枸杞提取物藥理活性多樣 | 枸杞提取物藥理活性多樣 |
| 發(fā)布時間:2021-12-31 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):503 |
枸杞（Lycium barbarum）是一種補益類名貴中藥，屬茄科枸杞屬為多年生落葉灌木，全世界約有80余種，主要分布在南北美洲及歐亞大陸。我國枸杞約有7個種3個變種，主要分布在西北和華北的三個地區(qū)，一是甘肅的張掖一帶，產(chǎn)品稱“甘枸杞”；二是寧夏中衛(wèi)、中寧等地，產(chǎn)品稱“西枸杞”；三是天津地區(qū)，產(chǎn)品稱“津枸杞”。目前，通過人工栽培形成的枸杞林，主要為寧夏枸杞，通稱“茨圓”或“紅果子”，并以寧夏的枸杞品質(zhì)為最佳。枸杞是我國一味傳統(tǒng)常用中藥。 始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》被列為上品，謂之：“久服堅筋骨，輕身不老，耐寒暑”。枸杞子味甘、性平、歸肝、腎經(jīng)，具有滋補肝腎、益精明目、潤肺止咳、延緩衰老等功效。中國藥典中收載的枸杞子是枸杞的干燥果實，在我國枸杞不僅是傳統(tǒng)的中藥，同時也被當做一種功能性食品，還是首批被國家衛(wèi)生部列為藥食同源的植物資源，被廣泛地作為保健佳品，用于人們的日常生活中，如作為茶飲的配料、燉湯熬粥的調(diào)料和糕點裝飾等。此外，枸杞不僅果實可入藥，其葉子和根皮等部位都可作為中藥。據(jù) 2010 年版的《中華人民共和國藥典》記錄：干燥成熟的寧夏枸杞（Lycium barbarum L.）果實枸杞子為藥典品種，干燥的寧夏枸杞根皮地骨皮（Lycii Cortex）也為藥典品種。藥圣李時珍編撰的《本草綱目》中就有所記載，枸杞具有滋肝潤腎、益精明目等功效。生物堿類，黃酮類，萜類等化合物，此外，多糖及類胡蘿卜衍生物也是枸杞提取物中常見的成分�，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)枸杞具有多種活性，包括抗氧化、抗腫瘤、抗炎、肝保護、神經(jīng)保護、抗微生物及輻射保護活性等等。根據(jù)近幾年的研究，枸杞的化學成分與基本得到闡明，其主要活性成分是脂多糖LBP。作為一味傳統(tǒng)常用中藥，枸杞具有多種功能，隨著藥理學研究的不斷深入，特別是枸杞的免疫增強作用，仍有待于進一步研究，為枸杞資源的深層次開發(fā)提供有利的科學依據(jù)。 【成分】[1] 國內(nèi)外學者從枸杞中分離得到的成分主要包含生物堿類、黃酮類、類胡蘿卜類，此外還含有少量木脂素。 1. 生物堿類：枸杞提取物中富含生物堿，且生物堿在枸杞果實、根皮中均有分布，種類多樣，包含托品類，吡咯衍生物，酰胺類生物堿等。 1）托品類生物堿：①打碗花精類：打碗花精是一類降莨菪堿類化合物，此類成分主要存在于一些可食用的蔬菜植物中。1997 年從枸杞( L. chinese M. ) 的根中發(fā)現(xiàn)了這類化合物。②托品類生物堿：此類生物堿主要分布在茄科莨菪屬植物，枸杞屬植物也發(fā)現(xiàn)了這類化合物。托品類生物堿在枸杞中的含量不超過 19ppb，遠遠低于致毒含量。 2）哌啶類生物堿： 此類生物堿為六元環(huán)胺，環(huán)上多含羥基。在分離降莨菪堿時分到兩個哌啶堿： 3）吡咯類生物堿：此類生物堿主要分布在枸杞果實中，具有肝保護活性。其中有兩個化合物的肝保護活性與水飛薊賓相近。 