紅曲中的落伐它丁測定(HPLC-UV法)-上禾生物 |
發(fā)布時間:2023-10-08 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):260 |
紅曲中的落伐它丁測定(HPLC-UV法)-上禾生物 1.范圍 本標準適用于紅曲(Monascus sp.)中的落伐它。╨ovastatin又稱monacolin K)含量測定。 2.原理 落伐它丁在紫外區(qū)有吸收,通過選擇該物質(zhì)的最大吸收波長,以獲得最大的靈敏度和抗干擾能力,選擇合適的洗脫劑,以測定柱洗脫液在流動池中吸收紫外光的大小來確定其含量。 3.試劑 3.1 超純水 3.2 甲醇(色譜純) 3.3 落伐它丁(lovastatin又稱monacolin K)。
4.儀器 4.1 高效液相色譜儀(Waters) 4.2 分析天平(1/100000) 4.3 超聲波清洗儀 4.4 0.45 mm 微孔膜過濾器 4.5 容量瓶 4.6 具塞小玻璃瓶 4.7 色譜柱 Kromasil ODS C18 5 mm 4.6´200mm
5.分析步驟 5.1 標樣制備 精密稱取標樣用75%酒精溶解,使其濃度為0.1mg/ml,過0.45mm濾膜,置冰箱貯存。 5.2 待測樣品 精確稱取200mg提取物于50ml容量瓶中,用75%酒精溶解,超聲1hr 冷卻定容,0.45 mm微孔濾膜過濾為供試液。 5.3 色譜條件 流動相 A:水 B: 甲醇 A : B = 23 : 77 ( V / V等梯度) 流速 1.0 ml/min 波長 238nm 進樣量 10 ml
5.4 樣品的測定: 精確吸取待測樣品供試液與對照品供試液各10ml,注入液相色譜儀,得出峰面積。 5.5 計算: 根據(jù)樣品與對照品各峰峰面積之比比較各種成份的含量(外標法)
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