儀器設(shè)備： 1 儀器
1.1高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)應(yīng)不低于2000。
1.3 紫外吸收檢測(cè)器
2 色譜條件
2.1 流動(dòng)相：甲醇 + 0.1%磷酸溶液= 85 + 15
2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm
2.3 柱溫：室溫
試樣制備： 1. 稱取供試品
取本品20片，除去包衣，精密稱定，求得每片平均重量，研細(xì)（過(guò)三號(hào)篩），精密稱取適量（約相當(dāng)于1片的重量）。
2. 對(duì)照品溶液的制備
分別精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇- 醋酸乙酯（2 ：1）制成每1 ml含大黃素0.01 mg、大黃酚0.025mg的混合溶液。
3. 供試品溶液的制備
供試品置錐形瓶中，精密加乙醇25ml, 密塞，稱定重量，置水浴上加熱回流1小時(shí)，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置燒瓶中，水浴蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10 ：1）溶液15ml，置水浴中加熱水解1小時(shí)，立即冷卻，用氯仿強(qiáng)力振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇-醋酸乙酯（2 ：1）溶解，移置25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，取續(xù)濾液，為供試品溶液。
注：“精密稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定三黃片中大黃素和大黃酚的含量。
本方法適用于中成藥三黃片。
供試品加乙醇于水浴上加熱回流，用乙醇補(bǔ)足減失的重量后，精密量取濾液，蒸干，加30%乙醇-鹽酸置水浴中加熱水解后，用氯仿提取，合并提取液，水浴蒸干，無(wú)水乙醇-醋酸乙酯溶解殘?jiān)�，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)大黃素和大黃酚的吸收值，計(jì)算出其含量。
1. 甲醇
2.磷酸溶液（0.1%）
3.乙醇
4.無(wú)水乙醇
5.鹽酸
6.醋酸乙酯
7 .氯仿
1. 稱取供試品
取本品20片，除去包衣，精密稱定，求得每片平均重量，研細(xì)（過(guò)三號(hào)篩），精密稱取適量（約相當(dāng)于1片的重量）。
2. 對(duì)照品溶液的制備
分別精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇- 醋酸乙酯（2 ：1）制成每1 ml含大黃素0.01 mg、大黃酚0.025mg的混合溶液。
3. 供試品溶液的制備
供試品置錐形瓶中，精密加乙醇25ml, 密塞，稱定重量，置水浴上加熱回流1小時(shí)，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置燒瓶中，水浴蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10 ：1）溶液15ml，置水浴中加熱水解1小時(shí)，立即冷卻，用氯仿強(qiáng)力振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇-醋酸乙酯（2 ：1）溶解，移置25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，取續(xù)濾液，為供試品溶液。
注：“精密稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。
分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定大黃素（c15h10o5）和大黃酚（c15h10o4）的吸收值，計(jì)算出其含量。
| 
高效液相色譜測(cè)定法三黃片中大黃素和大黃酚 NEWS
