999国内精品视频免费_国产真人作爱免费视頻_口口亚洲国产综合Av_99Re国产精品视频

苦杏仁苷是傳統(tǒng)中藥苦杏仁中的有效成分，人們對(duì)它的研究已有近200年的歷史，早在1803年Schrader在研究苦杏仁成分時(shí)就發(fā)現(xiàn)了此類物質(zhì)，直到1830年Robiquet等從中分離出苦杏仁苷，迄今它已成為醫(yī)藥上常用的祛痰止咳劑、輔助性抗癌藥物，苦杏仁苷廣泛存在于杏、桃、李子、蘋果、山楂等多種薔薇科植物果實(shí)的種子中，尤其在苦杏仁中含量較多，大約在2%～3%�？嘈尤受辗肿佑�1單元苯甲醛、1單元?dú)淝杷岷?單元葡萄糖組成，分子式為C₂₀H₂₇NO₁₁。

1   苦杏仁苷的藥理學(xué)研究進(jìn)展

1.1  鎮(zhèn)咳平喘作用 苦杏仁苷內(nèi)服后，可在體內(nèi)分解為氫氰酸和苯甲醛，氫氰酸對(duì)呼吸中樞可產(chǎn)生一定的抑制作用，使呼吸運(yùn)動(dòng)趨于安靜而達(dá)到鎮(zhèn)咳平喘的作用�？嘈尤受諏�(duì)油酸型呼吸窘迫癥動(dòng)物可促進(jìn)肺表面活性物質(zhì)的合成，并使病變得到改善。

1.2  抗腫瘤作用 苦杏仁苷具有良好的抗腫瘤作用，被用作治療癌癥的輔助藥物。將苦杏仁苷制劑用于晚期癌癥患者的治療，可使癥狀改善，存活期延長(zhǎng)。將苦杏仁苷用于癌性胸水的治療，發(fā)現(xiàn)苦杏仁苷對(duì)癌性胸水有一定程度的控制和緩解作用。將苦杏仁苷按300mg·kg^-1，400 mg·kg^-1，600 mg·kg^-1劑量給移植性肝癌小鼠腹腔注射10～14d，其肝癌治愈率分別為72%，60.8%，61%。移植性肝癌小鼠肝臟微粒體細(xì)胞色素P-450含量比正常小鼠顯著下降。當(dāng)苦杏仁苷給藥10d，腫瘤生長(zhǎng)被抑制的小鼠P-450含量達(dá)到正常水平。苦杏仁苷對(duì)子宮頸癌JJC26株的抑制率為50%～70%�？嘈尤受占捌渌�解所產(chǎn)生的氫氰酸和苯甲醛體外測(cè)試均被證明有抗癌作用，癌細(xì)胞內(nèi)硫氫化酶較正常細(xì)胞少，因此對(duì)苦杏仁苷水解釋放出氫氰酸的解毒能力較差，苦杏仁苷加苯甲醛或苦杏仁苷加β-葡糖苷酶可明顯提高抗癌效力，已發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞無(wú)氧酵解占優(yōu)勢(shì)，其產(chǎn)物乳酸形成的偏酸性環(huán)境有利于提高β-葡糖苷酶的活性，促使苦杏仁苷在癌細(xì)胞中水解出較多的氫氰酸和苯甲醛而發(fā)揮更強(qiáng)的抗癌作用。

1.3  對(duì)消化系統(tǒng)的影響 苦杏仁苷在經(jīng)酶作用分解形成氫氰酸的同時(shí)，也產(chǎn)生苯甲醛，后者可抑制胃蛋白酶的活性，從而影響消化功能。杏仁水溶性部分的胃蛋白酶水解產(chǎn)物以500mg·kg^-1的劑量對(duì)四氯化碳處理的大鼠給藥，發(fā)現(xiàn)它能抑制AST、ALT水平和羥脯氨酸含量的升高，并抑制優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間的延長(zhǎng)。在病理學(xué)上，杏仁水溶部分的胃蛋白酶水解產(chǎn)物能抑制鼠肝結(jié)締組織的增生，但不能抑制D-半乳糖氨引起的鼠AST、ALT水平升高。

