中藥（植物）有效成分分離純化技術(shù)研究概況 | 中藥（植物）有效成分分離純化技術(shù)研究概況 |
| 發(fā)布時(shí)間:2014-10-01 信息來(lái)源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):2564 |
中藥有效成分的分離純化技術(shù)研究概況 人們并不清楚 是哪種成分起作用的，用一般提取法得到的中藥提取液或提 取物仍然是混合物，而且體積 較大，有效成分含量低，雜質(zhì) 多，所以需要進(jìn)一步去除雜質(zhì)，進(jìn)行分離與純化。具體的分離 與純化的方 法隨著中藥性質(zhì)的不同而不同，下面就將近年來(lái) 用于中藥有效成分分離與純化的新技術(shù)做一簡(jiǎn)單的歸納與 總結(jié)。 1，l減少體積，提高有效成分含量，以適應(yīng)劑型的需要和臨床 用藥的需要。由于雜質(zhì)含量高、體積大， 不能制成適當(dāng)大小的 片劑、滴丸劑、膠囊劑或其他劑型。 1．2 提高藥物的穩(wěn)定性，由于提取物中含有大量樹脂、粘液 質(zhì)、膠質(zhì)、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，使得液體 制劑在存放中不穩(wěn)定，易出現(xiàn)沉淀。在配制前應(yīng)盡量除去這些雜質(zhì)。 1．3中藥注射劑對(duì)原料有特殊的要求，以有效部位為組份的 注射劑，有效部位的含量應(yīng)不低于總固體的 70％，靜脈注射用 的不低于80％：以凈藥材為組份的注射劑，所測(cè)成分的總含量 不低于總固體的20％， 靜脈注射用不低于25％。這就要求對(duì)有 效部位和中藥提取中間體進(jìn)行純化。 2 分離純化的方法 2．1 超速離心法 是通過(guò)離心機(jī)的高速運(yùn)轉(zhuǎn)，使藥液中雜質(zhì) 沉淀一并除去的一種方法。其原理是利用混合液密度差來(lái)分 離 料液，比較適合于分離含難于沉降過(guò)濾的細(xì)微�；蛐鯛钗� 的懸浮液。奉建芳【lj以浸膏得率、多糖含量為 考查指標(biāo)，對(duì)高 速離心法制備歸脾口服液的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)選，并考察了 離心i蠛對(duì)歸脾口服液外觀質(zhì) 量的影響，結(jié)果以10000-15000 r· min 離心為好，對(duì)浸膏得率和多糖含量影響均不大，口服液 澄明度明 顯得到改善。同時(shí)以有效成分含量為指標(biāo)，對(duì)高速 離心法、多級(jí)過(guò)濾法、水醇法用于制備中藥口服液進(jìn)行 了比 較研究。結(jié)果表明，用高速離心法制備的歸脾湯、小柴胡湯、 一貫煎等中藥口服液在保留多糖、黃 芪甲苷、黃芩苷等有效 成分的含量及保證成品的澄明度上明顯優(yōu)于水醇法121。 2．2 凝膠層析法 交聯(lián)葡聚糖LH一20(Sephardex LH一20)和交 聯(lián)葡聚糖LH一6o(Sephardex LH一6o)是凝膠過(guò)濾介質(zhì)經(jīng)過(guò)羥 丙 基改性后的適合中小分子藥物分離純化的介質(zhì)，其分離機(jī)理 是分子篩效應(yīng)，即被分離物質(zhì)的分子質(zhì)量 不同，能夠滲人凝 膠顆粒內(nèi)部的程度不同，它們?cè)谀z柱中層析時(shí)被洗脫下來(lái) 的速度也不同，從而實(shí)現(xiàn) 不同分子質(zhì)量物質(zhì)的分離。 金偉等I 運(yùn)用凝膠層析法從虻蟲中提取出具有抗凝血作 用的有效成分，經(jīng)檢測(cè)，這種有效成分不是蛋白 質(zhì)，而是多糖 類物質(zhì)。張慧利【4睬用葡聚糖凝膠LH一20層析柱料和適當(dāng)?shù)姆?離條件，對(duì)人參皂苷Re的分 離方法進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：通 過(guò)該方法分離人參皂苷Re收率為58．1 6％，得到的人參皂苷Re 的純度 為96．12％，達(dá)到了較好地分離人參皂苷Re的目的。而 且此分離方法的柱料用量少、使用周期長(zhǎng)、再生容 易、重復(fù)性 好，是一種省時(shí)、省力的分離方法。 