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本方法采用高效液相色譜法測(cè)定雙黃連片中綠原酸的含量。

本方法適用于中成藥雙黃連片。

本品加50%甲醇超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)324nm處檢測(cè)綠原酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 50%甲醇

2. 冰醋酸

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 水 冰醋酸 ＝15 85 1

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：324nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.2g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取綠原酸對(duì)照品適量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1mL含60mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.2g，精密稱定，置50mL量瓶中，加50%甲醇適量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）20分鐘，放置至室溫，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2mL，置10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)324nm處測(cè)定綠原酸（C₁₆H₁₈O₉）的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p406。