淫羊藿苷對骨質(zhì)疏松模型小鼠骨組織形態(tài)計量學(xué)指標的影響 | 淫羊藿苷對骨質(zhì)疏松模型小鼠骨組織形態(tài)計量學(xué)指標的影響 |
| 發(fā)布時間:2013-12-05 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):2689 |
骨質(zhì)疏松癥(Osteopomsis，OP)是一種以骨量減少和骨微觀結(jié)構(gòu)退化為特征，導(dǎo)致骨的脆性增加以致于易發(fā)生骨折的一種全身性代謝性骨病，通過骨組織形態(tài)計量方法測定出的骨組織形態(tài)計量學(xué)指標可量化骨微觀結(jié)構(gòu)的改變。我們前面的試驗研究已表明淫羊藿苷可改善骨質(zhì)疏松模型小鼠的骨密度及骨生物力學(xué)指標Ⅲ ，本研究以觀察淫羊藿苷對骨質(zhì)疏松模型小鼠骨組織形態(tài)計量學(xué)指標的影響，旨在觀察淫羊藿苷對骨質(zhì)疏松癥骨微觀結(jié)構(gòu)改變的影響，從而進一步探討淫羊藿苷的抗骨質(zhì)疏松作用。 1 材料與方法 1．1 實驗材料 1．1．1 實驗動物KM 種小鼠，雌性，4周齡，體重 18~22 g；一級實驗動物，由貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，合格證：SCXK(黔)2002—000l。 1．1．2 藥物與試劑 淫羊藿苷(南京崇原生物科技有限公司批號：20070501)，己烯雌酚(合肥久聯(lián)制藥有限公司批號：20060518)。 1．1．3 主要儀器及設(shè)備 AO一820型輪動式切片機—— 美國。BI一2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)，成都泰盟科技有限公司。 1．2 實驗方法取昆明種雌性小鼠，體重18422 g。用0．4 戊巴比妥鈉0．1 mI ／lo g腹腔注射麻醉。將麻醉后動物俯臥位固定，剪去背部被毛，碘酒、酒精依次消毒背部皮膚，于脊柱兩側(cè)分別作一縱行切口，分離肌肉、打開腹腔，分別找出左右卵巢，將其牽出，結(jié)扎子宮及動脈，剪去卵巢，逐層關(guān)腹。切除雙側(cè)卵巢小鼠為造模小鼠，對照組動物切除卵巢旁部分脂肪組織，保留卵巢。將造模小鼠隨機分為：模型(等容積常水)、己烯雌酚(2 mg／kg)、淫羊藿苷高劑量(20 mg／ kg)、淫羊藿苷中劑量(10 mg／kg)、淫羊藿苷低劑量(5 mg／kg)組，加上對照組(等容積常水)，實驗動物共分為6個組。各組動物按各自藥物和劑量灌胃給藥，1次／d，連續(xù)給藥2個月，停藥后次日，稱小鼠體重，脫頸椎處死動物，取含股骨頭的一段右側(cè)股骨，常規(guī)脫鈣，石蠟包埋切片，片厚4 m，HE染色，以BI-2000 醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進行骨組織形態(tài)學(xué)觀察，計量： (1)骨小梁平均寬度；(2)骨皮質(zhì)平均厚度；(3)骨小梁面積；(4)成骨細胞數(shù)；(5)破骨細胞數(shù)。 1．3 統(tǒng)計方法 實驗數(shù)據(jù)用以均數(shù)士標準差( ± s)表示，采用Excel 2003進行統(tǒng)計，組間比較采用 Student—t檢驗。 2 結(jié) 果 與對照組比較，模型組小鼠骨小梁平均寬度變窄、骨小梁面積變小、骨皮質(zhì)平均厚度減小、成骨細胞數(shù)明顯減少，破骨細胞數(shù)明顯增高，差異有顯著意義(P<0．05、P 3 討 論 骨組織形態(tài)計量學(xué)可將二維圖像展示的骨組織和細胞結(jié)構(gòu)進行定量分析，能夠定量觀察和研究骨組織的形態(tài)及結(jié)構(gòu)，為骨結(jié)構(gòu)、骨形成及骨吸收提供客觀數(shù)據(jù) j。骨形態(tài)計量學(xué)指標是評價骨轉(zhuǎn)換與骨結(jié)構(gòu)的最直接最客觀的指標。本研究以切除雌性小鼠雙側(cè)卵巢的方法復(fù)制骨質(zhì)疏松模型小鼠，運用骨形態(tài)計量的方法測定各組動物的骨形態(tài)計量學(xué)指標，觀察淫羊藿苷對去卵巢小鼠骨形態(tài)計量學(xué)指標的影響。 試驗結(jié)果顯示，去卵巢后小鼠骨小梁平均寬度、骨皮質(zhì)平均厚度、骨小梁面積均有明顯下降，淫羊藿苷各劑量組小鼠的上述指標均明顯升高，說明骨的內(nèi)部結(jié)構(gòu)得到很好的恢復(fù)。在正常骨代謝過程中，骨的吸收和形成處于動態(tài)平衡狀態(tài)，因各種原因引起骨的吸收過多和形成不足導(dǎo)致平衡破壞，可使骨量減少、骨質(zhì)疏松。骨的形成由成骨細胞完成，骨的吸收受破骨細胞控制。小鼠去卵巢后，成骨細胞數(shù)明顯減少而破骨細胞數(shù)明顯增多，給以淫羊藿苷治療后可以升高成骨細胞數(shù)，同時降低破骨細胞數(shù)，由此認為，淫羊藿苷既能抑制骨的吸收，又能刺激衍化增生成骨細胞，產(chǎn)生較多的骨基質(zhì)，使骨代謝轉(zhuǎn)為正態(tài)平衡，在有效的維持骨量的同時，還能使已丟失的骨質(zhì)得以一定程度的恢復(fù)。淫羊藿苷可明顯改善骨質(zhì)疏松模型小鼠的骨計量學(xué)指標，對去卵巢小鼠所致的骨質(zhì)疏松具有治療作用。且淫羊藿苷的抗骨質(zhì)疏松作用與其抑制骨的吸收，促進骨的形成，逆轉(zhuǎn)骨的代謝平衡有關(guān)。本實驗中，淫羊藿苷高、中、低劑量組之間劑量差最高可達4倍，但各劑量組間作用并無明顯差異，因此，建議在臨床應(yīng)用時盡可能選擇小劑量用藥。 |
