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方法名稱：

 六味地黃丸—丹皮酚的測定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

   本方法采用高效液相色譜法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。

    本方法適用于中成藥六味地黃丸。

方法原理：

本品加50%甲醇超聲處理，放冷，補重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處檢測丹皮酚的吸收值，計算出其含量。

試劑：

甲醇

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按丹皮酚峰計算應(yīng)不低于3500。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇+水=70+30

2.2檢測波長：274nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取約0.3g，精密稱定；或取重量差異項下的大蜜丸，剪碎，取約0.4g，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取丹皮酚對照品適量，加甲醇制成每1mL含20mg溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

操作步驟：

  分別精密吸取對照品溶液10mL和供試品溶液20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長274nm處測定丹皮酚（C₉H₁₀O₃）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p401。