999国内精品视频免费_国产真人作爱免费视頻_口口亚洲国产综合Av_99Re国产精品视频

王自芬, 劉文哲

(西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 陜西西安　710069)

　喜樹Camp totheca acum ina ta Decne1 為珙桐科落葉喬木, 我國(guó)特有樹種, 分布于我國(guó)長(zhǎng)江流域及西南各省[ 1 ]。喜樹全株含抗腫瘤生物堿喜樹堿(camp2 to thecin, CPT ) 及衍生物[ 2 ]。1966 年美國(guó)的W all 等首次從喜樹中分離出喜樹堿[ 3 ] , 抗腫瘤實(shí)驗(yàn)證明這種吲哚類生物堿具有抗癌活性[ 4 ] , 但由于其副作用較大,未能實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用[ 5 ]。20 世紀(jì)80 年代以來的研究發(fā)現(xiàn)了喜樹堿通過抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶É ( topo isom eraseÉ ) 來發(fā)揮細(xì)胞毒性的獨(dú)特抗癌機(jī)制[ 4 ] , 引發(fā)了喜樹堿抗癌研究的新熱潮。從喜樹堿衍生物中篩選與喜樹堿具有相同抗癌機(jī)制且高效低毒的新化合物, 已成為獲得新型抗癌藥物的重要方法之一。

　　喜樹廣泛分布于我國(guó)長(zhǎng)江流域及西南各省, 張玉紅等僅研究分析了中國(guó)境內(nèi)7 省區(qū)喜樹果實(shí)中喜樹堿的質(zhì)量分?jǐn)?shù), 為了更全面地掌握我國(guó)喜樹資源品質(zhì), 本研究采集到全國(guó)13 個(gè)省區(qū)15 個(gè)地區(qū)的喜樹果實(shí), 應(yīng)用HPLC 法研究分析喜樹堿及10-羥基喜樹堿(10-HCPT ) 質(zhì)量分?jǐn)?shù), 以選擇喜樹堿及10-羥基喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)均較高的喜樹地理種源, 為我國(guó)喜樹及喜樹堿產(chǎn)業(yè)化提供理論依據(jù)。

1　儀器、材料與方法

1.1　儀器、材料: HP1100 高效液相色譜儀,MA 200型電子分析天平(上海第二天平儀器廠) , SENCO R系列旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海申生科技有限公司) , DL —180 超聲波清洗器(浙江省象山縣石浦海天電子儀器廠) , 色譜純甲醇(中國(guó)上海陸忠試劑廠) , 分析純甲醇(天津市化學(xué)試劑六廠三分廠) , 去離子水。喜樹果實(shí)于2003 年采自下列13 個(gè)省區(qū)(表1)。喜樹堿和10-羥基喜樹堿對(duì)照品為德國(guó)Boeh ringer Ingel2heim 制藥公司B ischoff 教授所贈(zèng)。

1.2　方法

1.2.1　對(duì)照品制備: 精密稱取喜樹堿對(duì)照品5.20m g, 置于50mL 量瓶中, 加入甲醇, 超聲波助溶并定容至刻度, 搖勻, 備用。精密稱取10-羥基喜樹堿對(duì)照品5.50m g , 置于50mL 量瓶中, 加入甲醇, 超聲波助溶并定容至刻度, 搖勻, 備用。

1.2.2　供試品溶液: 干燥的喜樹果經(jīng)粉碎、過篩后,準(zhǔn)確稱取其粉末100 m g, 置于錐形瓶中, 加入10mL 甲醇超聲波提取20 m in, 重復(fù)3 次, 濾過, 濃縮,用甲醇定容至1 mL , 用0145 Lm 針頭過濾器濾過,即得供試品溶液。

1.2.3　色譜條件: ZORBAX SB2C18 (150 mm ×416mm , 315 Lm) 色譜柱(美國(guó)) ; 流動(dòng)相: 水(A ) , 甲醇溶液(B) ; 梯度洗脫程序: 0 m in (A 2B, 6∶4) , 40 m in(A 2B, 3∶7) ; 體積流量為110 mL öm in; 檢測(cè)波長(zhǎng)為254136 nm; 柱溫為25 ℃; 進(jìn)樣量為10 uL。該色譜條件下喜樹堿及10-羥基喜樹堿對(duì)照品和供試品的色譜圖見圖1。