2．3 膜分離技術(shù) 膜分離技術(shù)以選擇性透過(guò)膜為分離介質(zhì)， 當(dāng)膜兩側(cè)存在某種推動(dòng)力(如壓力差、濃度差、電位差等)時(shí)， 原料側(cè)組分選擇性的透過(guò)膜，以達(dá)到分離、提純的目的 。該 技術(shù)具有可常溫操作分離過(guò)程不發(fā)生相變化f 除滲透汽化 外)、能耗低、分離系數(shù)較大的特點(diǎn)。 王世岑等【6】人用超濾法對(duì)黃芩中有效成分黃芩苷的提取進(jìn) 行了初步考察，結(jié)果表明超濾法在收率、純 度及顏色方面均 較常法為優(yōu)，且一次超濾即可達(dá)到注射劑要求，不需再進(jìn)行 精制，工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期 縮短。王世岑等171還進(jìn)一步對(duì)超濾 法提取黃芩苷的最佳工藝條件進(jìn)行了研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明選 用適宜孔 徑的超濾膜(截留分子量為6000—10000)是提高黃芩 苷收率和質(zhì)量的關(guān)鍵，同時(shí)升高藥液溫度或降低濃度 ，使藥 液黏度降低，嚴(yán)格控制pH值，可顯著提高超濾速度，獲得最佳提出效果。 2．4 大孔吸附樹脂分離純化 大孔吸附樹脂是一種不含離 子集團(tuán)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)高分子聚合物吸附劑，具有吸附性強(qiáng)、解 吸附容易、機(jī)械 強(qiáng)度好、可反復(fù)使用、流體阻力小等優(yōu)點(diǎn)，其 分離性能與樹脂本身性質(zhì)、溶劑因素和被分離的化合物性質(zhì) 等有關(guān)。其原理是采用特殊的吸附劑，利用其吸附性和篩選 性相結(jié)合，從中藥復(fù)方煎液中有選擇的吸附其 中有效成分， 去除無(wú)效成分。特別適用于從水溶液中分離低極性或非極性 化合物。 例如川芎化合物成分相當(dāng)復(fù)雜，主要含有揮發(fā)性的生物 堿、阿魏酸、酚性成分內(nèi)酯等，而其總生物堿和 酚性成分有較 明顯的生理活性。采用大孔吸附樹脂分離出的川芎總提取物 中，川芎嗪和阿魏酸含量約為 25％一29％，收率為0．6％ts~。另外 袁海龍等 每大孔吸附樹脂法應(yīng)用于測(cè)定梔子金花丸中梔子苷的含量 ，利用HPLC法檢測(cè)大孔吸附樹脂處理過(guò)的樣品液， 操作步驟少，色譜柱污染少，柱壓低，具有分離度高、 重現(xiàn)性 好、專屬、靈敏之特點(diǎn)。但是另一方面大孔吸附樹脂純化中藥 有效成分易受從提取液、樹脂、洗 脫等方面等影響【1Ol。 2．5 高速逆流色譜技術(shù) 高速逆流色技術(shù)(High—speed Coun— tereurrent Chro—matography．HSCCC)是由ho．Y．在液液分配色 譜的基礎(chǔ)上建立的一項(xiàng)分離技術(shù)【l1。它依靠聚四氟乙烯(PrFE) 蛇形管的方向性及特定的高速行星式旋轉(zhuǎn) 產(chǎn)生的離心場(chǎng)作 用，使無(wú)載體支持的固定相穩(wěn)定的保留在蛇形管中，并使流 動(dòng)相單向、低速通過(guò)固定相 ，在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)樣品在互不相 溶的兩相溶劑系統(tǒng)中高速分配，繼而達(dá)到連續(xù)逆流萃取分離 物質(zhì)的目的 。高速逆流色譜分離法不僅適用于非極性化合物 的分離，也適用于極性化合物的分離，還可以應(yīng)用于進(jìn)行 中 藥粗提物中各組分的分離或進(jìn)一步的純化精制。 袁黎明等【 唰用HSCCC對(duì)傳統(tǒng)中藥黃柏中生物堿類活性 成分進(jìn)行制備分離，兩相溶劑分離系統(tǒng)采用氯仿 一甲醇_0．5 mol／L HCI(2：I：I)，并對(duì)制備物進(jìn)行薄層色譜分析，證實(shí)生物堿 成分，檢出小檗堿。該 實(shí)驗(yàn)對(duì)含黃柏藥材的制劑的質(zhì)量研究 具有一定的指導(dǎo)意義。