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摘要 研究了綠原酸的穩(wěn)定性并進(jìn)行了沉降試驗(yàn),結(jié)果表明,綠原酸在溫度小于60 ℃保持4h以下及酸性、室內(nèi)閉光的條件下比較穩(wěn)定,而在堿性、強(qiáng)光照射下不穩(wěn)定;同時(shí),沉降劑(cjh∶cjj =1∶3) 使用不利于杜仲葉中有效成分綠原酸的提取,造成綠原酸1%的損失。

關(guān)鍵詞 杜仲;綠原酸;穩(wěn)定性;沉降試驗(yàn) 上禾生物

杜仲( Eucommiaulmoides Oliv) 系杜仲科杜仲屬植物[1], 現(xiàn)代藥理研究表明, 杜仲中許多有效成分具有消炎抑菌、抗癌、增強(qiáng)免疫力等功能, 尤其是杜仲的降壓作用無(wú)不良副反應(yīng), 被認(rèn)為是當(dāng)今世界上最高質(zhì)量的天然降壓藥物, 戚向陽(yáng)等發(fā)現(xiàn), 杜仲中的綠原酸等均有不同程度的降壓作用, 且葉中的綠原酸含量為同產(chǎn)地杜仲皮的30～60 倍。根據(jù)有關(guān)的藥理作用, 對(duì)杜仲葉提取物中綠原酸在加工工藝的穩(wěn)定性及沉降試驗(yàn)方面進(jìn)行了研究。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 杜仲提取物, 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品,UV-160 型紫外分光光度計(jì),高效液相色譜儀(LC-9A島津) 。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品的配制。精確稱取一定量的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇溶液配制成濃度為0.103mg/ ml 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.2 綠原酸對(duì)熱穩(wěn)定性的研究。吸取等量稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在室溫、40、50、60、70、80 ℃下分別加熱24h,分別于0、1、2、3、5、6、8、12、16、20、24h取樣,在λ=317nm處測(cè)吸光值A。

1.2.3 綠原酸對(duì)pH值穩(wěn)定性的研究。分別用1N的鹽酸( 或者10%的NaOH溶液) 調(diào)節(jié)綠原酸標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液pH值,使其呈現(xiàn)pH=1、3、5、7、9、11、13 系列。UV-160 紫外分光光度儀測(cè)定其吸光值A,同時(shí)觀察其變化。

1.2.4 光照對(duì)綠原酸穩(wěn)定性的影響。在太陽(yáng)照射與室內(nèi)兩種條件下研究光照對(duì)綠原酸穩(wěn)定性的影響。

1.2.5 綠原酸的沉降試驗(yàn)。

1.2.5.1 沉降試驗(yàn)。以1g 沉降劑分別置于500,1000,2000、3000ml 杜仲提取濃縮液中,靜止1h取樣,高效液相色譜法測(cè)定其中綠原酸含量的變化情況, 同時(shí)以不加沉降劑的500ml 杜仲提取濃縮液為對(duì)照( CK) 。

1.2.5.2 高效液相色譜法測(cè)定。色譜條件:色譜柱ODS-C1810μm,4.6mm×250mm;流動(dòng)相∶甲醇∶水∶乙酸=60∶40∶0.5( V/V) ;流速:1.0ml/ min;柱溫:30 ℃; 檢測(cè)波長(zhǎng):317nm;進(jìn)樣量:5μl 。根據(jù)標(biāo)樣的保留時(shí)間定性,按峰面積計(jì)算綠原酸含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對(duì)杜仲有效成分綠原酸穩(wěn)定性的影響

由表1 可知,在室溫條件下,綠原酸隨時(shí)間的推移,分解較緩慢,0h時(shí)的吸光值為2.44,24h后吸光值為2.33,24h內(nèi)A值僅下降0.11;隨溫度的升高, 綠原酸受熱時(shí)間的延長(zhǎng), 其分解也相應(yīng)加快,在60 ℃時(shí)分解較快,0h時(shí)的吸光值為2.45,24h后吸光值為1.20,24h內(nèi)吸光值下降了1.25; 而在80 ℃時(shí)0h時(shí)吸光值為2.45,24h后吸光值為1.18,下降了1.27。

2.2  pH值對(duì)杜仲有效成分綠原酸穩(wěn)定性的影響 在pH值為1、3、5、7、9、11、13 時(shí), 綠原酸的吸光值分別為2.13、2.45、2.21、2.14、1.36、1.14、0.93。由此看出, 當(dāng)其為酸性時(shí),, 有效成分綠原酸較穩(wěn)定, 而當(dāng)其為堿性時(shí), 綠原酸極易被分解破壞; 其中當(dāng)pH=3 時(shí),吸光值最大, 綠原酸也最穩(wěn)定。

2.3 光照對(duì)綠原酸穩(wěn)定性的影響 在太陽(yáng)照射下, 綠原酸的吸光值為1.70, 而在室內(nèi)吸光值為2.16。由此表明, 太陽(yáng)光照射下, 綠原酸不穩(wěn)定易分解,在室內(nèi)條件下,綠原酸相對(duì)較為穩(wěn)定;因此綠原酸應(yīng)盡量避免強(qiáng)光照射。

2.4 沉降試驗(yàn) 由表2 可知, 對(duì)照中綠原酸含量較高, 達(dá)到5.35%,而使用沉降劑的樣品溶液中綠原酸的含量普遍下降一個(gè)多百分點(diǎn),由此得出該沉降劑的使用不利于產(chǎn)品質(zhì)量的提高, 會(huì)造成綠原酸含量的損失,對(duì)生產(chǎn)極為不利。

3 結(jié)論與討論

(1) 綠原酸的熱穩(wěn)定性較差, 在生產(chǎn)工藝中為保證產(chǎn)品質(zhì)量,要注意溫度應(yīng)小于60 ℃,加工時(shí)間盡量保持在4～6h內(nèi), 以小于4h為佳。

(2) 綠原酸在酸性條件下較穩(wěn)定, 并且當(dāng)pH=3 時(shí)最穩(wěn)定;在堿性條件下易被分解破壞, 不穩(wěn)定, 因此, 在進(jìn)行綠原酸的提取分離時(shí), 應(yīng)盡量保持在中性或酸性條件下進(jìn)行。

(3) 強(qiáng)光照射使得綠原酸易分解,不穩(wěn)定; 室內(nèi)條件下較穩(wěn)定, 因此產(chǎn)品應(yīng)避光保存。

(4) 沉降劑的使用會(huì)導(dǎo)致綠原酸的大量損失, 給生產(chǎn)帶來(lái)不利, 因此, 在杜仲提取液中不宜選用沉降劑來(lái)沉降提取液中的雜質(zhì)。

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