杜仲雄花及花茶中綠原酸含量分析 | 杜仲雄花及花茶中綠原酸含量分析 |
| 發(fā)布時間:2011-02-17 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):3194 |
白喜婷，朱文學(xué)，羅磊，向進(jìn)樂，廉小梅 (河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，河南洛陽471003) 籀要：用高效液相色譜法測定杜仲雄花茶加工前后綠原酸的含量變化。色譜條件Kromasil-C． 色譜柱(4．6mmX250mm。5．O m)；流動相乙腈一O 4％磷酸(8：92)；檢測波長327nm；流速1．OrnL·min一： 柱溫25℃ 綠原酸對照品在0．05-0．551．Lg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系．平均回收率為98、95％．RSD 為1．61％．提取方法為5O％甲醇加熱回流30min 該方法準(zhǔn)確、簡捷．可用于杜仲雄花茶加工過程中綠原酸的含量控制。 關(guān)奠詞：杜仲雄花．綠原酸．高效液相色譜法 杜仲(Eueornmia ulmoides Oliv)為杜仲科杜仲屬多年生落葉喬木，是我國特有的名貴樹種[1，2]。雌雄異株．其中雄株占40％ ～60％ 。雄花簇生于雄株的當(dāng)年生枝條基部，花量大，采集容易[3]。杜仲全身是寶，含有多種活性成分．具有很高的藥用價(jià)值。目前，杜仲藥材主要采自樹皮，以皮入藥，味甘、性溫，歸肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)腎、強(qiáng)筋骨、安胎的功效[4，5]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，杜仲雄花與皮含有相類似的有效成分[6]，其中，綠原酸是主要有效成分之一，具有廣泛的抗菌、抗病毒、抗誘變、抗腫瘤、抗氧化，同時還具有較強(qiáng)的降壓作用[7]。至今，對于綠原酸的研究，主要集中在杜仲葉和杜仲皮上， 而營養(yǎng)和活性成分最集中的杜仲雄花及產(chǎn)品杜仲雄花茶中綠原酸的含量分析報(bào)道很少。該實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對杜仲雄花和杜仲雄花茶中綠原酸的含量作了測定，為保持杜仲雄花加工過程中的有效成分提供理論依據(jù)。 1 材料與方法 1．1 材料與儀器 杜仲雄花2oo6年4月7 日采于洛陽市汝陽縣王坪鄉(xiāng)杜仲種植基地，在每個花期，即始花期、盛花期、末花期樹冠東西南北四個方向采花，采后混和均勻；杜仲雄花茶由洛陽市雞冠山商貿(mào)有限公司提供；乙腈色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心生產(chǎn)；其余試劑均為分析純；綠原酸對照品購自中國藥品生物制品檢定所。waters 2690高效液相色譜儀，Waters 2487紫外檢測器，Millennium32 色譜工作站(美國Waters)；BS210S型1／1萬電子分析天平北京賽多利斯天平有限公司。 1．2 色譜條件 Kromasil—C18色譜柱(4．6mmx250mm，5．Otzm)；流動相乙腈一0．4％磷酸(8：92)；檢測波長327nm；流速1．OmL·min～；柱溫25℃ 。在該色譜條件下，樣品中綠原酸峰與其他非被測成分峰能夠達(dá)到基線分離．對照品與樣品的色譜圖見圖1。 1．3 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品1．25mg置于25mL棕色容量瓶中，加50％ 的甲醇溶解并稀釋至刻度，制成每1mL含50ug的溶液。 1．4供試品溶液的制備 分別精密稱取杜仲雄花與雄花茶1．25g和1g置于兩個25OraL具塞錐形瓶中， 精密加入50％ 甲醇25mL．稱定重量，冷浸30min，然后加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用50％ 的甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液用孔徑為0．45um 的微孔濾過膜濾過，即得。 2 結(jié)果與分析 2．1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定