Fuquan等f(wàn)l3】利用HSCCC法，以氯仿一甲 醇m 3 mol／L HCI(4：I．5：2)為溶劑系統(tǒng)。從烏(Aconitum Sinomon— tanglm Nakai)的總生物堿粗提物中分 離出高烏堿、rannaconi— tine、N一去乙酰基高烏堿和N—deaee~lranneconitine。陳存社等 ㈣發(fā)現(xiàn)以氯 仿：甲醇：丙酮：水=9：8：1：8為溶劑系統(tǒng)分離純化蘆薈 有效成分，效果最佳。馮順卿等0~JTJHSCCC分 離長(zhǎng)瓣金蓮花中 的黃酮類物質(zhì)，并成功地得到一純化學(xué)成分，通過(guò)紅外光譜 確證其為牡荊甙。 2．6 分子蒸餾技術(shù) 又稱短程蒸餾，屬于一種新技術(shù)。該技 術(shù)特別適合對(duì)高沸點(diǎn)、熱敏性物料進(jìn)行有效物損分離，尤其 是那 些香味、有效成分的活性等對(duì)溫度極為敏感的天然產(chǎn)物 的分離，如玫瑰油、霍香油、桉葉油、山蒼子油等 Il61。分子蒸餾 的特點(diǎn)在于真空度高、蒸餾溫度低于常規(guī)的真空蒸餾且物料 受熱時(shí)間短舊。張忠義、雷 正杰等人_1蚓采用超I}缶界CO 流體萃取(SFE—C02)與分子蒸餾(MD)P~j項(xiàng)技術(shù)對(duì)干姜有效成分進(jìn)行 萃取與 分離，并用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)于姜超臨界CO 萃取物及其分子蒸餾液進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)MD液中有效成 分含 量高，而且雜質(zhì)含量少，與普通蒸餾相比，分子蒸餾溫度低， 受熱時(shí)間短，故適合于熱敏性有效成 分的分離，其有效成分 的分離主要受蒸餾溫度和真空度的影響，不同的蒸餾溫度和 真空度所獲得的有效 成分種類及其相對(duì)含量不同，調(diào)節(jié)適宜 的蒸餾溫度和真空度可獲得相對(duì)含量較高的有效成分。郭曉 玲等l 1先用超臨界提取技術(shù)(SFE)從川芎藥材中提出粗提物， GC—MS分析川芎中含有藁本內(nèi)酯、丁基酞內(nèi)酯和脂 肪酸類物 質(zhì)。然后采用分子蒸餾技術(shù)對(duì)有效成分進(jìn)行富集，去除脂肪 酸類成分，輕組分餾出液中藁本內(nèi) 酯等有效成分含量可達(dá)到 80％以上。 2．7 多種分離純化技術(shù)的聯(lián)合使用 近年來(lái)，藥學(xué)工作者為 取得更好的分離純化效果，采用兩種或兩種以上的分離技 術(shù)。周本杰，張忠義等 應(yīng)用超臨界CO：流體萃取與分子蒸餾 連用技術(shù)捉取分離川芎，經(jīng)GC／MC分析顯示：川I芎超臨界CO： 萃取 物所含化學(xué)成分經(jīng)分子蒸餾后明顯減少，且揮發(fā)油中主 要成分2，3-丁二醇，Of．一蒎烯，檜烯等經(jīng)分子 蒸餾后相對(duì)含量 均有明顯提高，從而證實(shí)了SPE、MD連用技術(shù)對(duì)揮發(fā)性成分 分離純化的作用明顯優(yōu)于單一 sPE技術(shù)。陳寅生 使用膜分 離及大孔樹脂吸附方法，提取、分離、純化赤芍總苷。結(jié)果提 取得到的赤芍 總苷，其總苷含量以芍藥苷計(jì)達(dá)85％以上；其中 芍藥苷含量可達(dá)75％。 3 結(jié) 語(yǔ) 綜上所述，不同的方法具有不同的特點(diǎn)，在中藥分離純 化過(guò)程中的使用也不應(yīng)盲目，因?yàn)橹兴幣浞礁鳟?/P> ，成分復(fù)雜， 不同的方法對(duì)不同藥物有效成分的影響也不同，其用法用 量、精制工藝條件對(duì)成品質(zhì)量的 影響也很大，所以應(yīng)根據(jù)臨 床治療的需要、處方中各藥物的化學(xué)性質(zhì)及所制備的劑型的 要求，選擇比較 不同的分離和純化方法。同時(shí)加大新的分離 純化技術(shù)的應(yīng)用，將會(huì)大大促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，為我國(guó)的 經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人類健康作出更大的貢獻(xiàn)! |