1.4  其他作用 苦杏仁苷可特異性地抑制阿脲所致血糖升高，作用強(qiáng)度與血液中苦杏仁苷濃度有關(guān)�？嘈尤受者�具有抗凝血作用。小鼠熱板法和醋酸扭體法證實(shí)苦杏仁苷有鎮(zhèn)痛作用且無(wú)耐受性；小鼠給予苦杏仁苷后無(wú)豎尾反應(yīng)和烯丙嗎啡誘發(fā)的跳躍反應(yīng)�？嘈尤受�15mg·只^-1，35 mg·只^-1給小鼠肌注，可明顯促進(jìn)有絲分裂原對(duì)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的增殖。將大鼠鼠腦右額顳葉快速冰凍切片進(jìn)行細(xì)胞色素氧化酶孵育染色，染色系統(tǒng)通過(guò)顯微電視圖像測(cè)量系統(tǒng)觀察，數(shù)據(jù)經(jīng)微機(jī)處理，結(jié)果表明苦杏仁苷有明顯提高腦缺血狀態(tài)下細(xì)胞色素氧化酶活性的作用。苦杏仁苷在最佳濃度范圍和作用時(shí)間內(nèi)能提高人腎成纖維細(xì)胞（KFB）分泌的I型膠原酶活性的作用，抑制人腎KFB增值和I型膠原的表達(dá)，促使人腎KFB凋亡�？嘈尤受张c冬蟲夏草聯(lián)合作用與體外原代單層培養(yǎng)得大鼠纖維肝肝細(xì)胞，用ELISA方法監(jiān)測(cè)表明苦杏仁苷與冬蟲夏草具有明顯提高大鼠纖維肝肝細(xì)胞合成分泌白蛋白的作用。以99Mtc-植酸鈉注入小鼠或肝組織印片Ag-NOR法觀察苦杏仁苷對(duì)小鼠肝細(xì)胞吞噬功能或rDNA活化作用的影響，結(jié)果表明苦杏仁苷對(duì)其吞噬功能及rDNA的活化均有非常明顯的促進(jìn)作用。

1.5  毒性 苦杏仁苷的急性毒性試驗(yàn)LD₅₀小鼠靜脈注射為25g·kg^-1；大鼠靜脈注射為25g·kg^-1，腹腔注射為8g·kg^-1。最大耐受量：小鼠兔犬靜注和肌注均為3g·kg^-1，口服均為0.075g·kg^-1。人靜脈注射為5g（約0.07g·kg^-1）。小鼠按500mg·kg^-1靜注10只，均未死亡，而以同樣劑量灌胃給藥，則10只死亡8只。口服給藥的毒性所以大于靜脈給藥，研究證明主要是由于苦杏仁苷被腸道微生物水解產(chǎn)生較多的氫氰酸所致，如果處理小鼠使其腸道內(nèi)微生物抑制，則胃腸給藥300mg·kg^-1未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，如未經(jīng)處理，則相同劑量死亡率為60%。人口服B₁₇（苦杏仁苷）每日4g，持續(xù)半個(gè)月或靜脈注射一個(gè)月可見毒性反應(yīng)，以消化系統(tǒng)較為多見，此外還表現(xiàn)為心電圖T波改變、房性早博，停藥后以上毒性反應(yīng)均可消失。如果劑量減為每日口服0.6～1g，則可避免毒性。

2   苦杏仁苷分析方法進(jìn)展

2.1  間接法：間接法的原理是通過(guò)水解或酶解把苦杏仁苷分解為苯甲醛、氫氰酸和葡萄糖，然后再測(cè)定相應(yīng)分解物的含量來(lái)間接分析苦杏仁苷。間接法包括中國(guó)藥典法、化學(xué)發(fā)光法、電化學(xué)分析法等。

2.1.1中國(guó)藥典法（即銀量法）：使苦杏仁苷酶解產(chǎn)生氫氰酸，通水蒸氣蒸餾，溜出液導(dǎo)入氨試液中，用硝酸銀滴定液滴定吸收了氫氰酸的氨試液，從而測(cè)定苦杏仁苷的分析方法。

2.1.2化學(xué)發(fā)光法：化學(xué)發(fā)光是一種具有極高靈敏度和良好選擇性的微量及痕量分析技術(shù)。宋正華、章竹君把流動(dòng)注射分析技術(shù)和化學(xué)發(fā)光法結(jié)合起來(lái)，設(shè)計(jì)了苦杏仁苷化學(xué)發(fā)光傳感器，這種新型生物傳感器的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與苦杏仁苷量在1～200μg之間成良好線性關(guān)系，具有良好選擇性。

2.1.3 電化學(xué)分析方法：是使用一種或多種對(duì)苦杏仁苷具有水解活性的酶處理被分析物，從而產(chǎn)生氰根離子再用電極測(cè)定氰根離子濃度分析苦杏仁苷的方法。由于這種方法在測(cè)量微量痕量苦杏仁苷具有明顯的優(yōu)勢(shì)，而且易于分析測(cè)定工作自動(dòng)化，近些年來(lái)發(fā)展迅速，出現(xiàn)了多種苦杏仁苷生物傳感器：Tatsuma等發(fā)展了一種基于干擾信號(hào)檢測(cè)的苦杏仁苷生物傳感器，這種傳感器將辣根過(guò)氧酶（HRP）和β-葡糖苷酶固定在熱解石墨上，通過(guò)測(cè)定由于積累過(guò)氧化氫造成的氰根陰極電流的抑制作用來(lái)測(cè)定苦杏仁苷的含量。Merkoci，A設(shè)計(jì)了把β-葡糖苷酶同銀鹽混合物固定于生物膜上的生物傳感器。上述傳感器在各自相應(yīng)的測(cè)量范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.2  直接法

