功能性食品齊墩果酸研究進(jìn)展 | 功能性食品齊墩果酸研究進(jìn)展 |
| 發(fā)布時間:2013-12-10 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):2508 |
摘 要:綜述了近幾年來在齊墩果酸的分析方法、提取分離方法和生理功能等方面的研究進(jìn)展。 關(guān)鍵詞:齊墩果酸 分析 提取 功能 Advances in the research of Oleanolic acid Abstract:In this paper, the advances in the research of Oleanolic acid, including analysis, extraction functional effects were reviewed. Key words:Oleanolic acid; analysis; extraction; functional 齊墩果酸(Oleanolic acid．簡稱OA)，又名慶四素， 是五環(huán)三萜類化合物，廣泛地存在于醫(yī)學(xué)草本植物 和其他植物中：如山楂、烏梅、女貞子、牛膝、槐木 和山茱萸等．OA以游離或結(jié)合成苷的形式存在，可 從中草藥中提取分離得到。據(jù)不完全統(tǒng)計，在自然 界已有34科126種植物中分離得到齊墩果酸。由于 其廣泛的生物學(xué)活性。近年來國內(nèi)外對其提取、含 量測定、藥理作用方面進(jìn)行了大量的研究工作，歐 美國家現(xiàn)已將其作為天然抗氧化劑應(yīng)用到食品中。 1 齊墩果酸的理化性質(zhì) 齊墩果酸分子式為c30H鈣O ，結(jié)構(gòu)式見圖1，分 子量為456．71。為白色簇狀針晶，無色、無味、無 臭，不溶于水，可溶于乙醇、氯仿、乙醚、丙酮等。熔點：3 10~C，Liebermann—Burcbard反應(yīng)呈紫紅色。 2 齊墩果酸的分析方法 齊墩果酸分析方法主要包括高效液相色譜法 (HPLC)、薄層色譜法(TLC)、毛細(xì)管電泳法(cE)和氣相 色譜法(Gc)等方法。 2．1 高效液相色譜法 在齊墩果酸分析中，HPLC是最常見的分析方 法。因其分析范圍廣、速度快、分離效能高，在齊墩 果酸分析中得到了廣泛應(yīng)用。HPLC常用紫外波長檢 測器(uv)、蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)~I熒光檢測器 fFD)作為檢測手段。 石心紅等Ⅲ采用高效液相色譜法(HPLC)~定女貞 子中齊墩果酸。得出最佳色譜條件為：Shim—Pack C 分析柱(4．6mmxl50mm)；流動相為乙腈一甲醇一水一乙 酸胺(70：16：14：0．5)；流動相流速為1mlJmin。進(jìn)樣量 101xL。線性范圍0．01～0．40mg／mL。分析結(jié)果表明， 此法簡單快速、高效靈敏、重現(xiàn)性好。 2．2 薄層色譜法 TLC法經(jīng)濟(jì)、簡單、分離能力強．許多原料中 齊墩果酸可以通過這種方法進(jìn)行定量。但其重現(xiàn)性、 選擇性較差。 曹艷麗等圓采用薄層掃描法對女貞子中齊墩果酸 的含量進(jìn)行了測定。其TLC測定條件為：展開劑為 環(huán)已烷一丙酮一醋酸乙酯(5：2：1)。顯色劑為體積濃度 10％的硫酸乙醇溶液。結(jié)果表明。該方法簡便、快 速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、數(shù)據(jù)可靠。 2_3 氣相色譜法 GC法精密度高。檢測限低。但此方法工藝繁 瑣，樣品需先進(jìn)行衍生化，操作難度大。 閆花麗等¨3_采用氣相色譜法對夏枯草中齊墩果酸的含量進(jìn)行測定。得出最佳色譜條件：色譜 柱10％ SE一30不銹鋼柱(2mx3mm)。FID檢測器，汽 化室及檢測器溫度300~C。色譜柱溫度270~C。載 氣高純氮。流速80mlJmin。靈敏度10。線性范圍 0．0025～0．4mg／mL。齊墩果酸平均回收率為93．53％， RSD為3．5％。結(jié)果顯示GC法分離能力強、數(shù)據(jù) 可靠。 