4）咪唑類生物堿：這類化合物以香豆酰組胺為主，1990年阿根廷人從當?shù)禺a(chǎn) Lyciumcestroides 中首次分離得到 4個此類成分： 5） 咔啉類生物堿：此類化合物在枸杞中不常見，L. chinese 根皮分到三種此類化合物： 6） 酰胺類生物堿：酰胺類生物堿是枸杞中研究最多、數(shù)量最多的一類生物堿。這類化合物抗氧化活性顯著。 7）精胺類生物堿：日本人最早從 L. chinese 的根皮中分出這類化合物; 8）其它類生物堿： 此外，從枸杞屬植物中還分離到其它生物堿，如甜菜堿;其中，甜菜堿被中國藥典載入作為判斷枸杞質(zhì)量標準。 2. 腦苷脂：此類化合物結構中含有一個糖端基，兩個長鏈烷基以及一組酰胺鍵。共有 2 個腦苷脂化合物從枸杞中分離得到，藥理實驗表明這兩個化合物具有肝保護活性。 3. 多肽：從 L. chinese 的根皮中分到四個環(huán)肽類化合物。 4. 黃酮類：黃酮類是枸杞中抗氧化主要成分，枸杞中黃酮苷主要以山柰酚和槲皮素為母核。在葉、果實中都有分布，枸杞葉中含量比較多。此外，在黑果枸杞果實中，花青素含量豐富 。 1）黃酮及其苷類：3 個黃酮、3 個黃酮醇和兩個黃酮苷從 L. chinese 或 L. barbarum 的葉、果實中分離得到。 2）花青素及其苷類：從 L. ruthenicum 中共分離到 3 種花青素，2 種花青素苷。 5. 苯丙素類：酚酸類和香豆素類是這一類的主要成分，并且在枸杞中含量較高。木脂素 Lyciumin從 L. chinese 中分到并被確定了其立體結構; 6. 類胡蘿卜素及其衍生物：此類化合物主要存在于L. chinese 與 L. barbarum 的成熟果實中，母核主要為 β-胡蘿卜素、玉米黃素、葉黃素、β-隱黃素。 【藥理活性】[1] 現(xiàn)代藥理研究表明枸杞提取物藥理活性多樣，主要包括抗氧化、肝保護、神經(jīng)保護、抗腫瘤、抗炎等活性。 1. 抗氧化活性 用活性自由基清除實驗發(fā)現(xiàn)枸杞葉抗氧化活性強于比果實。用HPLC 法考察石油醚、乙酸乙酯、甲醇、正丁醇和水不同溶劑的枸杞提取物中總酚含量，分別測試抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)抗氧化能力主要與其總酚含量相關。提取物及部位抗氧化效果顯著，人們進一步探討了枸杞中抗氧化活性的物質(zhì)基礎。從枸杞提取物中制備出寡糖，發(fā)現(xiàn)枸杞寡糖清除自由基的效果顯著強于陽性對照品Vc。枸杞提取物中新化合物 lyci-umamides A、B、C 以及香豆酰酪氨，咖啡酰酪氨有很強的DP-PH 清除和抑制脂質(zhì)過氧化的能力。 2. 肝保護活性 用撲熱息痛造肝炎大鼠模型測試枸杞肝保護活性。結果表明提前灌喂枸杞提取物組的大鼠，其血清中的天冬氨酸轉氨酶，丙氨酸轉氨酶，氧化應激指數(shù)明顯下降，枸杞提取物還明顯改善撲熱息痛引起肝組織Ⅰ期、Ⅲ期損傷。除了對于撲熱息痛引起的肝損傷有改善作用，對于 CCl4引起的肝損傷，枸杞提取物也有很好的保護作用。CCl4致肝損傷老鼠用枸杞提取液灌輸預先治療，結果發(fā)現(xiàn)枸杞提取液明顯降低了CCl4致傷老鼠血清中的AST 和 ALT 水平，并使得抗氧化酶水平得到恢復。同時抑制了誘導型一氧化氮合酶和環(huán)氧合酶1 ，2等炎癥介質(zhì)的釋放。組織病理學檢測也同樣證明了枸杞提取物肝保護作用。 3. 神經(jīng)保護活性 對阻斷老鼠視神經(jīng)研究枸杞粗多糖（LBP對視神經(jīng)節(jié)保護作用。結果發(fā)現(xiàn)，枸杞多糖可以延緩繼發(fā)性損傷，而繼發(fā)性損傷與青光眼有密切關系。