博落回提取物對(duì)副豬嗜血桿菌誘導(dǎo)的豬肺泡巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)及信號(hào)通路影響的研究--上禾生物 | 博落回提取物對(duì)副豬嗜血桿菌誘導(dǎo)的豬肺泡巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)及信號(hào)通路影響的研究--上禾生物 |
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| 博落回提取物對(duì)副豬嗜血桿菌誘導(dǎo)的豬肺泡巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)及信號(hào)通路影響的研究--上禾生物 作者：曾澤張華琦桂干北
摘要：博落回(M.cordata)是一種常用的中藥,具有抗炎,抗病毒,抗氧化,抗菌,殺蟲(chóng)和抗腫瘤等多種生物學(xué)活性.為了探究博落回提取物對(duì)副豬嗜血桿菌(G.parasuis)誘導(dǎo)的豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)炎癥反應(yīng)及NF-κB和MAPK信號(hào)通路的影響,本研究采用12.5 ng/mL,25 ng/mL,50 ng/mL,100 ng/mL和200 ng/mL的博落回提取物分別預(yù)處理PAM 4 h,再利用1×107 cfu/mL副豬嗜血桿菌刺激PAM 12 h.以博落回提取物溶劑(TSB培養(yǎng)液)預(yù)處理PAM再感染副豬嗜血桿菌作為感染對(duì)照組.分別提取各組細(xì)胞的RNA和蛋白質(zhì),將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA作為模板,采用qRT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中IL-1α,IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-αmRNA的轉(zhuǎn)錄水平.
通過(guò)western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中NF-κB信號(hào)通路蛋白p65,p-p65,IκBα和p-IκBα及MAPK信號(hào)通路蛋白JNK,p-JNK,ERK,p-ERK,p38和p-p38的表達(dá)量.結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,感染對(duì)照組細(xì)胞炎性因子IL-1α,IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-αmRNA的轉(zhuǎn)錄水平均顯著升高(P<0.05),而不同濃度博落回提取物預(yù)處理均能夠顯著抑制副豬嗜血桿菌誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子mRNA的轉(zhuǎn)錄水平(P<0.05),且與博落回提取物的濃度呈正相關(guān).Western blot結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,感染對(duì)照組NF-κB信號(hào)通路蛋白p-p65和p-IκBα及MAPK信號(hào)通路蛋白p-JNK,p-ERK和p-p38的表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05),而不同濃度的博落回提取物預(yù)處理后均能夠顯著抑制副豬嗜血桿菌誘導(dǎo)的p-p65,p-IκBα,p-JNK,p-ERK和p-p38蛋白的表達(dá)水平(P<0.05),且基本與博落回提取物的濃度呈正相關(guān);
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各組細(xì)胞中NF-κB信號(hào)通路蛋白p65和IκBα及MAPK信號(hào)通路蛋白JNK,ERK和p38的表達(dá)水平均無(wú)顯著差異.本研究首次證實(shí)博落回提取物通過(guò)抑制PAM中NF-κB和MAPK信號(hào)通路的活化從而抑制副豬嗜血桿菌誘導(dǎo)PAM的炎性反應(yīng),為副豬嗜血桿菌病的防治提供了一種新的思路.
