和厚樸酚在帕金森病小鼠模型中的神經(jīng)保護(hù)作用 | 和厚樸酚在帕金森病小鼠模型中的神經(jīng)保護(hù)作用 |
| 發(fā)布時間:2015-09-29 信息來源:admin 發(fā)布人:admin 點(diǎn)擊次數(shù):2333 |
帕金森病(Parkinson disease，PD)是一種常見的中 老年神經(jīng)系統(tǒng)疾病，病因尚不明確。和厚樸酚(honoki— ol，HL)是從中藥厚樸中提取的含酚羥基的生物活性 物質(zhì)，具有清除自由基、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞損傷等作用。 筆者應(yīng)用神經(jīng)毒素1一甲基～4一苯基一1，2，3，6一四氫吡啶 (MP1rP)制作帕金森病小鼠模型，以期闡明和厚樸酚對 神經(jīng)元的保護(hù)作用和可能的作用機(jī)制。 關(guān)鍵詞：和厚樸酚 厚樸提取物 長沙上禾生物 帕金森病 1．1 實(shí)驗(yàn)材料C57BL／6雄性小鼠60只，體重20～ 25g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供。和厚樸酚（長沙上禾生物www.csnutilities.com） 1．2 方法 1．2．1 動物模型的建立及分組給藥小鼠隨機(jī)分為5 組，每組12只，分別為對照組、MP，rP模型組、金剛烷 胺組(陽性對照，40mg／kg)、和厚樸酚A組(10mg／kg)、 和厚樸酚B組(30mg／kg)。金剛烷胺與和厚樸酚均為 預(yù)防性給藥，連續(xù)灌胃14d。除對照組給予等體積的生理鹽水外，其余4組均從用藥第11天開始，在灌胃給 藥前1h腹腔注射MPTP 30mg／kg，連續(xù)4d，最后1次 給藥后1d進(jìn)行行為學(xué)指標(biāo)測試，4d后脫頸處死，分別 取小鼠腦紋狀體和黑質(zhì)，于-80℃保存，用于測定組織 中多巴胺(dopamine，DA)含量。判定造模成功指標(biāo)為： 小鼠出現(xiàn)暫時性軀干震顫、豎毛、尾巴過伸、動作減少 等不自主運(yùn)動。 1．2．2 一般行為學(xué)觀察 觀察小鼠在腹腔給予 MPTP造模后的一般行為表現(xiàn)，有無異常反應(yīng)，比較各 組之間的差異。 1．2．3 自主活動實(shí)驗(yàn)使用XZ24型小鼠自主活動儀 測定小鼠自發(fā)活動并計(jì)數(shù)。將小鼠放入自主活動箱中 (高13cm，直徑25cm，每次同時測定4只小鼠，每個活 動箱中1只)由記錄儀自動記錄小鼠活動，測定每只小 鼠5min內(nèi)的活動次數(shù)[2]。 1．2．4 DA含量測定 采用高效液相一電化學(xué)法 (HPLC_EC)測定紋狀體內(nèi)DA的含量。 1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以至±s表示，經(jīng)SPSS 13．0統(tǒng)計(jì)軟件處理。5組之間兩兩比較采用單因素方 差分析，以P<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2 結(jié) 果 2．1 一般行為學(xué)觀察腹腔給予MPTP(30mg／kg)后 5min，小鼠出現(xiàn)暫時性軀干震顫、豎毛、尾巴過伸、動作 減少等不自主運(yùn)動，證明帕金森模型建立成功。與對 照組相比，MPTP模型組小鼠的一般行為表現(xiàn)異常，大 多數(shù)出現(xiàn)下列變化：舉尾、豎毛、唾液分泌增多、呼吸加 快、肌張力減退以及牙顫等，持續(xù)時間一般為3-4h。 而和厚樸酚A組、B組和金剛烷胺組，其癥狀表現(xiàn)較 輕，持續(xù)時間較短。 2．2 自主活動實(shí)驗(yàn)MPTP模型組5min自主活動次 數(shù)比對照組明顯減少(P<0．01)；和厚樸酚A組和B組 分別與MPTP模型組相比，5min自主活動次數(shù)明顯增 JJI1(P<0．05)。金剛烷胺組與和厚樸酚A、B組相比，自 主活動次數(shù)無明顯差異(P>0．05，表1)。 2．3 DA含量MPTP模型組與對照組相比，DA含量 明顯降低(P<0．01)。和厚樸酚A、B組以及金剛烷胺 組的DA含量均明顯高于模型組，(PO．05)，說明給予和厚樸酚預(yù)處理，能夠增加紋狀體內(nèi)DA的含量(表 1) 3 討 論 利用MPTP造模是目前最常用的制備帕金森病 動物模型的方法。單胺氧化酶B將MPTP催化為 MPP(+)，通過抑制線粒體氧化呼吸鏈、產(chǎn)生反應(yīng)氧族 和一氧化氮等，導(dǎo)致黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元壞死、凋亡， 使動物產(chǎn)生類似于帕金森病的癥狀和病理改變。本實(shí) 驗(yàn)結(jié)果表明，MPTP可誘發(fā)小鼠在行為學(xué)方面出現(xiàn)肌 肉震顫、隨意運(yùn)動增加、自主活動次數(shù)減少等類似帕金 森病的特征。 厚樸酚(magnolo1)、和厚樸酚是我國傳統(tǒng)中藥厚樸 的兩種主要活性成分，臨床應(yīng)用具有抗焦慮、抗抑郁、 抗嗎啡戒斷反應(yīng)、抑制兒茶酚胺分泌等作用。研究表 明0．2mg／kg或更大劑量的和厚樸酚不僅可抗焦慮，而 且無安定樣副作用[4]。和厚樸酚通過拮抗Na 和Ca。 等離子的細(xì)胞內(nèi)流，從而抑制乙酰膽堿誘導(dǎo)的腎上腺 嗜鉻細(xì)胞瘤中兒茶酚胺的分泌。 本研究發(fā)現(xiàn)，和厚樸酚能使帕金森病模型大鼠的 行為癥狀有不同程度的改善，能提高紋狀體內(nèi)DA水 平，并能改善自主活動能力。推測其機(jī)制可能與和厚 樸酚可營養(yǎng)神經(jīng)元，促DA能神經(jīng)元存活、分化和生 長，從而部分恢復(fù)DA合成及代謝等作用有關(guān)。 厚樸提取物 和厚樸酚 厚樸酚 厚樸總酚 長沙上禾生物 www.csnutilities.com |