對大腦缺血再灌注損傷模型小鼠注射 LBP，發(fā)現(xiàn) LBP 可以顯著降低神經(jīng)功能缺損程度，減少小鼠梗塞區(qū)域。另外，LBP 顯著降低了 MDA 含量并增強了 SOD，GSH-Px，CAT，LDH 的活性。提示 LBP 通過抑制脂質(zhì)過氧化、清除自由基來保護腦神經(jīng)。此外進一步研究發(fā)現(xiàn) LBP 抑制了 Bax，Cyt C，半胱天冬酶-39和斷裂 PARP-1 的過度表達并使 Bcl-1 表達降低。說明 LBP神經(jīng)保護作用是通過抑制神經(jīng)元線粒體凋亡通路來實現(xiàn)。 4. 輻射傷害保護活性 研究發(fā)現(xiàn)枸杞提取物對于被X-ray 射線輻射損傷的小鼠，灌喂黑果枸杞LBP可以增加總紅細胞、血紅蛋白和核酸含量，恢復脾臟指數(shù)。高劑量枸杞根提取物效果更佳，當劑量達到 500mg/kg時，白細胞、紅細胞、血小板含量明顯增加，說明與造血干細胞再生相關。 5. 抗微生物活性 用瓊脂糖擴散實驗法研究了枸杞提取物的抗微生物活性，結果發(fā)現(xiàn)中華枸杞葉要比寧夏枸杞葉抑菌活性要好，其 MIC 值在 50～100μg/mL之間，而枸杞花的抗菌活性要弱于葉的提取物，MIC 值在≥100μg/mL。從枸杞根皮中分離得到(+) -Lyoniresinol-3-O-β-葡萄糖苷，測試其抑制耐甲氧西林金黃色釀膿葡萄球菌的活性。其對真菌C. albicans、S. cerevisae 和 T. beigelii 的 MIC 值在 5～10μg/mL之間，可作為潛在的抗真菌藥物。 6. 抗腫瘤活性 研究了枸杞多糖對多種癌細胞的抗癌效果。結果表明枸杞多糖LBP分別在 G0/G1 和 S 細胞周期阻滯胃癌細胞 MGC-803、SGC-7901生長。LBP 對結腸癌細胞的抑制作用呈劑量依賴性，當濃度在 400～1000mg/L時，LBP 顯著抑制 SW480 細胞的生長，200～1000mg/L時，LBP 顯著抑制 Caco-2 細胞的增長。枸杞多糖抑制胰島素樣生長因子的聚集以及磷脂酰肌醇 3-激酶、磷酸化的磷脂酰肌醇 3-激酶的活性，抑制缺氧因子-1的聚集和 VEGF mRNA、蛋白的表達。提示 LBPs 通過血管新生突進抑制乳腺癌細胞 MCF-7 的生長和增殖。 7. 抗炎活性 上世紀末就發(fā)現(xiàn)枸杞果實，根，地上部分水提物可以減輕角叉萊膠引起的小鼠爪子水腫現(xiàn)象。2010 年 發(fā)現(xiàn)枸杞提取物（LFWE）在脂多糖致炎的 RAW264. 7 巨噬細胞中，抑制了 NO含量及誘導型 NO 合酶的活性，以及腫瘤壞死因子 α·5·(TNF-α) 轉移。更為重要的是他們發(fā)現(xiàn)了枸杞提取物抑制了核內(nèi)核因子-kappa B(NF-κB) 的活性。提示 LFWE 是通過下調(diào) NF-κB 的結合活性抑制 i NOS 活性達到抗炎目的。 8 其它作用 枸杞子中含anyiotemsin轉化酶抑制劑，可用于治療高血壓。枸杞子浸出液對金黃色葡萄球菌等17種細菌有較強的抑菌作用，具有對鉛免疫毒性的拮抗作用。有報道枸杞具有抗輻射作用。 【生產(chǎn)工藝】[4] 1. 枸杞多糖 1）溶劑提取法 溶劑提取法一般遵循相似相溶原則，多糖是極性大分子化合物，一般采用熱水、酸或堿等作為溶劑。熱水浸提法是提取多糖的傳統(tǒng)方法，在多糖提取中應用最為廣泛，在進行浸提之前，首先要對枸杞進行脫脂處理，通常采用一定比例的氯仿-甲醇溶液回流脫脂。 2）超聲波、微波輔助提取法 超聲波、微波技術是近年來廣泛應用于植物有效成分提取的方法。