楊梅樹皮素誘導(dǎo)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究 | 楊梅樹皮素誘導(dǎo)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究 |
| 發(fā)布時(shí)間:2011-04-28 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):3487 |
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摘要：探討楊梅樹皮素（ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ，ＭＹＲ）對人肝癌ＨｅｐＧ２抑制生長和誘導(dǎo)凋亡作用及其機(jī)制。：ＭＴＴ法研究ＭＹＲ對人肝癌ＨｅｐＧ２的抑制生長；熒光染色和電子透射電鏡觀察ＨｅｐＧ２細(xì)胞形態(tài)；流式細(xì)胞儀研究ＭＹＲ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞周期的影響及誘導(dǎo)凋亡作用，羅丹明１２３單染觀察ＭＹＲ對線粒體膜電位的改變；ｃａｓｐａｓｅ３，９試劑盒檢測ＭＹＲ對人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞內(nèi)ｃａｓｐａｓｅ３，９活性的影響。：ＭＹＲ對人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞生長具有明顯的抑制作用，并具有劑量依賴性，ＩＣ５０為５８６６１７ｍｇ·Ｌ－１；ＭＹＲ作用７２ｈ后，ＨｅｐＧ２細(xì)胞呈現(xiàn)典型細(xì)胞凋亡特征，細(xì)胞周期阻滯于Ｇ２／Ｍ期，凋亡率最高為６４７３％。同時(shí)線粒體膜電位明顯下降，ｃａｓｐａｓｅ３，９活性增加。：ＭＹＲ對人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞有明顯的抑制生長和誘導(dǎo)凋亡作用，其機(jī)制可能與線粒體凋亡途徑有關(guān)。 關(guān)鍵詞：楊梅樹皮素；ＨｅｐＧ２細(xì)胞；細(xì)胞凋亡；膜電位；ｃａｓｐａｓｅ３，９ 楊梅樹皮素（ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ，ＭＹＲ）是從藤茶Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓｇｒｏｓｓｅｄｎｔａｔａ莖葉中或楊梅樹皮和樹葉中提取的有效成分之一，為黃酮類化合物［１］。在人類白血病細(xì)胞ＨＬ６０中，楊梅素通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡降低腫瘤細(xì)胞活性，從而抑制腫瘤的生長［２］。但其對人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖抑制作用及機(jī)制尚未見報(bào)道。 為此本實(shí)驗(yàn)選取ＨｅｐＧ２細(xì)胞為研究對象，采用ＭＴＴ比色法、流式細(xì)胞術(shù)和分光光度法，通過觀察ＭＹＲ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡、線粒體膜電位和ｃａｓｐａｓｅ３，９活性影響，初步探討ＭＹＲ誘導(dǎo)ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制，為深入研究其在腫瘤方面的功效提供一定的理論基礎(chǔ)。 １ 材料 １１ 藥物與試劑 人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２（由哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥物研究所博士后科研工作站傳代保種）。楊梅樹皮素（徐州弘康科技有限公司，純度為９０％）。小牛血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ公司）；噻唑藍(lán)（ＭＴＴ，Ａｍｅｒｅｓｃｏ公司）；戊二醛（北京化工廠）；ＲＮＡ酶（Ｓｉｇｍａ公司）；ＲＰＭＩ１６４０培養(yǎng)液（Ｇｉｂｃｏ），Ｈｏｃｈｅｓｔ３３２５８（０６２０１０），碘化丙啶（ＰＩ），羅丹明１２３均為Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司產(chǎn)品；ｃａｓｐａｓｅ３，９試劑盒（北京碧云天生物科技有限公司）。 １２ 儀器 酶標(biāo)儀（瑞士ＴＥＣＡＮ公司），熒光顯微鏡（德國Ｌｅｉｃａ公司），倒置顯微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ公司），流式細(xì)胞儀ＣＬＯＵＴＥＲＥＰＩＣＳＸＬ（美國ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ公司）。 ２ 方法 ２１�。龋澹穑仟玻布�(xì)胞培養(yǎng) 用含１０％小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培養(yǎng)液，在５％ＣＯ２，３７℃培養(yǎng)，細(xì)胞呈貼壁生長，用０２５％的胰酶消化傳代，用于實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞均處于對數(shù)生長期。 ２２�。停裕苑z測楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞的生長抑制作用［３］ 將對數(shù)生長期的細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞為１×１０４個(gè)／ｍＬ，按每孔１０００個(gè)接種于９６孔板，每孔１００μＬ。次日加入ＭＹＲ（終濃度分別為２０，４０，６０，８０，１００，１２０，１４０ｍｇ·Ｌ－１），溶劑對照組及陽性對照組阿霉素１０ｍｇ·Ｌ－１，每孔加１００μＬ，培養(yǎng)７２ｈ，棄上清，每孔加１００μＬ的０５ｇ·Ｌ－１ＭＴＴ，繼續(xù)培養(yǎng)４ｈ，棄上清，每孔加２００μＬＤＭＳＯ溶解ＭＴＴ甲簪沉淀，用酶標(biāo)儀在參考波長４５０ｎｍ，檢測波長５７０ｎｍ?xiàng)l件下測定吸光度值Ａ，計(jì)算腫瘤細(xì)胞的抑制率。
２３ 熒光顯微鏡法觀察細(xì)胞形態(tài)［４］ 取指數(shù)生長期的人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２，調(diào)整細(xì)胞為３×１０５個(gè)／ｍＬ，于６孔板中每孔接種１ｍＬ。２４ｈ后試驗(yàn)組加入ＭＹＲ（使其終濃度分別４０，６０，８０，１００ｍｇ·Ｌ－１）；阿霉素１０ｍｇ·Ｌ－１；對照組加入同體積培養(yǎng)液。繼續(xù)培養(yǎng)７２ｈ后，ＰＢＳ洗１遍，加固定液（甲醇冰醋酸３∶１），４℃固定１０ｍｉｎ后，加入５ｍｇ·Ｌ－１的熒光探針Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８，置培養(yǎng)箱中孵育１５ｍｉｎ，取出蓋玻片，置于熒光倒置顯微鏡上觀察細(xì)胞形態(tài)。 ２４ 透射電鏡法觀察細(xì)胞狀態(tài)［５］ 收集細(xì)胞，冷ＰＢＳ洗２次，４％戊二醛固定，１５００ｒ·ｍｉｎ－１１０ｍｉｎ，加入瓊脂攪勻，冷卻后切塊，１％四氧化鋨固定，醋酸鈾和檸檬酸鉛雙重染色后，透射電鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)。 ２５ 細(xì)胞周期分布和凋亡比例檢測［６］ 取指數(shù)生長期的人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２，調(diào)整細(xì)胞為３×１０５個(gè)／ｍＬ，于６孔板中每孔接種１ｍＬ。２４ｈ后試驗(yàn)組加入ＭＹＲ（使其終濃度分別４０，６０，８０，１００ｍｇ·Ｌ－１）；阿霉素１０ｍｇ·Ｌ－１；對照組加入相同體積的培養(yǎng)液。７２ｈ后，收集作用到預(yù)定時(shí)間的ＨｅｐＧ２細(xì)胞，７０％冷乙醇４℃固定過夜。固定后的細(xì)胞用ＰＢＳ洗２遍并懸浮之，加入ＰＩ染液（終濃度為５０ｍｇ·Ｌ－１），３７℃避光溫育３０ｍｉｎ，用流式細(xì)胞儀檢測，計(jì)算出細(xì)胞周期分 布和凋亡情況，激發(fā)波長４８８ｎｍ，發(fā)射波長６３０ｎｍ。 ２６ 線粒體膜電位檢測［７］ 取指數(shù)生長期的人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２，加入適量０２５％胰蛋白酶液消化細(xì)胞，使貼壁細(xì)胞脫落。用含１０％胎牛血清的培養(yǎng)基制備成３×１０５個(gè)／ｍＬ的細(xì)胞懸液，于６孔板中每孔接種１ｍＬ。將平板置于３７℃，５％ＣＯ２培養(yǎng)箱。２４ｈ后加入ＭＹＲ（使其終濃度分別為４０，６０，８０，１００ｍｇ· Ｌ－１）；阿霉素１０ｍｇ·Ｌ－１；陰性對照組加入不含藥物相同體積的培養(yǎng)液。