熊果酸的研究進(jìn)展 | 熊果酸的研究進(jìn)展 |
| 發(fā)布時(shí)間:2013-11-06 信息來(lái)源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):1929 |
[摘要] 熊果酸是存在于植物中的一種三萜類化合物,具有抗腫瘤、抗菌、降血脂等藥理作用,現(xiàn)綜合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道,對(duì)熊果酸提取分離方法和含量測(cè)定及藥理作用等方面進(jìn)行綜述。熊果酸具有廣闊的應(yīng)用前景,亟待開(kāi)發(fā)。 [關(guān)鍵詞] 熊果酸;提取分離;抗腫瘤 熊果酸(ursolic acid,UA)又名烏索酸、烏蘇酸,是存在于天然植物中的一種三萜類化合物,相對(duì)分子質(zhì)量為456,具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。它體外對(duì)G+和G-菌及酵母菌均有抗菌活性;有抗糖尿病、抗?jié)兗敖档脱淖饔�。同時(shí)具有抗致癌、抗促癌,誘導(dǎo)F9畸胎癌細(xì)胞分化和抗血管生成作用,是一種極佳的滅毒高效新型抗癌藥物,另外還具有明顯抗氧化功能并且對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的安定與降溫作用,因而被廣泛的用作醫(yī)藥和化妝品原料。 1 植物來(lái)源 UA在自然界中分布很廣,存在于多科植物中,UA以游離形式或與糖結(jié)合成苷的形式分布于約7個(gè)科46個(gè)屬62種植物。含量及科屬見(jiàn)表1。
2 提取分離和含量測(cè)定 UA在植物中分布廣泛,因而從植物中提取分離UA具有較大的優(yōu)勢(shì)。由于UA和齊墩果酸為同分異構(gòu)體,其理化性質(zhì)類似,故給分離帶來(lái)一定困難。陳鴻英等用溶劑提取和柱層析法從澤蘭中提取、分離齊墩果酸和UA,且該方法簡(jiǎn)便、快速。黃建林等建立了微波萃取、高效液相色譜測(cè)定番石榴葉中齊墩果酸和UA的方法,微波萃取與索氏萃取相比,得到的齊墩果酸和UA產(chǎn)率一致,萃取時(shí)間相差較大,前者僅需10min,后者則需要4 h。 在提取方法方面,大致用到以下幾種方法:①正交試驗(yàn)法。鄭亞杰等以UA的含量和干浸膏得率為檢測(cè)指標(biāo),采用L(34)正交試驗(yàn),考察溶劑濃度(A)、溶劑用量(B)、提取時(shí)間(C)和提取次數(shù)(D)4個(gè)影響因素,優(yōu)化中藥山楂中UA的提取工藝。②柱層析法分離。袁干軍等[6]應(yīng)用硅膠柱層析和反相制備液相層析,首次從海南五層龍的根中分離出5個(gè)化合物,根據(jù)理化常數(shù)和光譜數(shù)據(jù),鑒定了其中之一為UA。③CO2超臨界流體萃取法。崔星明等用CO2超臨界流體萃取得到的蘆筍提取物,用甲醇抽提醇溶部分,經(jīng)確認(rèn)為UA。④沉淀吸附法。任秀蓮等[8]依次用堿和酸作為沉淀劑,D型樹(shù)脂作為吸附劑,研究了用沉淀吸附法提取苦丁茶中UA的工藝。測(cè)定不同工藝條件對(duì)提取UA的影響。幾種方法綜合應(yīng)用往往會(huì)得到更好的效果UA的含量測(cè)定方法有衍生化氣相色譜法、反相液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、薄層掃描法、薄層比色法、薄層限量法和高效液相色譜法,薄層掃描法操作簡(jiǎn)便,有較好的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性,應(yīng)用較為廣泛,但隨著高效液相色譜儀器的普及,高效液相色譜法因分離效果好,精密度高,重現(xiàn)性好,操作方便,其應(yīng)用更加廣泛。 