2　結(jié)果

2.1　不同產(chǎn)地的喜樹果實(shí)中的喜樹堿及10-羥基喜樹堿: 通過對(duì)13 省區(qū)的15 產(chǎn)地喜樹果實(shí)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿分析, 不同地理種群的喜樹中,其喜樹堿和10-羥基喜樹堿差異顯著, 其中福建產(chǎn)的喜樹果實(shí)中喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高, 為01190 2%; 貴州產(chǎn)喜樹果實(shí)中喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)最低, 為01085 3% ,兩者差異極顯著(P < 0101) (圖2)。四川產(chǎn)的喜樹果實(shí)中10-羥基喜樹堿最高, 為01057 3%; 貴州產(chǎn)喜樹果實(shí)中10-羥基喜樹堿最低, 為010052% , 兩者差異極顯著(P < 0101) (圖2)。

2.2　同一省份內(nèi)不同地區(qū)喜樹果實(shí)中的喜樹堿及10-羥基喜樹堿: 在對(duì)不同省區(qū)的喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿比較分析同時(shí), 也以浙江省(杭州、金華、磐安) 為例對(duì)同一省份內(nèi)不同地區(qū)的喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿做了研究分析。結(jié)果表明, 杭州、金華、磐安喜樹果實(shí)中喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.158 1%、0.165 2%、0.140 4% , 3 者差異不顯著。杭州、金華、磐安喜樹果實(shí)中10-羥基喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.028 9%、0.018 6%、0.117 4% , 3 者差異不顯著。

2.3　新鮮喜樹果實(shí)與放置一年喜樹果實(shí)喜樹堿及10-羥基喜樹堿: 取2002 年和2003 年廣西、湖南、浙江(杭州) 喜樹果實(shí)各1 份, 比較新鮮與放置一年的喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿的差異。結(jié)果表明, 廣西、湖南新鮮喜樹果實(shí)與放置一年喜樹果實(shí)喜樹堿差異不顯著; 而浙江(杭州) 新鮮喜樹果實(shí)與放置一年喜樹果實(shí)喜樹堿差異極顯著(P < 0.01)。廣西、湖南新鮮喜樹果實(shí)與放置一年喜樹果實(shí)10-羥基喜樹堿差異不顯著。而浙江(杭州) 新鮮喜樹果實(shí)與放置一年喜樹果實(shí)10-羥基喜樹堿差異極顯著(P < 0.01)。

2.4　果皮及種子中喜樹堿及10-羥基喜樹堿: 果實(shí)是眾多木本藥用植物的主要藥用部位, 它由果皮和種子共同組成。以四川產(chǎn)喜樹果實(shí)為對(duì)象將喜樹果實(shí)的果皮和種子分離, 分別測(cè)定了它們的喜樹堿和10-羥基喜樹堿。結(jié)果表明, 種子中的喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.253 8% , 而果皮中僅為0.0-8 5% , 兩者差異顯著( P < 0.01)。種子中的10-羥基喜樹堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.057 4% , 果皮中為0.043 0% , 兩者差異不顯著。

3　討論

　　藥用植物中某種次生代謝產(chǎn)物的高低與多種環(huán)境因素有關(guān), 喜樹作為藥用植物其生物堿的量也同樣受到環(huán)境因素的影響[ 6, 7 ]。通過張玉紅等[ 8 ]和本次實(shí)驗(yàn)研究表明, 不同地理種群的喜樹果實(shí)中, 喜樹堿和10-羥基喜樹堿差異較大; 由于材料采集的年份、地區(qū)不同, 本研究所收集的各地喜樹果實(shí)中喜樹堿與張玉紅等人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不盡相同, 但均認(rèn)為不同地理種群的喜樹果實(shí)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿差異較大。這表明海拔、氣候、土壤等因素對(duì)喜樹中生物堿的積累的確存在影響。