７２ｈ后細(xì)胞用胰酶消化，加ＰＢＳ洗２遍，分別加入終濃度１０μｍｏｌ· Ｌ－１的羅丹明１２３置于３７℃孵育３０ｍｉｎ，孵育后離心（２０００ｒ·ｍｉｎ－１，１０ｍｉｎ），用ＰＢＳ洗２次，再用３００目尼龍網(wǎng)過濾后用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞熒光強(qiáng)度，激發(fā)波長４８８ｎｍ，發(fā)射波長５２５ｎｍ。 ２７ ｃａｓｐａｓｅ３，９活力的檢測［８］ 取指數(shù)生長期的人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２，加入適量０２５％胰蛋白酶液消化細(xì)胞，使貼壁細(xì)胞脫落。用含１０％胎牛血清的培養(yǎng)基制備成密度為３×１０５個(gè)／ｍＬ的細(xì)胞懸液，于６孔板中每孔接種１ｍＬ。將平板置于３７℃，５％ＣＯ２培養(yǎng)箱。２４ｈ后不同濃度的ＲＥＳ，使其終濃度分別４０，６０，８０，１００ｍｇ· Ｌ－１；阿霉素１０ｍｇ·Ｌ－１；陰性對照組加入不含藥物相同體積的培養(yǎng)液。藥物作用７２ｈ后利用ｃａｓｐａｓｅ３，９試劑盒檢測ｃａｓｐａｓｅ３，９的活性。 ３ 結(jié)果 ３１ 楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞的生長抑制作用 結(jié)果顯示ＭＹＲ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞具有生長抑制作用并具有明顯的劑量依賴性，其ＩＣ５０值為５８.６６１７ｍｇ·Ｌ－１（表１）。
３２ 楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的影響 ＨｅｐＧ２細(xì)胞隨ＭＹＲ作用濃度的增高出現(xiàn)不同程度的凋亡改變，熒光顯微鏡下對照組細(xì)胞核形狀正常，呈圓形，染色均勻，其核內(nèi)染色體呈均勻分布；而ＭＹＲ作用ＨｅｐＧ２細(xì)胞７２ｈ后，其細(xì)胞核固縮、凝聚，出現(xiàn)濃染致密的顆粒塊熒光。透射電鏡進(jìn)一步顯示細(xì)胞部分核膜向外膨出，胞質(zhì)有大小不等的空泡，微絨毛數(shù)量減少，線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器減少（圖１，２）。 ３３ 流式細(xì)胞儀檢測ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期變化 流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示，不同濃度的ＭＹＲ（４０～１００ｍｇ·Ｌ－１）作用ＨｅｐＧ２細(xì)胞７２ｈ后可引起ＨｅｐＧ２腫瘤細(xì)胞凋亡。ＭＹＲ作用７２ｈ后，Ｇ１期細(xì)胞的比例減少，Ｓ期細(xì)胞的比例無明顯影響，Ｇ２期細(xì)胞的比例增加，表明楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞周期的Ｇ２／Ｍ期有一定的阻滯作用，并且能誘導(dǎo)其凋亡并呈明顯的劑量依賴性（表２）。
Ａ對照組；Ｂ楊梅樹皮素４０ｍｇ·Ｌ－１；Ｃ楊梅樹皮素６０ｍｇ·Ｌ－１；Ｄ楊梅樹皮素８０ｍｇ·Ｌ－１； Ｅ楊梅樹皮素１００ｍｇ·Ｌ－１；Ｆ陽性對照組。 圖１ 熒光顯微鏡觀察楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的影響 Ａ
Ａ對照組；Ｂ楊梅樹皮素６０ｍｇ·Ｌ－１；Ｃ楊梅樹皮素１００ｍｇ·Ｌ－１。 圖２ 電子透射電鏡觀察楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的影響（×６０００
３４ 楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞線粒體膜電位的影響 細(xì)胞經(jīng)羅丹明１２３染色，流式細(xì)胞儀檢測，結(jié)果顯示經(jīng)不同濃度ＭＹＲ作用后的ＨｅｐＧ２細(xì)胞與空白對照組相比（空白組的熒光強(qiáng)度為７９８％）線粒體膜電位顯著降低。各劑量組的熒光強(qiáng)度分別為５６６％，４８６％，４６６％，４２４％，陽性對照組（阿霉素１０ｍｇ·Ｌ－１）的熒光強(qiáng)度為５４７％（表３）。