3 藥理作用 3.1 保肝 印度學(xué)者Saraswat等[12]發(fā)現(xiàn)UA(5~20mg·kg-1)對(duì)CCl4引起的大鼠肝毒性有保護(hù)作用。用UA作預(yù)處理可明顯提高大鼠肝細(xì)胞的成活率,并在實(shí)驗(yàn)中觀察到UA具有抗膽汁淤積的作用,膽汁流量及其內(nèi)容物均有增加。由CCl4的作用機(jī)制推測(cè)UA對(duì)損傷肝細(xì)胞的治療作用機(jī)制可能與其同分異構(gòu)體齊墩果酸相似,在于保護(hù)和穩(wěn)定肝細(xì)胞膜及細(xì)胞器的生物膜系統(tǒng),使其變動(dòng)通透及主動(dòng)運(yùn)輸功能恢復(fù)正常,細(xì)胞內(nèi)外離子和水的移動(dòng)及分布亦隨之復(fù)原,再生能力相繼恢復(fù),促進(jìn)肝小葉中央?yún)^(qū)壞死肝細(xì)胞修復(fù)。 3.2 抗腫瘤 腫瘤的形成是多因素、多步驟、多基因突變的過(guò)程,已知許多化學(xué)致癌物能誘發(fā)和促進(jìn)腫瘤形成,而UA對(duì)腫瘤形成各階段都有預(yù)防和抑制作用。癌的化學(xué)預(yù)防作用就是用化學(xué)藥物預(yù)防腫瘤的發(fā)生或使腫瘤分化逆轉(zhuǎn),從而達(dá)到預(yù)防惡性腫瘤的目的。目前,認(rèn)為癌的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多階段過(guò)程,一般要經(jīng)歷始發(fā)突變、促癌和演變3個(gè)階段。當(dāng)前癌的化學(xué)預(yù)防研究的主要目標(biāo)之一是尋找高效、低毒的藥物。 3.2.1 抗始發(fā)突變 始發(fā)突變涉及致癌物的代謝活化、活化致癌物與靶細(xì)胞DNA的結(jié)合、致癌物DNA加成物的形成以及DNA的損傷與修復(fù)等。Ames試驗(yàn)研究UA的抗突變性,發(fā)現(xiàn)UA可以對(duì)抗致癌物如苯駢芘[B(α)P]、黃曲霉素B1誘發(fā)基因突變,其作用機(jī)制尚不清楚。 3.2.2 抗促癌 Guevara等研究顯示UA能使誘變劑所致的多染色質(zhì)的微核紅細(xì)胞數(shù)減少76%。Ohigachi等研究結(jié)果顯示UA對(duì)佛波酯(TPA)誘導(dǎo)Raji細(xì)胞EBA-EA活化有抑制作用,其程度與維甲酸幾乎相同,Raji細(xì)胞存活率較經(jīng)維甲酸處理組要高,其機(jī)制是有效阻斷TPA與受體結(jié)合后的環(huán)節(jié)發(fā)揮作用。Huang等發(fā)現(xiàn)UA能明顯抑制TPA對(duì)二甲基苯并蒽(DMBA)誘發(fā)的小鼠皮膚癌的促癌作用, 其機(jī)制是TPA能誘導(dǎo)表皮鳥(niǎo)氨酸脫羧酶(ODC)活性增強(qiáng),UA能抑制上述環(huán)節(jié),從而引起多胺枯竭,生長(zhǎng)受抑制,使細(xì)胞積聚在G1期,并出現(xiàn)分化。 3.2.3 抗氧化 UA是一個(gè)較強(qiáng)的抗氧化劑。有實(shí)驗(yàn)表明UA能抑制花生四烯酸代謝過(guò)程中5-脂氧化酶、環(huán)氧化酶活性,阻止前列腺素與白三烯生成,這可能是UA抑制炎癥反應(yīng)、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物的原因。Subbaramaiah等研究表明UA能抑制人乳腺上皮細(xì)胞中的環(huán)氧化酶2的轉(zhuǎn)錄,也由此抑制前列腺素2生成。 UA的抗氧化作用對(duì)人體的抗衰老、皮膚祛斑、祛色素都有積極作用。日本1983-2004年的有關(guān)UA的29篇專利中,有10篇是關(guān)于UA的皮膚美容保健方面的應(yīng)用,作為化妝品,UA性質(zhì)穩(wěn)定,顏色和氣味不隨時(shí)間改變,而且有很好的觸摸感,因此在美容護(hù)膚品中有廣泛的應(yīng)用。 