芹菜素Apigenin人體內(nèi)代謝研究 | 芹菜素Apigenin人體內(nèi)代謝研究 |
| 發(fā)布時間:2014-03-24 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):1454 |
芹菜素(Apigenin，AP)屬于黃酮類化合物，廣泛存在于水 果、蔬菜、豆類、茶葉中，其中芹菜含量最高。芹菜素的化學(xué) 結(jié)構(gòu)為4 ，5，7一三羥黃酮，其4 ，5，7位置的3個羥基和C2 與C3之間的雙鍵決定了其生物學(xué)活性，如抑制腫瘤、抗氧 化、抗菌、預(yù)防高血壓及動脈硬化等心血管疾病【2 】。因此． 芹菜素對健康的影響已成為研究熱點(diǎn)。盡管研究均已證實(shí)芹素素具有上述多種生物學(xué)作用，但目前的觀點(diǎn)認(rèn)為其鍵康促 進(jìn)作用的發(fā)揮主要依賴于芹菜素的攝入量和生物利用度。本研究對lO名健康受試者食用芹菜葉后，在不同的時間點(diǎn)采集 受試者血樣，用高效液相色譜法(HPLC)測定血漿、紅細(xì)咆及 24 h尿中芹菜素的含量，旨在探討芹菜素在人體內(nèi)的吸收利用情況，為指導(dǎo)合理膳食提供科學(xué)依據(jù)。 1 對象與方法 1．1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計 受試者在攝入芹菜葉的前一天早8時，采集 空腹血樣。然后統(tǒng)一進(jìn)食不含芹菜素和毛地黃黃酮的食物(因 毛地黃黃酮是芹菜素的主要代謝產(chǎn)物【7 )直至實(shí)驗(yàn)日。受試者于實(shí)驗(yàn)日早晨采集空腹血樣，然后于早8時按規(guī)定劑量 2g／(kg·bw)食用芹菜葉，并分別于食后4，6，7，8，9，10，1，28 h(即實(shí)驗(yàn)日的12，14，15，16，17，18，19點(diǎn)及次日的中午12 點(diǎn))采集血樣，收集受試者24 h的全尿。 1．2 檢測儀器及條件高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng)(Waters600)附二極管陣列檢測器(2996型)。色譜柱為Hypersil ODS2 C18，流動相為甲醇：水=60：40(v／v)，用三氟乙醇調(diào)節(jié)至pH 2．5，流速1 ml／min，進(jìn)樣量1O l，檢測波長338rim，柱溫為 2O℃ 。 1．3 受試樣品及樣品的測定 市售芹菜，摘取綠葉、洗凈并 晾干，貯存在4℃冰箱內(nèi)備用。另取部分芹菜葉樣品于烤箱中40℃烤干，測定其中芹菜素等黃酮類化合物的含量。精確 稱取干燥原芹菜葉2 g，加入8O％乙醇／水100 ml(其中每100 ml溶液中含1O ml鹽酸)，同時加入0．20 g特丁基對苯二酚 (TBHQ)，9O℃ 下回流3 h，冷卻至室溫，用Bucher過濾，精確回收濾液，在3 000 r／min下離心20 min，取上清進(jìn)行( Lc) 分析。芹菜葉中芹菜素、山奈酚、槲皮素、異鼠李黃素、毛地黃黃酮的含量(rag／lOOg)分別為84．18，3．92，0．53，0．23和 2．29。 1．4 生物樣品的預(yù)處理及分析 1．4．1 受試者 lO名自愿受試者(男女各半)。平均年齡 (25．2±l、4O)歲。平均體質(zhì)指數(shù)2O．37 kg／m2。其納入條件是 健康、無代謝性疾病、要求女性未孕；所有受試者均簽署知情同意書。 1．4．2 受試者飲食受試者按2 g／(kg·hw)食和芹菜葉。相 當(dāng)于(114．70±17．15)g芹菜葉或(96．36±14．59)mg芹菜 索。實(shí)驗(yàn)日早8點(diǎn)，受試者食用芹菜葉的同時食用全麥無糖面包。實(shí)驗(yàn)日受試者統(tǒng)一攝食，每天能量需求符合中國營養(yǎng) 學(xué)會2000年推薦的能量參考攝入量。 1．4．3 血漿、紅細(xì)胞樣品的采集、預(yù)處理及分析按文獻(xiàn)[8] 方法進(jìn)行。 