趨于量化，檢測的方法也越來越精確和方便。目前測定綠原酸含量的方法很多，常采用毛細管電泳法、HPLC法、和紙層析一紫外可見分光光度法等[19,20]。由于綠原酸類物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)相似，常同時存在于同一藥材或同一中藥制劑中，尤其是中藥復(fù)方成分更是復(fù)雜多樣。在進行含量測定時常難以分離，一般分析方法如紫外分光光度法(uv)，很難分離測定，且存在其他雜質(zhì)的干擾。所以采用紙層析一紫外可見光分光光度計[14]和高效液相色譜(HPLC)是最常用的定性定量分析手段。但是由于綠原酸在水中會部分解離，解離后的綠原酸與固定相作用較強，從而導(dǎo)致拖尾，所以綠原酸的反相HPLC測定，需用酸化流動相以抑制其解離，克服拖尾現(xiàn)象。如譚曉杰等[21]用RP- HPLC的方法檢測野菊花中的綠原酸含量。 2 綠原酸的生理活性 2．1 藥理活性 2．1．1 抗氧化作用 Kono等 [22]研究證明綠原酸及綠原酸的鐵絡(luò)合物是天然抗氧化劑。Rodriguez[23]研究表明綠原酸具有提高葡萄糖水平并且降低血漿和肺中脂質(zhì)產(chǎn)物。Kasai等[24]研究了綠原酸的抗氧化的機理，綠原酸可以抑制DNA受到活性氧攻擊時形成8一OH—dG有關(guān)。綠原酸也是一種新型高效的酚型天然抗氧化劑。在某些食品中可取代或部分取代目前常用的人工合成抗氧化劑。在豬油中，若添加少量綠原酸，可提高豬油氧化穩(wěn)定性，增長貯存期。目前，日本將葵花籽粕中提取的綠原酸成功開發(fā)成水溶性天然抗氧化劑。 2．1．2 抗癌作用 綠原酸是很有希望的抗艾滋病毒(HIV)的先導(dǎo)化合物[25]。綠原酸還具有顯著的抗癌作用[26,27】。 2．1．3 食品保鮮作用 綠原酸具有增香和護色作用，可用于食品和果品保鮮。綠原酸用于果汁保鮮，可有效防止飲料和食品的腐敗變質(zhì)；Wilska等人[33]研究還發(fā)現(xiàn)，綠原酸大大提高草墓等果汁穩(wěn)定性。將少量綠原酸加到天然色素溶液中，對色素顏色有穩(wěn)定作用，因此，綠原酸又是一種良好的食品護色劑。劉軍海等[32]認為綠原酸具有多種生理功能，可用綠原酸制作保健食品或飲料。 2．1．4 抗紫外和抗輻射Facino等人研究，以綠原酸為代表的天然多酚物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)它們可以保護膠原蛋白不受活性氧等自由基傷害，并能有效防止紫外線對人體皮膚產(chǎn)生傷害作用[34]�，F(xiàn)已有多項添加綠原酸后用于皮膚防曬霜和防止紫外線和染發(fā)劑對頭發(fā)損傷洗發(fā)水的歐洲專利[32]。日本同樣利用綠原酸及其衍生物抗氧化特性已研制出抗衰老護膚品。 2．1．5 其他作用 據(jù)報道，綠原酸具有抗菌、抗病毒、利膽、保肝、降壓、興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用，并且可以增加腸胃蠕動能力，并促進胃液分泌及膽汁分泌等。綠原酸也可以治療急性喉炎及化膿性皮膚病。另外，綠原酸對婦女月經(jīng)過多、子宮出血也有良好的止血效果[28,29]。Kono等[30]研究認為綠原酸可以代替次氯酸具有抗菌的作用。綠原酸及其衍生物是6一磷酸葡萄糖移位酶體系的專一性抑制劑，有助于降低非胰島素依賴性糖尿病患者所表現(xiàn)出的較高的肝糖排泄速度，顯示出綠原酸在治療糖尿病方面的良好前景[31]。 3 展望 在國外綠原酸已廣泛應(yīng)用于化妝品、食品和藥品領(lǐng)域。目前，國內(nèi)已經(jīng)轉(zhuǎn)向綠原酸的水解產(chǎn)物咖啡酸的生理作用的研究和綠原酸的提取純化上，而國外注重新的生理功能的拓展[35]及可能的作用機制[30]的討論。轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以讓細胞產(chǎn)生綠原酸已經(jīng)成為可能[38]。但是國內(nèi)大量制備綠原酸的技術(shù)起步較晚，還不成熟，資源利用還有待于進一步的優(yōu)化和發(fā)展。隨著綠原酸修飾的興起[18]，會使綠原酸的穩(wěn)定性大大加強，從而進一步有效得利用綠原酸，使它更加具有廣闊的應(yīng)用前景。 參考文獻： 【1 J Hulme A C．111e isolation of chlorogenic acid from the apple fruit[J]．Biochem．1953。53(3)：337—4o． [2] 肖崇厚．中藥化學(xué)[M]．上海：上�？茖W(xué)技術(shù)出版社．1987．396—397．[3] 林丹．金銀花不同提取方法的綠原酸比較研究[J]．天然產(chǎn)物研究與開發(fā)．2003，15(2)：124—126． [4] 薛焰．超臨界萃取與溶劑法聯(lián)用提取滁菊有效成分的工藝研究[J]．南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2004，20(2)：102—103． [5] 張玲．金銀花提取工藝研究[J]．中藥新藥與臨床藥理，2003，14(1)：59—61． [6] 尉芹．杜仲葉中綠原酸的提取工藝條件研究[J]．林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2001，21(4)：27—32． [7] 劉祥義．元寶楓綠原酸的超聲提取方法研究[J]．云南化工，2003，30(2)：23—25． [8] 韋藤幼．微波預(yù)處理法提取金銀花中的綠原酸[J]．中成藥，2003，25(7)：534—537． [9] 尉芹等．綠原酸及其提取分離方法評述[J]．中成藥，2301，23(2)：135—138． [10] 高春榮．金銀花中綠原酸的提取工藝[J]．中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2003，8(4)：5—8． [11] 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