分別進(jìn)樣濃度為50ug／mL的對照品溶液1、3、5、7、9、11uL，在上面的色譜條件下進(jìn)行測定。以進(jìn)樣量(pug)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程y=2l1．36x-34．671，r=0．9998，說明綠原酸在0．05～0．551xg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。 2．2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 將同一供試品溶液在制備后的0、4、8、12、16h．進(jìn)樣分析，測得綠原酸峰面積的RSD 值1．1％ (n=5)，表明樣品在16h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。 2．3 精密度實(shí)驗(yàn) 將對照品溶液重復(fù)進(jìn)樣5次，每次101xL，分別測得綠原酸的峰面積， 計(jì)算RSD值為0．91％ (n=5)，表明儀器精密度良好。 2．4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取杜仲雄花茶5份，每份1g，按照“供試品溶液制備”項(xiàng)下操作．各取101xL進(jìn)樣，測定綠原酸平均含量的RSD為1．3％ ，表明方法的重復(fù)性良好。 2．5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取已知含量的杜仲雄花茶各6份． 每份1g，分別加入綠原酸對照品，按“供試品溶液制備”項(xiàng)下操作，測定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。
從表1中可以看出，綠原酸的回收率為98．95％．RSD 為1．61％ 。 2．6 樣品含量測定 按照2．2方法．將杜仲雄花和杜仲雄花茶制備的供試品溶液，分別精密吸取10uL ．按上述色譜條件進(jìn)行測定，按外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果見表2。
由表2可以看出． 杜仲雄花中綠原酸的含量是0．501％ ，加工后減少到0．345％ ，含量損失31．14％ ．這可能是由于杜仲雄花加工過程中受高溫所致。因?yàn)槎胖傩刍ㄔ诩庸み^程中要經(jīng)過殺青、烘干、復(fù)火等受熱過程，最高溫度可達(dá)到260℃，而由于組成綠原酸的鄰苯二酚結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定， 在高溫加熱條件下易氧化分解，所以綠原酸的含量在加T 前后有較大變化。 3 結(jié)論與討論 3．1 對流動相進(jìn)行了比較，結(jié)果以乙腈一0．4％ 磷酸溶液以8：92的比例較好，能夠使綠原酸與非被測成分基線分離。 3．2 用高效液相色譜法測定杜仲雄花中綠原酸的含量，與西北農(nóng)林科技大學(xué)董娟娥等人同測定的結(jié)果基本一致。 3．3 杜仲雄花經(jīng)過加工以后綠原酸的含量明顯降低。如何最大程度保留杜仲雄花茶中有效成分的含量，還有待于對加工工藝進(jìn)一步研究。 參考文獻(xiàn)： 【1】張康健，王藍(lán)，馬希漢．杜仲的綜合開發(fā)的進(jìn)展與前景[J]．西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，1996，11(2)：75-79． 【2】安鐵生．杜仲的資源開發(fā)及綜合利用[JJ．上海醫(yī)藥情報(bào)研究．1996(3)：10-11． 【3】杜紅巖．杜仲活性成分與藥理研究的新進(jìn)展[JJ．經(jīng)濟(jì)林研究，2003，21(2)：58． 【4】 中國藥典一部[M1．2000．131． 【5】石少瀾，王祝舉，邵愛娟，等．高效液相色譜法測定杜仲皮中綠原酸的含量【J]．中國中藥雜志，2005，30(9)：715～716． 【6】董娟娥，梁宗鎖，張康健，等．杜仲雄花中次生代謝物合成積累的動態(tài)變4E[J]．植物資源-b環(huán)境學(xué)報(bào)，2005，14(4)：7—10． 【7】孫文丑，蝸金房．天然活性成分簡明手冊【M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社．1998．120～121． 杜仲提取物 綠原酸 金銀花提取物 苦杏仁苷 枇杷葉提取物-熊果酸 大花紫薇提取物-科羅索酸 上禾生物 專注植提 精于高純 基于您對天然產(chǎn)物需求持續(xù)創(chuàng)新 |
