999国内精品视频免费_国产真人作爱免费视頻_口口亚洲国产综合Av_99Re国产精品视频

  摘　要:厚樸酚（magnolo）是從中藥厚樸中提取的一種含有酚羥基的生物活性物質(zhì)，具有明顯鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、延長(zhǎng)睡眠、止瀉、降壓等作用，而且有保護(hù)化學(xué)藥物缺氧誘導(dǎo)的皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞損傷作用。該研究旨在觀察厚樸酚對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.

 關(guān)鍵詞:厚樸酚 局灶性腦缺血 自由基 一氧化氮

 1 材料和方法

 1．1 材料

 (1)動(dòng)物：SD大鼠9O只，17～ 18周齡，雌雄各 半，體重250～3O0 g，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。(2)試 劑和儀器：按文獻(xiàn)[2]方法提取厚樸酚，超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶 (NOS)及考馬斯亮藍(lán)試劑盒均為南京建成生物工程研究所 產(chǎn)品，TGI 一16型高速臺(tái)式離心機(jī)由上海醫(yī)用分析儀器廠生 產(chǎn)，722一型分光光度計(jì)由上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。

 1．2 方法

 1．2．1 大鼠局灶性腦缺血模型制備：采用頸內(nèi)動(dòng)脈線栓 法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(McA0)模型 取SD大鼠9O 只，分兩批進(jìn)行處理，第一批進(jìn)行行為學(xué)觀察和病理學(xué)檢 查，第二批進(jìn)行s0D、MDA、N0 、NOS檢測(cè)。每批分為5 組．即假手術(shù)組、模型組和厚樸酚按體重25、50、100 mg／kg 組(假手術(shù)組為第一、二批共用組)，每組1O只。厚樸酚組 動(dòng)物于手術(shù)前分別按體重25、50、100 mg／kg靜脈注射厚樸酚3 mL，假手術(shù)組及模型組均靜脈注射生理鹽水3 mL，，1 次／d。第3 d給藥2O rain后，將大鼠用2O (質(zhì)量濃度)的烏拉坦按體重1 g／kg麻醉，仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上，行頸部正中切口分離右側(cè)頸總動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈．暫時(shí)夾閉頸總動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈，在頸總動(dòng)脈分叉下方剪一切口，將 一預(yù)先用酒精燈燒成圓頭的尼龍線(直徑為0．26 ram)插 入頸內(nèi)動(dòng)脈至大腦中動(dòng)脈起始端，進(jìn)線深度距頸內(nèi)、頸外動(dòng)脈分叉處18～2O mm左右可感到阻力，阻斷右側(cè)大腦中動(dòng) 脈血流，2 h后抽出尼龍線，扎緊動(dòng)脈殘端，縫合皮膚，予以 再灌注24 h。假手術(shù)組大鼠僅暴露頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉，不閉 塞大腦中動(dòng)脈。

 1．2．2 神經(jīng)病學(xué)評(píng)分：參考Zealonga的5分制評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) ]，分別于缺血再灌注后3、6、24 h進(jìn)行評(píng)分。0分：無(wú)神 經(jīng)損傷癥狀；1分：不能完全伸展對(duì)側(cè)前肢；2分：向外側(cè)轉(zhuǎn) 圈；3分：向?qū)��?cè)傾倒；4分：不能獨(dú)自行走，意識(shí)喪失。

 1．2．3 生化指標(biāo)測(cè)定：再灌注24 h后處死大鼠，迅速取腦 稱重。用生理鹽水制成1O 腦組織勻漿液，低溫離心，取 上清液。按試劑盒說(shuō)明書(shū)分別測(cè)定SOD、MDA、NO、NOS， 按考馬斯亮藍(lán)法標(biāo)定蛋白含量。

 1．2．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)輸入SPSS 10．0軟件進(jìn)行t 檢驗(yàn)。

