常春藤提取物常春藤苷C的含量測(cè)定 | 常春藤提取物常春藤苷C的含量測(cè)定 |
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常春藤提取物常春藤苷C的含量測(cè)定
1色譜條件 Agilent1200高效液相色譜儀;Thermo Hypersil BDS C18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相:乙腈-水(28∶72);流速:0.8mL·min-1，柱溫:35℃，檢測(cè)波長(zhǎng):201nm。 2對(duì)照品溶液的制備 取常春藤皂苷C對(duì)照品適量，加50%乙醇水制成每1mL含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。 3供試品溶液的制備 取適量朝鮮白頭翁藥材，粉碎，過(guò)3號(hào)篩，精密稱(chēng)定，稱(chēng)取1g于具塞錐形瓶中，向其加入50%乙醇水溶液50mL，稱(chēng)定重量，加熱回流1h，放冷，再稱(chēng)定重量，用50%乙醇水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL置25mL量瓶中，加50%乙醇水定容至刻度，即得供試品溶液。 4方法學(xué)考察 4.1空白對(duì)照試驗(yàn) 取50%乙醇水作為空白對(duì)照溶液，按1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定分析，結(jié)果顯示，空白對(duì)照溶液在與常春藤皂苷C對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間處無(wú)色譜峰，表明溶劑對(duì)測(cè)定沒(méi)有干擾(見(jiàn)圖1、2)。
4.2線性關(guān)系考察 分別精密吸取對(duì)照品溶液2、4、8、12、16、20μL注入色譜儀，按1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以常春藤皂苷C的含量(μg)和相應(yīng)的峰面積進(jìn)行線性回歸，計(jì)算得回歸方程Y=364.5341X-1.3262，r=0.9999，結(jié)果表明常春藤皂苷C在0.220～2.203μg線性關(guān)系良好。 4.3精密度試驗(yàn) 精密吸取同一份供試品溶液(S4)，按1項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰 面積。結(jié)果顯示，供試品色譜峰峰面積的ＲSD=0.48%，表明儀器的精密度良好。 4.4穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取3項(xiàng)下的供試品溶液(S4)，按1項(xiàng)下色譜條件分別于0、6、8、12、 18、24h進(jìn)樣，記錄峰面積。結(jié)果顯示常春藤皂苷C色譜峰峰面積的ＲSD=0.11%，表明供試品溶液中常春藤皂苷C在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。 4.5重復(fù)性試驗(yàn) 取3項(xiàng)下的供試品溶液(S4)6份，分別照1項(xiàng)下方法測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果顯示常春藤皂苷C峰面積的ＲSD=1.44%，表明此方法的重復(fù)性良好 4.6回收率試驗(yàn) 分別精密稱(chēng)取樣品(S4)1g，共6份，分別加入常春藤皂苷C對(duì)照品適量，按2項(xiàng)下方法制備，按1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算常春藤皂苷C的回收率。結(jié)果見(jiàn)表2。
4.7耐用性試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)中選取了不同廠家色譜柱(ThermoHypersilBDSC18、PhenomenexGemini C18、VenusilXDP C18)及不同廠家和型號(hào)的高效液相色譜儀(Agilent1290、島津LC-20A、WatersE2695)測(cè)定各供試品，結(jié)果顯示不同廠家色譜柱和不同儀器均 能對(duì)樣品進(jìn)行較好分離，適用性良好。 5樣品測(cè)定 分別取不同產(chǎn)地的18批朝鮮白頭翁藥材，按3項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，照1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表3、圖3。
由表3可以看出，18批朝鮮白頭翁中常春藤皂苷C含量測(cè)定結(jié)果為0.806%～4.317%，差異較大，其中，采集于延吉市依蘭鎮(zhèn)臺(tái)巖村的朝鮮白頭翁(S3)中常春藤皂苷C含量最高，為4.317%;而采集于通化縣東來(lái)鄉(xiāng)的樣品(S15)中常春藤皂苷C含量最低，僅為0.806%。 主要參考資料[1][中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)]CN201310618958.2從常春藤葉中分離常春藤苷C及苷元的方法 [2][中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)]CN200710034341.0一種從常春藤中制備常春藤苷C的方法 |
