杜仲提取物對(duì)肉仔雞免疫器官發(fā)育影響的組織學(xué)觀察 | 杜仲提取物對(duì)肉仔雞免疫器官發(fā)育影響的組織學(xué)觀察 |
| 發(fā)布時(shí)間:2013-03-01 信息來(lái)源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):2500 |
摘 要：在飼喂基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上，在肉用仔雞飲用水中添加0、1.25%、2.5%和5%的杜仲提取物，通過(guò)觀察1、2、3、4、5、6周肉仔雞法氏囊、胸腺和脾臟發(fā)育的組織學(xué)情況，來(lái)研究杜仲的生物學(xué)功能，旨在為杜仲提取物作為飼料添加劑提供理論依據(jù)。結(jié)果表明，添加2.5%、5%杜仲提取物試驗(yàn)組中胸腺小葉、脾小結(jié)和法氏囊小結(jié)發(fā)育程度與對(duì)照組相比均發(fā)生顯著性變化，因而從組織學(xué)角度進(jìn)一步表明了杜仲能夠不同程度地促進(jìn)免疫器官的發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答能力，從而提高了機(jī)體的抵抗力。 關(guān)鍵詞：杜仲；免疫器官；組織學(xué)；肉仔雞 兩千多年來(lái)，杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)一直是我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥推崇的常用中藥之一。自從20世紀(jì)80年代中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所嚴(yán)瑞芳等在國(guó)際上首次成功地將杜仲膠硫化成高彈性橡膠后，便帶來(lái)了杜仲的三級(jí)開(kāi)發(fā)[1-3]。首先是利用杜仲葉生產(chǎn)杜仲粉用于加工保健品，如福建農(nóng)業(yè)大學(xué)生產(chǎn)的烏龍保健茶、貴陽(yáng)老來(lái)福公司研制的杜仲?zèng)_劑等一系列杜仲保健食品等；其次利用杜仲渣提取杜仲膠，使杜仲膠的研究邁入“杜仲材料工程學(xué)”的新階段；最后是利用杜仲渣生產(chǎn)裝飾材料[1-5]。由于杜仲的用途廣泛，早已被日本、前蘇聯(lián)等引進(jìn)并大量種植和開(kāi)發(fā)研究，其中以日本、韓國(guó)和前蘇聯(lián)的研究和應(yīng)用水平最具代表性[5-10]。日本歷來(lái)對(duì)杜仲的研究開(kāi)發(fā)工作非常重視，1993年以來(lái)便集中研究杜仲的藥效藥理，目前已經(jīng)測(cè)定了杜仲的營(yíng)養(yǎng)成分，并進(jìn)入按成分含量多少進(jìn)行排序與單一成分的分離及各成分的生理活性的分析研究階段；前蘇聯(lián)和韓國(guó)也開(kāi)展了一系列的研究，并取得了較好的研究進(jìn)展。
杜仲是杜仲科、杜仲屬的多年生落葉喬木植物，經(jīng)中外醫(yī)藥學(xué)研究證實(shí)，杜仲葉、皮均含氯原酸、環(huán)烯醚萜類(lèi)、木脂素等藥理成分。杜仲具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、抗老防衰、抗菌消炎、免疫調(diào)節(jié)和雙向調(diào)節(jié)人體血壓、消除血液循環(huán)障礙等功效[1-5]。因此，本試驗(yàn)通過(guò)在肉仔雞的飲水中添加不同濃度的杜仲提取物，通過(guò)組織學(xué)觀察探討其對(duì)肉仔雞免疫器官生長(zhǎng) 發(fā)育的影響進(jìn)行杜仲生物學(xué)功能的研究，旨在為促進(jìn)杜仲在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。 1材料與方法 1.1 試驗(yàn)材料 杜仲購(gòu)自江蘇省藥材公司，杜仲提取物的制備方法是稱(chēng)取杜仲，用水清洗，倒入不銹鋼鍋中浸泡30 min，加水沒(méi)過(guò)藥面，水煎3次，過(guò)濾，濃縮，離心，取上清液稀釋成規(guī)定濃度，裝瓶，消毒備用。 1.2 疫苗 雞新城疫Ⅳ系活疫苗由中牧實(shí)業(yè)股份有限公司南京藥械廠生產(chǎn)(批號(hào)：040208)；傳染性法氏囊病油乳滅活苗由青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)(批號(hào)：2005041)。 1.3 試驗(yàn)雞 400羽健康1日齡AA商品肉雞，隨機(jī)分成對(duì)照組(0)、試驗(yàn)組Ⅰ(1.25%)、試驗(yàn)組Ⅱ(2.5%)和試驗(yàn)組Ⅲ(5%)，每組兩個(gè)重復(fù)(公母各半)，立體籠養(yǎng)。飼養(yǎng)管理規(guī)范化，自由采食和飲水。7日齡時(shí)，各組雞均用雞新城疫苗按照說(shuō)明滴鼻滴眼，傳染性法氏囊病油乳滅活苗頸部皮下注射(0.3 mL/只)。 1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將杜仲水煎劑配成1.25%、2.5%和5%3個(gè)劑量，分別添加到試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的飲水器中，對(duì)照組為自來(lái)水，試驗(yàn)組均連續(xù)處理6周，分別在添加后1、2、3、4、5、6周從各組中隨機(jī)抽取5只屠宰，解剖后分別取法氏囊、胸腺、脾臟等組織固定，用組織學(xué)方法研究免疫器官等組織的發(fā)育變化情況[11]。