1．5 統(tǒng)計分析 攝入芹菜葉后備時間點(diǎn)血漿芹菜素濃度與 4 h時間點(diǎn)比較，采用配對t檢驗(yàn)。 2 結(jié)果 2．1 受試者血漿芹菜素含量(圖1，表1) 受試者食用芹菜 葉之前，空腹血漿中均未檢出芹菜素，而血漿中山奈酚、槲皮素、異鼠李黃素、毛地黃黃酮的平均濃度(nmol／L)分別為 31．6，65．4，12．8，117．6。受試者食用芹菜葉后血漿中芹菜素 的濃度呈現(xiàn)上升的趨勢，而山奈酚、槲皮素、異鼠李黃素、毛地 黃黃酮的平均濃度無明顯變化。食用芹菜葉后血漿芹菜素達(dá) 最高水平的時間為7．70±0．8 2 h，食用芹菜葉28 h后，受試者血漿中芹菜素的濃度全部降到方法的檢出限以下(2．32 nmol／L)。以血漿芹菜素濃度為基礎(chǔ)，血漿濃度時間曲線下面積是(89．02±40．57)min· mol／L。 2．2 受試者紅細(xì)胞芹菜素含量 受試者服用芹菜葉前及服 用后紅細(xì)胞中芹菜素含量在各時間點(diǎn)基本保持相對穩(wěn)定水平，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 2．3 受試者尿中芹菜素水平受試者服用芹菜葉后24 h尿 的容積范圍為0．8～2．5 L，全部受試者尿樣中都檢出芹菜 素，其含量為24 h(2 251．72±1 304．22)nmol／L，按芹菜素的攝入量(357 286．18±53 433．06)nmol／L計算，平均排泄率為 (O．62±0．365)％。 3 討論 本研究表明，當(dāng)受試者食用芹菜葉后。在一定時間內(nèi)血漿中的芹菜素含量呈上升趨勢，然而最大血漿濃度(396．25 nmol／L)相對較低，同時，在攝入芹菜葉后的24 h尿樣中，檢 出的芹菜素量只有攝入量的0．62％。 在食物中芹菜素幾乎全部以糖苷形式存在。而在人體內(nèi)要進(jìn)行甲基化、硫酸化和葡萄苷酸化作用(93。本實(shí)驗(yàn)研究芹 菜葉中芹苷水解后產(chǎn)生芹菜素的量，在人體內(nèi)也未考慮芹菜 素代謝后形成的次級代謝產(chǎn)物。Janssen K【1 oj等給受試者連 續(xù)7 d ISl服5 g芹菜(含芹菜素84 mg)，在血漿中未檢測出芹菜素，因此，推測芹菜素可能不被吸收。本研究得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可能是因?yàn)镴anssen K等所采用的研究方法檢出限相 對較高(1．1 mol／L)，從而導(dǎo)致樣本中低含量的芹菜素未被 檢出。Nielsen等【1 ]給受試者13服芹菜(芹菜素含量為3．37 - 4．49 mg／MJ)后，檢測尿中芹菜素的含量，結(jié)果顯示，與不食用芹菜素組受試者相比，含量增加(P<0．05)，其尿中芹菜 素的排泄率是其攝入量的(0．58±0．16)％，而本研究中受試者食用芹菜葉后尿中芹菜素的排泄率為攝入量的(0．62± 0．37)％，與其基本一致。本研究的受試者攝入(96．55± 14．44)mg芹菜素。而尿中排泄率卻很低，提示攝入體內(nèi)的絕 大部分芹菜素可能沒能被完全吸收或吸收后被快速代謝分解。 曾有學(xué)者提出毛地黃黃酮是芹菜素的一種代謝產(chǎn)物【7]， 在本研究中受試者食用芹菜葉后，血漿中毛地黃黃酮的含量 沒有變化，表明芹菜素在人體內(nèi)的代謝情況可能與動物試驗(yàn) 不符，即芹菜素體內(nèi)的代謝存在著種屬差異。 本研究結(jié)果表明，紅細(xì)胞內(nèi)芹菜素在攝入芹菜葉的前后沒有明顯變化，且均保持在一個相對穩(wěn)定的水平。NieNen SE 等[1 ]曾報道。芹菜素可增加人體內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶的活性，表明芹菜素可通過抗氧化酶的介導(dǎo)發(fā)揮抗氧化生物效應(yīng)，推測紅細(xì)胞可能是芹菜素在體內(nèi)貯存的一個靶部位，在芹菜素的生物學(xué)作用過程中發(fā)揮重要作用。 |