３５ 楊梅樹皮素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞ｃａｓｐａｓｅ３，９活性的影響 經(jīng)不同濃度ＭＹＲ作用后的ＨｅｐＧ２細(xì)胞中ｃａｓｐａｓｅ３，９活性增加。正常情況下ｃａｓｐａｓｅ３，９活性水平較低，Ａ４０５值分別為００２５和００２０，在ＭＹＲ作用下，其活性升高，Ａ４０５分別升至為００３１，００４６，００５５，００６３和００３２，００５６，００８３，００９８，與空白對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜００５）（表４）。 ４ 討論 近年來，尋找有效的抗腫瘤天然藥物成為研究的熱點(diǎn)之一，許多文獻(xiàn)［９１０］報(bào)道楊梅素對多種腫瘤具有殺傷作用，在臨床上用于治療食管腺癌、結(jié)腸癌等多種癌癥。體外實(shí)驗(yàn)研究表明ＭＹＲ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞有明顯的抑制作用，且存在劑量效應(yīng)關(guān)系；通過光鏡、電鏡形態(tài)學(xué)觀察，可見胞體縮小，胞漿凝縮，核內(nèi)染色質(zhì)從均勻分布逐漸凝集成新月狀，附
在核周邊，密度明顯增高，界限清楚、胞膜完整、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、空泡化，表面微絨毛消失。流式細(xì)胞術(shù)是檢測細(xì)胞凋亡的一種重要方法，通過ＰＩ染色法，流式細(xì)胞儀能檢測到與ＰＩ標(biāo)記細(xì)胞ＤＮＡ結(jié)合的ＰＩ的熒光強(qiáng)度可直接反映細(xì)胞內(nèi)ＤＮＡ的含量，可以檢測目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)的ＤＮＡ含量，區(qū)分細(xì)胞周期各時(shí)相。研究顯示，隨著ＭＹＲ濃度的增加，ＨｅｐＧ２細(xì)胞的亞二倍體細(xì)胞逐漸升高，并能在一定濃度范圍內(nèi)將細(xì)胞增殖阻滯在Ｇ２／Ｍ期，表現(xiàn)出細(xì)胞周期特異性；提示ＭＹＲ能夠減慢ＨｅｐＧ２細(xì)胞分裂速度，阻止其由Ｇ２／Ｍ 期向Ｇ０／Ｇ１和Ｓ期移行，從而抑制ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖。從表２可見，人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞經(jīng)ＭＹＲ作用后，隨著ＭＹＲ濃度的增加，凋亡細(xì)胞比例也逐漸增多。 目前認(rèn)為，細(xì)胞凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與３條途徑有關(guān)，一條是線粒體途徑，由線粒體感受傷害刺激信號后釋放一系列凋亡信號分子，引發(fā)ｃａｓｐａｓｅ反應(yīng)導(dǎo)向凋亡，其中線粒體是細(xì)胞凋亡調(diào)控中心［１１］；另一條是死亡受體途徑，由死亡受體結(jié)合配體后直接激發(fā)ｃａｓｐａｓｅ級聯(lián)反應(yīng)［１２］；還有一條內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑，目前機(jī)制不甚明確，估計(jì)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)ｃａｓｐａｓｅ反應(yīng)有關(guān)［１３］。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞經(jīng)ＭＹＲ處理后，細(xì)胞內(nèi)的線粒體膜電位明顯下降，ｃａｓｐａｓｅ３和ｃａｓｐａｓｅ９活性也明顯增加。 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是抗腫瘤藥物發(fā)揮作用的重要環(huán)節(jié)。本研究結(jié)果表明ＭＹＲ能有效誘導(dǎo)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡，并可能通過線粒體途徑實(shí)現(xiàn)，為進(jìn)一步研究ＭＹＲ抗腫瘤作用的分子藥理機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。但是ＭＹＲ誘導(dǎo)ＨｅｐＧ２細(xì)胞凋亡是否還存在其他重要機(jī)制還有待于更進(jìn)一步的研究。 ［１］ �；眨勇飒敝参稂S酮抗腫瘤研究進(jìn)展［Ｊ］國外醫(yī)學(xué)·衛(wèi)生學(xué)分冊，２００６，３３（５）：２９６ ［２］�。