1.5 組織切片的制作與觀察 雞只解剖后即刻進(jìn)行采樣，隨即將組織樣置于10%的中性福爾馬林溶液中固定48 h后進(jìn)行常規(guī)組織學(xué)切片制作[11]。光鏡下對(duì)組織切片進(jìn)行觀察與拍照。 2 結(jié)果 2.1 杜仲提取物對(duì)法氏囊早期發(fā)育的影響 對(duì)照組法氏囊小結(jié)在第1周和第2周時(shí)比較小，皮質(zhì)較薄，小結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量少、細(xì)胞排列疏松，小結(jié)間結(jié)締組織較少(圖1A)；隨著周齡的增加，法氏囊小結(jié)增大，體積也有不同程度的增大，皮質(zhì)變厚，法氏囊小結(jié)內(nèi)淋巴小結(jié)數(shù)量較多，小結(jié)間結(jié)締組織增多；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組法氏囊發(fā)育較快(圖1B和圖1C)。 2.2 杜仲提取物對(duì)胸腺早期發(fā)育的影響 對(duì)照組胸腺小葉在第1周和第2周時(shí)體積小、皮質(zhì)薄，小葉內(nèi)淋巴細(xì)胞排列疏松，含有少量胸腺小體；第5周齡和第6周齡時(shí)胸腺小葉體積增大、增厚，皮質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞增多，淋巴細(xì)胞排列緊密，胸腺小體也有所增加；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組發(fā)育較快，在相同日齡時(shí)試驗(yàn)組胸腺小葉體積明顯變大，皮質(zhì)明顯增厚。 2.3 杜仲提取物對(duì)脾臟早期發(fā)育的影響 對(duì)照組脾臟在第1周和第2周時(shí)體積小，脾小結(jié)數(shù)量少，動(dòng)脈周?chē)馨颓瘦^薄，淋巴細(xì)胞排列疏松，紅髓比例較大，脾索和脾竇不明顯，很少能觀察到生發(fā)中心；隨著日齡的增加，脾小結(jié)數(shù)量增加，體積增大，動(dòng)脈周?chē)馨颓试龊瘢馨图?xì)胞多且排列緊密，白髓占的比例增大，能見(jiàn)到少量的生發(fā)中心(圖1D和圖1F)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組脾臟發(fā)育較快(圖1E和圖1G)。 A.第1周齡時(shí)對(duì)照組法氏囊；B.第1周齡時(shí)試驗(yàn)Ⅱ組法氏囊；C.第1周齡時(shí)試驗(yàn)Ⅲ組法氏囊；D.第3周齡時(shí)對(duì)照組脾小結(jié)；E.第3周齡時(shí)試驗(yàn)Ⅱ組脾小結(jié)；F.第3周齡時(shí)對(duì)照組脾動(dòng)脈淋巴鞘；G.第3周齡時(shí)試驗(yàn)Ⅱ組脾動(dòng)脈淋巴鞘；標(biāo)尺為50微米 A.Fabricius bursa in control at week 1；B.Fabricius bursa in Group Ⅱ at week 1；C.Fabricius bursa in Group Ⅲ at week 1；D.Spleen mass in control at week 3；E.Spleen mass in Group Ⅱ at week 3；F.Spleen artery lymph theca in control at week 3；G.Spleen artery lymph theca in Group Ⅱ at week 3.Bar＝50 μm 圖1 杜仲對(duì)肉仔雞免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育的影響
Fig.1 Effects of Eucommia bark on the development of immune organs of broilers 3 討論 本研究表明杜仲可以顯著促進(jìn)肉仔雞免疫器官的發(fā)育，從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能與抵抗力。 家禽的免疫系統(tǒng)既具有動(dòng)物的免疫系統(tǒng)的共性，又在其免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及功能方面形成了許多特殊性，具有相對(duì)的獨(dú)立性及完整性[12-15]。其中最重要的免疫器官是胸腺、法氏囊和脾臟。胸腺和法氏囊是機(jī)體的中樞免疫器官，二者均屬淋巴樣上皮結(jié)構(gòu)；脾臟屬于外周免疫器官。法氏囊是抗體生成系統(tǒng)的細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的部位，能產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和各種特異性的B細(xì)胞(囊依賴(lài)淋巴細(xì)胞)，參與體液免疫反應(yīng)。胸腺主要是產(chǎn)生與細(xì)胞免疫活動(dòng)有關(guān)的T細(xì)胞，這些細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移到脾、盲腸、扁桃體和其它淋巴組織中，在特定的區(qū)域定居、繁殖，并參與細(xì)胞的免疫活動(dòng)[12-15]。成年家禽脾臟主要有造血功能，在胚胎時(shí)期的主要功能是生成紅細(xì)胞；脾臟的過(guò)濾功能是通過(guò)充滿網(wǎng)狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的巨大網(wǎng)狀纖維網(wǎng)來(lái)完成的，它不但可以清除衰老死亡的紅細(xì)胞，還能清除血流中的大部分抗原，參與細(xì)胞免疫應(yīng)答。如果切除脾臟，機(jī)體產(chǎn)生抗體的能力顯著降低[12-15]。本試驗(yàn)結(jié)果表明杜仲可以顯著促進(jìn)這些免疫器官的發(fā)育，從而增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力和免疫功能。這可能與杜仲皮、葉和果中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)元素和抗生物質(zhì)有關(guān)，具體的機(jī)制將有待于進(jìn)一步的研究分析。
綜上所述，利用杜仲作為飼料添加劑，不但進(jìn)一步證明了其可以顯著促進(jìn)家禽免疫器官的早期發(fā)育來(lái)提高機(jī)體的抵抗力和免疫功能，而且也進(jìn)一步表明由杜仲開(kāi)發(fā)的綠色食品具有保健功能，同時(shí)也表明其將是未來(lái)畜牧業(yè)生產(chǎn)中不可缺少的重要綠色飼料添加劑之一。 |