3·3 抗菌、抗炎及抗病毒 Tapondjou等[19]通過(guò)醋酸扭體實(shí)驗(yàn)和熱板法實(shí)驗(yàn)證實(shí),UA和23-羥基熊果酸有類似的抗炎抑菌作用。UA能分別抑制甲酰甲硫氨酰亮氨酰苯丙氨酸(Mf LP)及花生四烯酸誘導(dǎo)的超氧化物的產(chǎn)生。將UA和Mf LP加入細(xì)胞培養(yǎng)液中,UA呈劑量依賴性抑制由Mf LP誘導(dǎo)的45 ku蛋白酪氨酸磷酸化。UA的衍生物還具有抗HIV的作用,UA及其丙二酸衍生物能夠抑制HIV1蛋白酶,其IC50分別為8和6mmol·L-1 [21]。UA還具有殺錐蟲(chóng)活性,在2 g·L-1的濃度下孵育2 h后,克氏錐蟲(chóng)鞭毛體的活動(dòng)被完全抑制。 3·4 降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化 UA可以降低家兔和大鼠血膽固醇(44% )和β脂蛋白水平(50% ),具有降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。 4 臨床應(yīng)用 李開(kāi)泉等研究發(fā)現(xiàn)UA在制備治療病毒性肝炎藥物中不論單獨(dú)使用,還是與其他藥物配合使用,只要制備成藥品或保健藥品均具有顯著治療病毒性肝炎的作用。他們以齊墩果酸為對(duì)照,用UA治療甲、乙型急性肝炎102例,劑量為102和60mg·d-1,平均治療時(shí)間為21 d,治愈率為89·3%,優(yōu)于同期100例齊墩果酸對(duì)照組的療效(68%,P<0·01);臨床試驗(yàn)證明,UA具有顯著而迅速降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶,消退黃疸,恢復(fù)肝功能的作用。服藥3周后,對(duì)21例HBeAg陽(yáng)性患者的轉(zhuǎn)陰率為61·9%,對(duì)21例HBsAg陽(yáng)性患者的轉(zhuǎn)陰率為42·8%,表明對(duì)乙型肝炎也有一定治療作用。另外譚仁祥等研究也證實(shí)了UA不但具有治療病毒性肝炎的作用,它還具有抗抑郁作用,并將含有UA的紫蘇提取物作為治療抑郁癥的藥物。UA幾乎無(wú)不良反應(yīng),相比西藥的抗抑郁譜窄、毒副作用大,用藥后易復(fù)發(fā)和誘發(fā)自殺傾向等有顯著優(yōu)勢(shì)。以UA為主要成分的女貞葉提取物制成的膠囊劑主要用于肝腎陰虛、陰虛陽(yáng)亢癥所致的原發(fā)性高脂血癥,是我國(guó)批準(zhǔn)的二類新藥。 5 結(jié)構(gòu)修飾 在UA的結(jié)構(gòu)改造方面,白育軍[28]曾針對(duì)增加UA的A環(huán)碳原子上氧化度的結(jié)構(gòu)修飾及其抗腫瘤活性進(jìn)行研究。他們構(gòu)造出6個(gè)UA衍生物,其中有4個(gè)是未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物,在用這些化合物對(duì)人體進(jìn)行生物活性測(cè)試之后,得出結(jié)論:增加UAA環(huán)的含氧取代,并未改善UA的抗腫瘤效果。另有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),UA3位羥基、11位亞甲基、17位羧基以及五環(huán)三萜骨架是抗癌活性的功能團(tuán);若將五環(huán)三萜類化合物齊墩果酸17位羧基與磷酸成酯,形成的齊墩果酸磷酸酯單鈉比原型化合物抗腫瘤活性將提高5倍。到目前為止以UA為先導(dǎo)化合物,本實(shí)驗(yàn)室合成了15個(gè)3位羥基和17位羧基進(jìn)行改造的UA類似物,并正在對(duì)其進(jìn)行抗腫瘤活性篩選�？傊�,UA的其他結(jié)構(gòu)修飾物的研究亟待繼續(xù)研究。 6 結(jié)語(yǔ) UA廣泛存在于植物中,為其開(kāi)發(fā)、利用提供了廣闊的前景,有望成為廣泛開(kāi)發(fā)的高效低毒的新藥 |