2.2.1薄層掃描法：薄層掃描法是一種簡(jiǎn)捷快速的分析方法，靈敏度較高，可直接測(cè)定植物種子中的苦杏仁苷含量。

2.2.2高效液相色譜法：高效液相色譜法分離效率高，分析速度快，現(xiàn)已成為有機(jī)物定性定量分析研究的主要方法。Kimerly Wasserkrug，Ziad Elpassi用硅柱反相高效液相色譜儀檢測(cè)并分離了苦杏仁苷，并比較了用脈沖電流檢測(cè)器與紫外吸收檢測(cè)器檢測(cè)之間的不同。Seong Ho kang等用高效液相色譜和質(zhì)譜鑒定了苦杏仁苷和它的異構(gòu)體。

2.2.3紫外分光光度法：分光光度法是分析化學(xué)中普遍應(yīng)用的一種方法，這種方法具有快速靈敏準(zhǔn)確的特點(diǎn)，所用儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，造價(jià)低廉，使用方便，適宜作為常規(guī)分析的工具。

2.2.4毛細(xì)管膠束電泳色譜：毛細(xì)管電泳色譜是近年來(lái)發(fā)展最快的分析分離方法，它是經(jīng)典電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的產(chǎn)物，具有高靈敏度、高分辨率、高速度、樣品用量少、成本低等特點(diǎn)。由于苦杏仁苷是水溶性物質(zhì)，用毛細(xì)管膠束電泳色譜[MEKC]分離苦杏仁苷效果極佳。Seong Ho Kang等采用毛細(xì)管膠束電泳色譜成功地分析了苦杏仁苷和它的異構(gòu)體，并用高效液相色譜、紫外分光光度計(jì)和質(zhì)譜進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果一致。C.Campa等用毛細(xì)管膠束電泳色譜研究了不同pH值、不同時(shí)間苦杏仁苷的水解情況。Isozaki，Takafumi等用環(huán)糊精修飾的毛細(xì)管膠束電泳色譜分離測(cè)定了苦杏仁苷及其異構(gòu)體。

2.2.5 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)：色譜法作為一種大有所為的近代分離技術(shù)普遍應(yīng)用于有機(jī)化合物的分離分析中，質(zhì)譜儀靈敏度高，特征性強(qiáng)，要求分析樣品必須是高度純凈物。色譜技術(shù)為質(zhì)譜分析提供色譜純的式樣，質(zhì)譜為色譜儀提供準(zhǔn)確的結(jié)構(gòu)信息，彼此之間的依賴性促成了色譜/質(zhì)譜的聯(lián)用。David Chassage等用氣相色譜/電子轟擊質(zhì)譜[GC/EI-MS]和氣相色譜/負(fù)離子化學(xué)離解質(zhì)譜[GC/NCI-MS]聯(lián)用從多種水果中分離分析了苦杏仁苷。

3   苦杏仁苷分離提取研究進(jìn)展

提取苦杏仁苷可采用80%乙醇或加水煮沸數(shù)分鐘，殘?jiān)�加水用石油醚或氯仿提取除去脂溶性成分，亦可用乙酸乙脂等溶劑進(jìn)行液液分配萃取或用甲醇與乙酸乙脂恒沸混合溶劑提取，這樣可避免大量極性化合物如糖、氨基酸、肽類成分溶出；或?qū)⑺�得水液先用醋酸鉛、聚酰胺或混合型離子樹脂等進(jìn)行預(yù)處理，除去其中酸性、酚性及離子性化合物，經(jīng)處理后的水液減壓濃縮，再用柱層析進(jìn)行分離純化，其填料一般是硅膠、硅藻土、硅酸鎂、活性炭、纖維素或彼此聯(lián)合使用。由于苦杏仁苷在冷乙醇中的溶解度很小，在熱乙醇中的溶解度很大，所以亦可采用乙醇做結(jié)晶溶劑提取苦杏仁苷，原料經(jīng)過(guò)預(yù)處理和壓榨，用95%的乙醇浸提2次后進(jìn)行脫脂處理，得到脫脂粕，脫脂粕經(jīng)過(guò)粉碎后，用沸醇回流裝置進(jìn)行萃取，經(jīng)結(jié)晶、重結(jié)晶和純化，便可得到苦杏仁苷。蘇碧茹等用正交實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行了苦杏仁成分提取工藝的優(yōu)選研究，他們選取溶媒濃度、溶媒量、提取時(shí)間、提取次數(shù)為試驗(yàn)因素，得出最佳工藝條件為95%乙醇提取兩次，每次1h，6倍量乙醇為最佳工藝，由此工藝制得苦杏仁霜。

4   小結(jié)