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摘　要:目的：研究齊墩果酸對(duì)糖尿病大鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)和非酶糖基化反應(yīng)的影響。方法：用鏈脲佐菌素腹腔注射制備糖尿病大鼠模型，用齊墩果酸治療8周，應(yīng)用熒光法測(cè)定心肌組織糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）含量，應(yīng)用比色法測(cè)定心肌組織及血清丙二醛（MDA）含量，乳膠免疫聚集抑制法測(cè)定糖化血紅蛋白（HbAlc）含量，計(jì)算心臟質(zhì)量指數(shù)。結(jié)果：與正常大鼠比較，糖尿病大鼠各指標(biāo)升高，而齊墩果酸組血清MDA以及心肌組織中AGEs、MDA含量和心臟質(zhì)量指數(shù)均較糖尿病組下降。結(jié)論：齊墩果酸能抑制糖尿病大鼠心肌非酶糖基化和氧化應(yīng)激反應(yīng)。

 關(guān)鍵詞:齊墩果酸 非酶糖基化 氧化應(yīng)激反應(yīng)

 Effect of oleandic acid on nonenzymaticglycation and oxidation stress in myocardial tissue of diabetic rats

 Abstract:Aim： To investigate the effects of Oleandic acid（OA） on nonenzymaticglycation and oxidative stress in diabetic rats. Methods： The subjects were 10 normal rats, 10 diabetic rats, and 10 diabetic rats treated with OA per day for 8 weeks. The fluorescence assay was used to determine the levels of AGEs. The colorimetry was used to determine the levels of MDA from myocardial tissue and serum, respectively. Resuits： In the diabetic rats, HbAlc in serum, AGEs and MDA in myocytes and the ratio of heart to weight were significantly higher than those in normal controls. After being treated with OA, serum MDA, AGEs and myocytes MDA and the ratio of heart to weight were significantly decreased than those in diabetic group. Conclusion： OA inhibits both nonenzymaticglycation and oxidative stress in heart of diabetic rats.

 Key words:oleandic acid; nonenzymaticglycation; oxidative stress

 近年報(bào)導(dǎo)齊墩果酸(Oleandic acid，OA)具有保肝降酶、降血 脂、降血糖、抗氧化、強(qiáng)心及促進(jìn)免疫等作用 ，但對(duì)糖尿病心 肌病的研究方面尚無(wú)報(bào)道。糖尿病心肌病是一種特異性心肌 病 ]，與糖尿病特有的代謝紊亂有關(guān)，其臨床特征早期以心臟 舒張功能不全、晚期以收縮功能不全為主，容易發(fā)生充血性心 力衰竭 J。糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)和氧化應(yīng)激在糖尿病并發(fā) 癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有重要作用 j。本文研究了齊墩果酸對(duì) 糖尿病大鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響。

 1 材料與方法

 1．1 試驗(yàn)藥物 齊墩果酸由本校藥物分析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中心從 女貞子提取制備。

 1．2 試劑 血糖試劑盒(北京利德曼公司生產(chǎn))、糖化血紅蛋 白試劑盒(上海中索佑福醫(yī)學(xué)用品診斷有限公司生產(chǎn))、MDA 試劑盒(上海建成生物工程有限公司生產(chǎn))。

 1．3 動(dòng)物 雄性SD大鼠由本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體重200

 1．4 方法 大鼠禁食24h后，給鏈脲佐菌素(STZ，美國(guó)SIG— MA公司生產(chǎn)，用前以0．1mol／L檸檬酸鹽緩沖液(pH4．5)冰浴 新鮮配制)60ms／kg一次性腹腔注射，3d后尾靜脈采血測(cè)定血 糖，血糖大于16．6mmol／L者為糖尿病模型動(dòng)物⋯ 。造模成功 后，OA 2次／d灌胃，給藥8周后稱(chēng)重，用3％ 水合氯醛10ml／kg 麻醉，打開(kāi)胸腔，左心室采血約5ml；迅速取出心臟，冰生理鹽水 沖洗，濾紙吸干水分，稱(chēng)量心臟質(zhì)量；剪除包膜、血管及心房組 織，留取左心室心肌組織，在液氮罐中保存?zhèn)溆谩?/P>

 血糖：采用氧化酶一過(guò)氧化酶法測(cè)定；糖化血紅蛋白 (HbA1C)：乳膠免疫聚集抑制法；心肌AGEs含量：按文獻(xiàn) 。 用 熒光法測(cè)定；血清及心肌組織丙二醛(MDA)含量：比色法；心臟 質(zhì)量指數(shù)：以心臟質(zhì)量／體重來(lái)計(jì)算。

 2 結(jié)果

 結(jié)果見(jiàn)表1。表1顯示，糖尿病組各指標(biāo)均較正常組升高； OA兩劑量組各指標(biāo)均較糖尿病組明顯降低。

 各組動(dòng)物各項(xiàng)指標(biāo)變化( ±s。n=10)

 3 討論

 糖尿病心肌病是糖尿病危害最大的諸多慢性并發(fā)癥之一， 造成心肌病變的原因有很多，其中高血糖引起的各種代謝紊 亂，如蛋白非酶糖基化、激素水平的改變以及氧化應(yīng)激反應(yīng)等 被廣泛重視。人體內(nèi)持久的高血糖狀態(tài)可導(dǎo)致許多結(jié)構(gòu)功能 蛋白和核酸蛋白發(fā)生非酶糖基化，形成AGEs。氧化應(yīng)激可以促進(jìn)AGEs的形成，而AGEs在體內(nèi)主要是通過(guò)交聯(lián)、與受體相 互作用和增加氧化應(yīng)激來(lái)發(fā)揮多種作用 J。女貞子中有效成 分OA對(duì)多種自由基有良好的清除作用 J。作者觀察到OA在 大劑量時(shí)降低糖尿病大鼠血糖水平的情況下，可明顯降低心臟 質(zhì)量指數(shù)和心肌、血清MDA含量及心肌AGEs含量，提示OA 可通過(guò)抑制糖尿病大鼠體內(nèi)非酶糖基化和氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā) 生，從而發(fā)揮對(duì)糖尿病心肌的保護(hù)作用。