 2 結(jié)果

 2．1 厚樸酚對(duì)局灶性腦缺血大鼠腦組織MDA、SOD、NO、 NOS的影響：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠腦組織中s0D 活性明顯降低，MDA、NO含量及NOS活性明顯增加(P< 0．05)；與模型組相比，厚樸酚組大鼠腦組織中SOD活性明 顯升高，NOS活性降低，MDA、NO含量明顯減少(P<0．05)(表1)。

 表1 厚樸酚對(duì)局灶性腦缺血大鼠腦組織MDA、SOD、NO、NOS的影響

 Table 1 Efect of magnolol on MDA。SOD，NO，NOS of brain tissue in MCA0 rats

 2．2 厚樸酚對(duì)局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能的影響：腦缺血 再灌注3、6、24 h時(shí)模型組和厚樸酚組大鼠神經(jīng)功能缺損積分均較假手術(shù)組增高(P< 0．05)；厚樸酚組與模型組比較，缺血再灌注3、6 h時(shí)積分明顯降低(P<0．05)，24 h時(shí) 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。

 2．3 病理學(xué)檢查

 假手術(shù)組腦組織神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)正常，無(wú)核腫脹，未見(jiàn)神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死及中性粒細(xì)胞 浸潤(rùn)等病理改變。模型組鏡下腦灰質(zhì)和白質(zhì)疏松，血管周圍間隙加寬，此外腦組織中均見(jiàn)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)模糊，胞體腫 脹，出現(xiàn)不同程度的核固縮、核碎裂、核溶解，核體不規(guī)則，并可見(jiàn)軟化灶及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。厚樸酚組與模型組相 比，厚樸酚劑量依賴性地改善大腦神經(jīng)細(xì)胞的胞體腫脹及核固縮、核溶解程度，減少軟化灶形成及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。

 表2 厚樸酚對(duì)局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能的影響

 Table 2 Effect of magnolol on neurologic deficit in M CAO rats

 * P< 0．05 compared with sham group：／X P< 0．05 compared with ischemia group

 3 討論

 缺血性腦血管疾病是臨床常見(jiàn)病和多發(fā)病，且預(yù)后較差。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血再灌注損傷與NO、氧自由基 等有關(guān)。NO 由NOS催化左旋精氨酸生成，根據(jù)組織中 NOS活性高低可判斷NO 的含量，已有多方面證據(jù)表明腦 缺血再灌注后產(chǎn)生的大量NO 對(duì)神經(jīng)細(xì)胞具有毒性作用。NO作為自由基與超氧陰離子自由基反應(yīng)生成的硝基過(guò)氧 化物(ONNN一)是一種極強(qiáng)的氧化劑，能直接氧化脂質(zhì)造 成細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷 ]。該研究中，缺血再灌注后腦組織NOS 活性及NO含量均明顯升高，而厚樸酚能明顯降低缺血再 灌注后大鼠腦組織NO含量。SOD是內(nèi)源性氧自由基清除 劑，正常情況下可與體內(nèi)其他內(nèi)源性氧自由基清除劑一同清除體內(nèi)代謝產(chǎn)生的氧自由基。MDA是腦組織內(nèi)過(guò)氧化 脂質(zhì)的主要代謝產(chǎn)物之一。厚樸酚可明顯提高缺血再灌注 損傷大鼠腦組織中SOD 活性．并減少脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物 MDA的生成，從而表現(xiàn)其抗氧化特性。該研究進(jìn)一步發(fā) 現(xiàn)，厚樸酚能有效地改善大鼠腦缺血再灌注后出現(xiàn)的行為 功能障礙以及提高肌張力；通過(guò)病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，厚樸酚可改善腦細(xì)胞損傷，減輕胞體腫脹及核固縮、核溶解程 度，減少軟化灶形成及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。因此，可認(rèn)為厚樸酚對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用可能與其顯著的 抗組織自由基損傷及抗NO神經(jīng)毒作用有關(guān)。關(guān)于厚樸酚 增強(qiáng)S0D活性的機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。