如何高效測定熱毒平顆粒中綠原酸的含量 | 如何高效測定熱毒平顆粒中綠原酸的含量 |
| 發(fā)布時間:2011-11-21 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):2384 |
采用高效液相色譜(HPLC)法測定該制劑中綠原酸的含量,方法簡便、快速,可用于熱毒平顆粒的質(zhì)量控制。熱毒平顆粒由金銀花、生石膏、玄參、地黃等中藥制成,具有清熱解毒之功效,用于治療流感、上呼吸道感染及各種發(fā)熱等癥。綠原酸為該制劑主藥金銀花的主要有效成分,具有明顯的抗炎、殺菌、抗病毒的作用。 關(guān)鍵詞：綠原酸金銀花提取物 熱毒平顆粒 綠原酸的含量 金銀花綠原酸 1 儀器與試藥 SP8800高效液相色譜儀(美國光譜物理公司)；分析之星色譜工作站；紫外FOCUS檢測器。綠原酸對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號110753-200413)；熱毒平顆粒(天津中新藥業(yè)隆順榕制藥廠,批號0602001、0602002、0602003)。乙腈為色譜純,磷酸為分析純,水為純凈水。 2 方法與結(jié)果 2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 色譜柱：YMC公司ODS-A柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)；流動相：乙腈-0.2%磷酸水溶液(10∶90)；流速：1.0 mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：327 nm；進樣量：10 μL。理論板數(shù)按綠原酸峰計應(yīng)不低于3 000,分離度＞1.5。色譜圖見圖1。 2.2 溶液的制備 2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品4.24 mg,置于50 mL量瓶中,加50%甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,配成濃度為0.084 8 mg/mL的對照品儲備溶液,10 ℃以下保存。再精密量取4 mL置10 mL量瓶中,加50%甲醇溶解并稀釋至刻度,制成含綠原酸0.033 9 mg/mL的對照品溶液。 2.2.2 供試品溶液的制備 2.2.3 陰性對照溶液的制備 按處方取除金銀花的各味藥材,按制法制得樣品,再按“2.2.2”項下方法,制得陰性對照溶液。 2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密吸取綠原酸濃度為0.084 8 mg/mL的對照品儲備溶液1、2、4、8、10 mL,置10 mL量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,在上述色譜條件下測定,以峰面積對濃度進行線性回歸,得回歸方程為：Y＝55 799 416X－28 478.3(r＝0.999 9)。結(jié)果表明,綠原酸檢測濃度在0.084 8～0.848 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。 2.4 精密度試驗 精密吸取對照品溶液10 μL,按上述色譜條件重復(fù)進樣6次,測定峰面積。結(jié)果RSD＝0.52%,表明本方法精密度良好。 2.5 穩(wěn)定性試驗 取同一批號(0602001)樣品,按照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件分別在0、1、2、4、6、8 h進樣,測定綠原酸峰面積。結(jié)果RSD＝0.64%,表明供試品溶液在8 h之內(nèi)穩(wěn)定。 2.6 重復(fù)性試驗 取同一批號(0602001)樣品精密稱取0.5 g,共6份,按照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件測定每份樣品中綠原酸含量。結(jié)果綠原酸的平均含量為1.190 mg/g, RSD＝0.88%,表明方法重復(fù)性良好。 2.7 加樣回收率試驗 精密稱取綠原酸對照品適量,配制成0.012 4 mg/mL的對照品儲備溶液,取同一批號(0602001)樣品,研細(xì),混勻,取0.25 g,精密稱定,共6份,精密加入綠原酸對照品儲備溶液各25 mL,按照“2.2.2”項下方法制得供回收率用供試品溶液,按上述色譜條件測定,計算回收率。結(jié)果平均回收率為102.60%, RSD＝1.69%。結(jié)果見表1。表1 加樣回收率試驗結(jié)果(略) 2.8 樣品含量測定 取本品3批,按照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件進行測定,結(jié)果見表2。表2 樣品中綠原酸含量測定結(jié)果(略) 3 討論 取綠原酸對照品的甲醇溶液,在190～650 nm波長范圍進行掃描,在327 nm波長處有較大吸收,與2005年版《中華人民共和國藥典》中金銀花的測定波長一致,故測定波長選定為327 nm。 |