耍铮茫龋樱瑁澹睿樱�，ＨｓｕＣＳ，ｅｔａｌＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｄｅｐｅｎｄｅｎｔ，ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｙｍｙｒｉｃｅｔｉｎ：ｒｏｌｅｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣ，ａｎｄｃａｓｐａｓｅｃａｓｃａｄｅ［Ｊ］． ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍ，２００５，６９（６）：９１３ ［３］ 劉薇，林文翰，季宇彬青龍衣毒性作用及體外抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究［Ｊ］中國中藥雜志，２００４，２９（９）：８８７ ［４］ 張小晶，劉云鵬，侯科佐，等紫杉醇誘導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞凋亡的研究［Ｊ］中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，２００６，３５（２）：１３４ ［５］ 馮驥良，溫巧蓮，何偉玲，等白藜蘆醇以Ｃａｓｐａｓｅ依賴和非依賴兩種方式導(dǎo)致Ｊｕｒｋａｔ細(xì)胞死亡［Ｊ］細(xì)胞生物學(xué)雜志，２００７，２９：１０３ ［６］ 陳立軍，靳秋月，王瑞珉，等蕓香苷誘導(dǎo)Ｋ５６２細(xì)胞凋亡機(jī)制［Ｊ］中草藥，２００６，３７（５）：７３８ ［７］ 徐開屏，孫鳳艷線粒體釋放的促凋亡蛋白和細(xì)胞凋亡［Ｊ］中國神經(jīng)科學(xué)雜志，２００２，１８（４）：７３２ ［８］ ＮｅｗｍｅｙｅｒＤ，ＦｅｒｇｕｓｏｎＭＳＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ：Ｒｅｌｅａｓｉｎｇｐｏｗｅｒｆｏｒｌｉｆｅａｎｄｕｎｌｅａｓｈｉｎｇｔｈｅｍａｃｈｉｎｅｒｉｅｓｏｆｄｅａｔｈ［Ｊ］Ｃｅｌｌ，２００３，１１２（４）：４８１ ［９］ ＫｏＣＨ，ＳｈｅｎＳＣ，ＬｅｅＴＪＦ，ｅｔａｌＭｙｒｉｃｅｔｉｎｉｎｈｉｂｉｔｓｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ２ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ［Ｊ］ＭｏｌＣａｎｃｅｒＴｈｅｒ，２００５，４（２）： ２８１ ［１０］�。冢瑁幔睿纾�，ＺｈａｏＸＨ，ＷａｎｇＺＪＦｌａｖｏｎｅｓａｎｄｆｌａｖｏｎｏｌｓｅｘｅｒｔｃｙｔｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｎａｈｕｍａｎｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅ（ＯＥ３３）ｂｙｃａｕｓｉｎｇＧ２／Ｍａｒｒｅｓｔａｎｄｉｎｄｕｃｉｎｇａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］ ＦｏｏｄＣｈｅｍＴｏｘｉｃｏｌ，２００８，４６（６）：２０４２ ［１１］�。停幔颍簦椋睿铮酰螅剩茫模澹螅幔纾瑁澹颍�，ＡｎｔｏｎｓｓｏｎＢＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅｃｒｅｌｅａｓｅｆｒｏｍｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ：Ａｌｌｏｒｎｏｔｈｉｎｇ［Ｊ］ＮａｔＣｅｌｌＢｉｏｌ，２０００，２（３）：４１ ［１２］ ＪｏｈｎｓｔｏｎｅＲＷ，ＲｕｅｆｌｉＡＡ，ＬｏｗｅＳＷＡｐｏｐｔｏｓｉｓ：Ａｌｉｎｋｂｅｔｗｅｅｎｃａｎｃｅｒｇｅｎｅｔｉｃｓａｎｄｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］Ｃｅｌｌ，２００２，１０８（２）：１５３ ［１３］�。危幔耄幔纾幔鳎幔�，ＺｈｕＨ，ＭｏｒｉｓｈｉｍａＮ，ｅｔａｌＣａｓｐａｓｅ１２ｍｅｄｉａｔｅｓｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍｓｐｅｃｉｆｉｃａｐｏｐ ｔｏｓｉｓａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｂｙ ａｍｙｆｏｉｄｂｅｔａ［Ｊ］Ｎａｔｕｒｅ，２０００，４０３（６７６５）：９８ 杜仲提取物 綠原酸 金銀花提取物 苦杏仁苷 枇杷葉提取物-熊果酸 大花紫薇提取物-科羅索酸 淫羊藿苷 二氫楊梅素 獐牙菜苦苷 楊梅素 10-羥基喜樹堿 7-乙基-10羥基喜樹堿 上禾生物 專注植提 精于高純 基于您對天然產(chǎn)物需求持續(xù)創(chuàng)新 |