　　通過對(duì)同一省份不同地區(qū)的喜樹果實(shí)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿進(jìn)行研究分析表明其差異不明顯, 即小范圍內(nèi)各種因素對(duì)喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿影響不大。對(duì)喜樹堿及10-羥基喜樹堿含量的綜合分析認(rèn)為四川喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿均較高, 可以作為喜樹及喜樹堿產(chǎn)業(yè)化的供選地理種源。

　　本研究還發(fā)現(xiàn), 部分產(chǎn)地新鮮與放置一年喜樹果實(shí)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿差異不明顯; 而部分產(chǎn)地新鮮與放置一年喜樹果實(shí)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿差異明顯。出現(xiàn)這一結(jié)果的原因可能有兩個(gè): 一是不同年份的氣候因素及外界刺激對(duì)喜樹果實(shí)中次生代謝產(chǎn)物積累的影響; 二是喜樹果實(shí)中的喜樹堿和10-羥基喜樹堿在放置過程中有可能分解。所以, 在提取時(shí)為了得到更多的抗癌活性物質(zhì)應(yīng)當(dāng)即采即提。

　　另外, 對(duì)喜樹果皮和種子中喜樹堿和10-羥基喜樹堿進(jìn)行分析, 發(fā)現(xiàn)喜樹堿主要存在于喜樹種子中, 而10-羥基喜樹堿在喜樹果皮和種子中的含量相當(dāng)。

References:

[ 1 ]　Delectis F lo rae Reipublicae Popularis Sinicae A gendae A 2 cadim iae Sinicae Edita1 F lora R ep ublicae P op u laris S inicae (中國(guó)植物志) [M ]1 Tomus 751 Beijing: Science P ress, 19821

[ 2 ]　Sakato K, M isawaM 1 Effects of chem ical and physical condi2 tions on grow th of Camp totheca acum inata cell cultures [J ]1 A g ric B iol Chem , 1974, 38: 49124971

[ 3 ]　W allM E, W aniM C, Cooke C E, et al1 P lant antitumo r a2 gents, the iso lation and structure of camp to thecin, a novel al2 kalo idal leukaem ia and tumo rinh ibito r from Camp totheca acum inate [J ]1 J A m Chem S oc, 1996, 88: 3888238901

[ 4 ]　H isang Y H, Herizberg R1 Camp to thecin induces p ro tein2 linked DNA break s via mammalian DNA topo isomerase [J ]1 J B iol Chem , 1985, 260 (27) : 148731

[ 5 ]　L i S Y, A dair K T1 Camp totheca acum inata Decaisne, X I SHU , a p rom ising antitumo r and antiviral tree fo r the 21^st century [A ]1 Hen M 1 R ockw ell M onog rap h [M ]1 N acog2 doches Texas: The Tucker Center Co llege of Fo restry, Stephen F1 A ustin State U niversity N acogdoches TX, 19941

[ 6 ]　Zhang L , Ren L J , L i K M 1 Comparison of the content of chebulinic acid in P hy llanthus u rinaria in different areas and seasons [J ]1 Ch in T rad it H erb D rug s (中草藥) , 2002, 33

(2) : 15721591

[ 7 ]　Zhang K J , W ang Y Q , M a X H, et al1A study on eco logy of metabo lites of E ucomm ia u lm oid es O liv1 [J ]1 S ci S ilvae S in (林業(yè)科學(xué)) , 1999, 35 (6) : 282341

[ 8 ]　Zhang Y H1 The geograph ical variation and seasonal changes of camp to thecin in fruits of Camp totheca acum inata [J ]1 J N ortheast Forest U niv (東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)) , 2002, 30 (6) :

442461

杜仲提取物   綠原酸  金銀花提取物  苦杏仁苷  枇杷葉提取物-熊果酸    大花紫薇提取物-科羅索酸

  淫羊藿苷  二氫楊梅素  獐牙菜苦苷

上禾生物  專注植提  精于高純      基于您對(duì)天然產(chǎn)物需求持續(xù)創(chuàng)新