采用超聲波輔助萃取主要是利用超聲波的空化作用及其次級效應（如機械振動、乳化、擴散、擊碎、化學效應等），可以在動植物細胞周圍形成微流，在細胞內(nèi)形成胞內(nèi)環(huán)流，從而使細胞受到嚴重的損壞，提高細胞膜和細壁的通透性，以此達到加快細胞釋放多糖速度、縮短提取時間、提高多糖提取率的目的。微波輔助多糖萃取，是在枸杞樣品進行熱水浸提之前先用微波進行預處理，相比傳統(tǒng)水提方法，該方法具有快速、高效、有效成分得率高、節(jié)能等眾多優(yōu)點。 3）酶提取法 酶提取技術是近年來廣泛應用到植物有效成分提取中的一項生物技術，在有效成分的提取過程中，使用酶可降低提取條件，在比較溫和的條件中分解植物組織，加速有效成分的釋放或提取。應用較多的有纖維素酶、半纖維素酶等。 4）超臨界 CO2提取、水溶提取、電滲析、超濾、反滲透、冷凍升華干燥等工藝生產(chǎn)枸杞多糖，產(chǎn)品純度高，無污染，可溶性好，生物活性高。 5）發(fā)酵輔助提取法 發(fā)酵技術可用于提高天然產(chǎn)物化學有效成分的提取率，目前，采用發(fā)酵法進行枸杞多糖的提取主要以酵母菌作為發(fā)酵菌株，在枸杞浸泡液中添加酵母菌，利用酵母菌的生長消耗浸提液中的單糖、雙糖等寡糖，從而提高枸杞多糖的得率及純度。此外，有研究人員采用綜合提取法，即利用超臨界 CO2萃取技術、酶提取技術，以及超濾及反滲透技術提取枸杞多糖的研究，多糖提取率可高達60%~78%。 2. 類胡蘿卜素 1）有機溶劑浸提法 類胡蘿卜素是一類具有多不飽和雙鍵的烴類或它們的含氧衍生物。有機溶劑提取類胡蘿卜素是最常用的提取方法。在有機溶劑提取方法中，原料的特性、所含類胡蘿卜素的性質(zhì)以及不同的試劑組合對提取的效果均有不同的影響。 2）微波提取法 利用有機溶劑微波萃取枸杞子中的色素進行初步探索，試驗結果表明，浸提率可達 89.5 %。微波法萃取枸杞色素具有加熱速度快、受熱體系溫度均勻、節(jié)約能量等優(yōu)點。 3）超聲波提取法 對超聲浸提枸杞中的類胡蘿卜素的方法進行了優(yōu)化，得到了最適提取條件，即以石油醚∶丙酮溶液（4∶1，體積比）為提取溶劑，提取時間 30min，料液比 1∶15（g∶mL），粒度小于 40 目，其提取率最高。 4）超臨界流體萃取法 采用超臨界 CO2萃取技術，以枸杞籽油為載體，提取率達到 51.5 %，萃取物中 β-胡蘿卜素含量達到 64 %。提取的 β-胡蘿卜素可做藥物原料。 3. 甜菜堿 利用甜菜堿的理化性質(zhì)，提取方法大多可概括為水提和醇提兩種，即溶于水或甲醇、乙醇溶劑。甜菜堿的溶解性很好，在乙醇溶液中，平均提取率為99.8 %，且與乙醇的濃度無關，在不同濃度的乙醇溶液中均有良好的貯藏穩(wěn)定性。但由于不同物質(zhì)含有的其他成分各不相同，故對水和醇的選擇各不相同，醇濃度也有所不同。人們大多選擇 95 %的乙醇作為提取溶劑。 【參考文獻】 [1] 侯學謙, 祝婉芳, 曲瑋, 等. 枸杞化學成分及藥理活性研究進展[J]. 海峽藥學, 2016, 28(8): 1-7. [2] 周晶, 李光華. 枸杞的化學成分與藥理作用研究綜述[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學學報, 2009, 11(6): 93-95. [3] 枸杞活性物質(zhì)提取及其生物活性研究 [4] 周艷華, 李濤, 覃世民, 等. 枸杞活性成分提取分離方法研究進展[J]. 食品研究與開發(fā), 2014, 35(24): 163-166.
|
