中藥制劑的薄層掃描法 | 中藥制劑的薄層掃描法 |
| 發(fā)布時間:2014-12-30 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點擊次數(shù):2520 |
薄層掃描法是用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜有紫外光和可見光吸收的斑點，或經激發(fā)后能 發(fā)射出熒光的斑點進行掃描，將掃描得到的圖譜及積分數(shù)據(jù)用于藥品的鑒別、檢查和含量測定的方法。薄 層掃描法具有分離效能高、快速、簡便等特點，因而適用于中藥的分析。薄層掃描法雖然精密度不如HPLC 法高，但可作為補充，，用于無紫外吸收，或不能用HPLC法分析的組分如人參皂甙、貝母生物堿等。 內采用吸收測定法測定。有熒光的組分，可選擇好激發(fā)光波長（λex）和發(fā)射波長（λem），用熒光法具 有專屬性強、靈敏度高和線性范圍寬度等特點。 射光靈敏度較低， 外光有吸收，所以實際應用較少。 S）；另一束作為對照，稱參比波長（λR）。兩束光通過斬光器交替照射到斑點上，以吸收度之差ΔA定量 。雙波長可以消除薄層不均勻的影響，使基線變得平穩(wěn)。測定波長一般選測定組分的最大吸收波長，參比 波長可選在組分無吸收的位置，若背景光譜中與λS的等吸收處，可達到排除背景干擾的目的。單波長法通 常用斑點吸收光譜的測定。 斑點形狀不規(guī)則或濃度不均勻時誤差大，主要用于熒光測定；鋸齒掃描是用一微小的光束同時互相垂直的 兩個方向進行鋸齒狀掃描，由于光束小 �。�1.25mm*1.25mm），光束內部濃度差異可以忽略不計，因而受 斑點形狀和濃度分布的影響小。 吸收度由于散射而減小，A-KX曲線偏向橫軸，不成直線，其形狀與SX有關。為測定方便。薄層掃描儀均裝 有線性化器，用于對工作曲線進行校正，使其成為直線。因此，測定時需輸入散射參數(shù)SX值。不少薄層板 的SX值已知。若未知，可根據(jù)校正結果判斷（圖）。 校正法。測定時，供試品溶液和對照品溶液應交叉點于同一薄層板上，供試品點樣不少于4個，對照品每一 濃度不少于2個。 。 點樣應準確，原點大小應一致；噴灑顯色劑應均勻，量適中；并用膠布加以固定。 去甲醇，殘渣加水溶解后，用正丁醇提取純化，正丁醇減壓回收后，殘渣加甲醇溶解，作為供試品溶液； 另取人參皂甙Rg1對照品，加甲醇制成每ml含0.5mg的溶液，作為對照液。吸取供試品溶液2~4μl，對照品 溶液2μl和4μl分別交叉點于高效硅膠G薄層板上，以氯仿- 醋酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）5~10℃ 放置12小時的下層液為展開劑，展開，取出，晾干。噴以10%硫酸乙醇溶液，110℃加熱至斑點顏色清晰， 取出，在薄層板上蓋同樣大小的玻璃板，用膠布固定，照薄層掃描法測定，波長：λS = 525nm，λR = 700nm，測定供試品和對照品吸收度積分值，計算，即得。 （m1 - m2）/（A1 - A2）， a = m1 - bA1 的手選方法。95版一部已有12種藥材和制劑用高效液相色譜法測定含量，并有增加趨勢。 多；使用甲醇-水或乙腈-水的混合溶劑作為流動相。使用反相色譜，制劑中極性的附加劑及其他干擾組分 先流出，不會停留在色譜柱上污染色譜柱。若分離酸性組分，如丹參素、黃芩甙、甘草酸等，可在流動相 中適量加入酸，如醋酸、磷酸，以抑制其解離；對酸性較強的組分，也可使用離子對色譜法，常用的反離 子試劑有氫氧化四丁基銨等。若為堿性組分，如小檗堿、麻黃堿等，多采用反相離子對色譜法，在酸性流 動相中加入烷基磺酸鹽，有機酸也可使用無機陰離子，如磷酸鹽作為反離子。一般使用紫外檢測器，紫外 檢測器靈敏、穩(wěn)定。 |