2．4 毛細(xì)管氣相色譜法 CE是近幾年分析化學(xué)中發(fā)展最為迅速的領(lǐng)域之 一 ， 尤其是高壓毛細(xì)管電泳(HPCE)。兼有高壓電泳 的高速、高分辨及HPLC的高效率等優(yōu)點。 劉垣升等 用毛細(xì)管氣相色譜法測定女貞子中齊 墩果酸含量，取女貞子氯仿提取液。揮干，甲醇溶解 經(jīng)甲酯化后進(jìn)樣分析。色譜條件：甲基硅橡膠固定 液毛細(xì)管柱(25mx0．32ram，0．521xm)；氮氣為載氣，分 流比為10：1：柱溫280~C：進(jìn)樣器和檢測器溫度 300~C，氫火焰離子化檢測器。線性范圍2-100mg／L， 回收率為(too．6±1．9)％。表明氣相色譜法可以作為齊 墩果酸質(zhì)量檢測方法。 cE的快速分離(i一30rnin)、很小的進(jìn)樣量和極 低的溶劑消耗，使CE成為一種非常有前景的分析 工具． 3 齊墩果酸的提取分離 3．1 乙醇和甲醇提取 齊墩果酸的提取一般采用乙醇和甲醇進(jìn)行提取。 提取物再進(jìn)行分離純化。但卻存在成本高、工藝過 程復(fù)雜。污染嚴(yán)重等缺點。有報道采用大孔吸附樹 脂對提取物進(jìn)行分離效果較好。 林舒等同研究了用超聲一大孔樹脂法分離純化女 貞子中齊墩果酸的工藝，將干燥的女貞子用10倍量 的75％乙醇浸泡24h后，40kHz超聲提取2次。每次 10rain，回收乙醇，加水得濃縮液。將濃縮液直接上 樣于AB一8型大孔吸附樹脂柱。用無水乙醇洗脫，收 集無水乙醇的洗脫液105~C干燥。濃縮結(jié)晶得到齊墩 果酸產(chǎn)品。女貞子預(yù)處理取得的浸膏經(jīng)大孔吸附樹 脂吸附純化后。回收率為97．7％。純化結(jié)果理想，說 明吸附純化法有利于提高純度。 3．2 對含齊墩果酸的皂甙進(jìn)行水解 有些植物原料中齊墩果酸以皂甙的形式存在， 必須將皂甙水解才能采用溶劑進(jìn)行提取、分離。 王忠壯等同對從太白槐中齊墩果酸進(jìn)行提取時。 取太白梅木根、莖皮粉，加入適量黑曲霉拌勻。在常 溫發(fā)酵48h以上。加水煮沸、過濾。濾液加稀硫酸至 濃度為3％。熱壓水解3h(蒸氣壓1．5kg／cm2)。靜置冷 卻后過濾。棄去酸液。濾渣乙醇回流提取。提取液減 壓回收乙醇。濃縮成稠膏加入5％NaOH溶液。攪拌 煮沸、過濾。加入95％乙醇及適量的活性炭。加熱 溶解脫色，趁熱過濾，于濾液中加入HC1調(diào)pH至1， 靜置冷卻24h以上，濾取結(jié)晶。用蒸餾水洗至無cl一。 結(jié)晶烘干即得齊墩果酸。 3_3 采用超臨界萃取技術(shù)進(jìn)行制備 超臨界CO 流體萃取技術(shù)應(yīng)用到齊墩果酸中， 選擇性較高。較好地保持齊墩果酸的生物活性。有 利于節(jié)約資源。對于提取高附加值的齊墩果酸來說 具有廣闊的前景。 喻世濤等朋采用超臨界CO，流體萃取中華雪膽中 齊墩果酸，超臨界提取的最佳條件：萃取壓力 40MPa，萃取溫度55~C，無水乙醇為夾帶劑。用量為 5％，萃取時間為2h，CO 流量為20kg／h。超臨界CO 流體萃取法提取齊墩果酸避免了有機溶劑的大量使 用，具有成本低、雜質(zhì)少、實驗環(huán)境安全等優(yōu)點。 4 齊墩果酸的生理功能 4．i 抗腫瘤作用 近年來，人們對OA抗腫瘤的作用機制研究主要 通過以下幾方面進(jìn)行：(1)齊墩果酸能抗DNA突變、 抑制癌變的啟動。有研究認(rèn)為，OA對結(jié)腸癌細(xì)胞系 HCTI5產(chǎn)生影響的作用機制是通過阻斷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖 1。(2)齊墩果酸 具有腫瘤逆轉(zhuǎn)作用及抗侵襲性。有學(xué)者在對五環(huán)三萜 類化合物抗人肺癌細(xì)胞增殖、侵襲和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作 用機制的系列研究中指出，OA抗侵襲作用可能是通 過對癌細(xì)胞黏附作用、趨化運動和抑制組織蛋白酶B 的分泌而實現(xiàn)，其抗侵襲機制不是對侵襲某一環(huán)節(jié) 的阻斷，而是對侵襲各個基本環(huán)節(jié)都有抑制作用[91。 (3)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；有研究通過檢測小鼠巨噬細(xì) 胞中一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子一 NF— )的釋放 以及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOs)、TNF— 的基因表達(dá) 水平發(fā)現(xiàn)，OA能誘導(dǎo)NO和TNF— 的釋放減少，并 通過細(xì)胞核因子(NF卜kappaB的轉(zhuǎn)活正性調(diào)節(jié)iNOs和 TNF— 的基因表達(dá)，從而發(fā)揮其抗癌作用I】01。(4)抑制 腫瘤血管形成�？傊琌A的抗癌作用幾乎貫穿了腫 瘤發(fā)展的各個階段⋯】。 4．2 保肝作用 OA化學(xué)結(jié)構(gòu)有雙鍵、羥基、羧基等多個活潑 官能團(tuán)，易發(fā)生一些化學(xué)反應(yīng)，如與體內(nèi)毒性物 質(zhì)結(jié)合，起到解肝毒作用。 實驗研究發(fā)現(xiàn)：齊墩果酸可使變性壞死的肝組 織恢復(fù)正常，減輕丙氨酸活力下降，肝組織炎癥反應(yīng) 減弱，血中丙種球蛋白下降，并能促進(jìn)肝細(xì)胞再生， 使壞死區(qū)迅速修復(fù)[121。OA預(yù)處理也可防止四氯化碳誘 導(dǎo)的肝谷胱甘肽的排空。動物實驗還證實經(jīng)OA預(yù)處 理可將肝中金屬硫蛋白(Mrr)增加了近30倍，OA可以 通過作用于MT而保護(hù)鎘誘導(dǎo)的肝損傷。經(jīng)臨床驗證， OA可有效治療病毒性肝炎，是抗病毒性肝炎藥的主 要活性成分。 4．3 降血脂、降血糖 早期文獻(xiàn)報道，OA可降低實驗性糖尿病大、小 鼠血糖水平，對實驗性高血脂癥大鼠和兔均有明顯的 降脂作用。殷峻等人對OA的降糖機制進(jìn)行了研究， 通過采用與人肝細(xì)胞表型相似的人肝癌細(xì)胞(HepG2)檢 測24h培養(yǎng)液中葡萄糖的消耗量發(fā)現(xiàn)，OA可使糖耗 量輕度增加，但同時使胰島13TC 細(xì)胞的胰島素分泌 量減少25％～29％，故認(rèn)為OA主要不是通過肝細(xì)胞 發(fā)揮降糖作用，而是存在其他作用機制I】31。Yoshikawa M等的研究發(fā)現(xiàn)OA通過抑制胃排空及小腸段對葡萄 糖的攝取實現(xiàn)降糖作用，且OA刺激多巴胺受體的產(chǎn) 生，引起PG的釋放導(dǎo)致胃排空受抑制I】51。 44 對心血管作用 OA對心血管疾病作用是OA藥理作用研究的新發(fā)現(xiàn)。Somova L0等首次提出0A具抗高血壓及強心活 性。研究指出，0A對實驗f生高血壓大鼠無直接降壓作 用，但有直接的強心作用。當(dāng)大鼠長期服用OA后，能 有效抑制嚴(yán)重高血壓的發(fā)展。隨后有學(xué)者對0A抗高血 壓作用機制進(jìn)行研究，認(rèn)為0A是通過影響血管內(nèi)皮L一精氨酸一一氧化氮途徑而發(fā)揮降壓效應(yīng)，并不涉及 其他降壓機制。研究證實：0A對局部缺血及再灌注 的心律失常有顯著的抗心律不齊活性．0A的強心及 抗心律失常作用均通過阻滯B腎上腺素受體實現(xiàn)。鑒 于0A同時具有降壓、強心及抗心律失常作用，對于高 血壓合并心絞痛及心力衰竭的患者將是一個很好選擇。 5 展望 OA是一種天然來源的藥物，除具有保肝、護(hù)胃、 強心、抗心律失常、降血糖、降血脂、抗高血壓的生 物活性外，還具有抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抑制血 小板聚集和抗過氧化等多種藥理作用，齊墩果酸對動 物無明顯毒、副作用， 安全低毒，可將其作為抗氧化 劑應(yīng)用于食品]二業(yè)中，還可將其加工成保健食品。因 此，隨著研究的深入，齊墩果酸將在食品工業(yè)中得到 廣泛的應(yīng)用。
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